悪性神経膠腫由来のエクソソームを介したミクログリアによる微小環境整備の解明

2019 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 18H02910
• 研究機関: 金沢大学
• 研究代表者: 中田 光俊 金沢大学, 医学系, 教授 (20334774)
• 研究分担者: 華山 力成 金沢大学, ナノ生命科学研究所, 教授 (40403191)
• 研究期間 (年度): 2018-04-01 – 2021-03-31
• キーワード: 悪性神経膠腫 / エクソソーム / マイクログリア / 細胞外微小環境

研究実績の概要

悪性神経膠腫がその悪性形質を維持するために、腫瘍細胞が分泌するエクソソームにより腫瘍微小環境を整備しているとの仮説に基づいて、引き続き研究を進めている。3種類の膠芽腫細胞株（U87、U251、T98G）から抽出したエクソソームをマイクログリア細胞株（MG6）に添加し、MG6内の遺伝子発現変動をRNAシークエンスで網羅的に解析した。現在、最も変化量の大きかった血管新生抑制タンパク遺伝子Thrombospondin 1（Thbs1）に着目している。膠芽腫細胞由来エクソソームをそれぞれ独立してMG6添加することにより、MG6細胞内のThbs1遺伝子の発現が共通して低下することを定量的PCR法で確認した。次に、膠芽腫細胞由来エクソソーム内にはThbs1遺伝子を制御しうる分子として、転写調節因子であるWT1タンパクが含まれることを示した。引き続き、WT1低発現T98G株を作成し、そのエクソソームを添加したMG6内のThbs1発現の亢進を確認した。さらに再度WT1を発現させるとThbs1発現が低下した。このことから膠芽腫細胞から分泌されるエクソソーム内のWT1タンパクがマイクログリアに取り込まれThbs1遺伝子の発現低下をきたすことが明らかとなった。これは仮説通り、膠芽腫の微小環境整備にエクソソームが関与しており、マイクログリアを介した機序があることが示唆している。今後はin vivoモデルでの検証に加え、ヒト膠芽腫患者由来検体でのエクソソーム内WT1発現の確認を進める予定である。

現在までの達成度 (区分)

2: おおむね順調に進展している

理由

実験がスムーズに進行したため。

今後の研究の推進方策

当初の予定通りに遂行する。

研究成果

• [雑誌論文] Ligand-dependent EphB4 activation serves as an anchoring signal in glioma cells (2019)
  • 著者名/発表者名: Kawahara Yosuke、Furuta Takuya、Sabit Hemragul、Tamai Sho、Dong Yu、Jiapaer Shabierjiang、Zhang Jiakang、Zhang Guangtao、Oishi Masahiro、Miyashita Katsuyoshi、Hayashi Yasuhiko、Nakada Mitsutoshi
  • 雑誌名: Cancer Letters 巻: 449 ページ: 56～65
  • DOI: 10.1016/j.canlet.2019.02.021
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] Identification of GSK3β inhibitor kenpaullone as a temozolomide enhancer against glioblastoma (2019)
  • 著者名/発表者名: Kitabayashi Tomohiro、Dong Yu、Furuta Takuya、Sabit Hemragul、Jiapaer Shabierjiang、Zhang Jiakang、Zhang Guangtao、Hayashi Yasuhiko、Kobayashi Masahiko、Domoto Takahiro、Minamoto Toshinari、Hirao Atsushi、Nakada Mitsutoshi
  • 雑誌名: Scientific Reports 巻: 9 ページ: 10049
  • DOI: 10.1038/s41598-019-46454-8
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] MicroRNA regulating stanniocalcin-1 is a metastasis and dissemination promoting factor in glioblastoma (2019)
  • 著者名/発表者名: Sakata J, Sasayama T, Tanaka K, Nagashima H, Nakada M, Tanaka H, Hashimoto N, Kagawa N, Kinoshita M, Nakamizo S, Maeyama M, Nishihara M, Hosoda K, Kohmura E.
  • 雑誌名: J Neurooncol 巻: 142 ページ: 241-251
  • DOI: 10.1007/s11060-019-03113-2
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] Fibulin‐7 is overexpressed in glioblastomas and modulates glioblastoma neovascularization through interaction with angiopoietin‐1 (2019)
  • 著者名/発表者名: Vega Susana、Kondo Akihide、Suzuki Mario、Arai Hajime、Jiapaer Shabierjiang、Sabit Hemragul、Nakada Mitsutoshi、Ikeuchi Tomoko、Ishijima Muneaki、Arikawa‐Hirasawa Eri、Yamada Yoshihiko、Okada Yasunori
  • 雑誌名: International Journal of Cancer 巻: 145 ページ: 2157～2169
  • DOI: 10.1002/ijc.32306
  • 査読あり / オープンアクセス
• [学会発表] 膠芽腫由来細胞外小胞による腫瘍微小環境整備機構の解明 (2019)
  • 著者名/発表者名: 筒井 泰史, 河原 裕憲, 華山 力成, 中田 光俊
  • 学会等名: 第78回日本脳神経外科学会 学術総会