| 研究課題/領域番号 |
18H02944
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| 研究機関 | 福井大学 |
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研究代表者 |
吉田 好雄 福井大学, 学術研究院医学系部門, 教授 (60220688)
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| 研究分担者 |
辻川 哲也 福井大学, 高エネルギー医学研究センター, 准教授 (30380033)
清野 泰 福井大学, 高エネルギー医学研究センター, 教授 (50305603)
岡沢 秀彦 福井大学, 高エネルギー医学研究センター, 教授 (50360813)
水谷 哲也 福井県立大学, 看護福祉学部, 教授 (90322734)
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| 研究期間 (年度) |
2018-04-01 – 2021-03-31
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| キーワード | Radiogenomics解析 / 遺伝子プロファイリング / 肺転移マウスモデル |
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| 研究実績の概要 |
子宮肉腫は、外科的に完全摘出した症例でも、50%以上に遠隔転移が生じることから「場」と「時間」の情報を基に、転移のメカニズムを解明するために、転移関連発現遺伝子の「機能と構造」変化の検討を行う必要がある。特に肺を標的にした検討が必要になるため、我々は、イメージングで腫瘍形成・肺転移形成を、in vivoモニタリング可能という特色を有する、子宮肉腫の肺転移臨床像を反映したトランスレーショナル動物実験系の開発を試みその作成に成功した。この肺転移マウスモデルを用いると、標的臓器（肺）の転移前・転移初期・転移完成期の病態をイメージング法で同定可能であるため、各段階での各臓器（原発巣・転移巣）の分子ゲノム変化が詳細に検討可能である。そこで今年度は、我々が独自に作成した転移能の異なるin vivoモデルでの原発腫瘍、転移巣および正常組織の細胞をフローサイトメーターなどで細胞単離し、遺伝子プロファイリング、RNAsequential法、さらにはGene Chip3 IVT Expression Kit(Affymetric Santa Clare, CA, USA)を用いてマイクロアレイ法により比較し、発現レベルに顕著な差を有する遺伝子を同定した。さらに、キャップ化されたRNAの5’末端を次世代シークエンシングで解読する、Cap Analysis of Gene Expression法により、未知の発現遺伝子解析、転写開始点または発現量の変化を検討した。それぞれの遺伝子は、DAVIO (the database for annoration, visualization and integradediscovery)バイオインフォマチスリソース6.7で生物学的機能を検討した。これらは現在論文作成中であるが主にPI3K-AKT、またはテロメレース関連遺伝子群と相関していた。
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| 現在までの達成度 (区分) |
現在までの達成度 (区分)
2: おおむね順調に進展している
理由
当初計画していた臨床像を反映する動物モデル実験系は、約80%以上の確率で再現性を有し、高転移系と低転移系はanimal PETでモニタリング可能であることが確認でき、その後の実験が遂行可能と判断された。また、animal PETでモニタリングできない場合でも、GFPイメージング法で、モニタリングを行う事が可能という事が判明した。原発巣・転移巣からの遺伝子プロファイリングを行うが、RNAsequential法, Gene Chip3 IVT Expression Kit (Affymetric Santa Clare, CA, USA)を用いる以外に、県立大学水谷らのグループと、キャップ化されたRNAの5’末端を次世代シークエンシングで解読する、Cap Analysis of Gene Expression(CAGE)法用いるため、未知の発現遺伝子解析、転写開始点または発現量の変化を検討することが可能になり、いくつかの遺伝子群を同定することができた。薬物投与手技は、安定している。現在いくつかの予備実験を繰り返している。
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| 今後の研究の推進方策 |
①In vivo薬剤同時投与比較試験の「Radiogenomics解析法」を用いた薬物動態検討（研究代表者）・（研究分担者）
「同一条件下」で、「複数」の薬剤を、「同時期」に検討することができるComparative In Vivo Oncology arrayed microinjection薬剤感受性試験（Science Transl Med. 2015）を用いて、in vivoでの薬物動態学的作用を「Radiogenomics解析」で評価し、「原発巣」のみならず「転移巣」における、薬剤感受性あるいは抵抗性関連発現遺伝子の発現を動的な観点からも検討する。
②新規ラミニンペプチドアナログの、治療薬の検討（研究代表者）・（研究分担者）
新規ラミニンペプチド (C16Y)の腫瘍細胞への検討は、NIH Hynda Kleinmannらと共同で行ってきた。特に卵巣癌細胞株を用いた実験では、アポトーシスを誘導し、シスプラチンと相乗効果があることを見出した。最近、腫瘍の増殖に対して腫瘍血管抑制能があることが判明した。今後C16Yの、子宮肉腫に対する作用を検討する。
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