| 研究課題/領域番号 |
18H02961
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| 研究機関 | 神戸大学 |
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研究代表者 |
寺師 浩人 神戸大学, 医学部附属病院, 教授 (80217421)
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| 研究分担者 |
野村 正 神戸大学, 医学部附属病院, 准教授 (30529566)
榊原 俊介 神戸大学, 医学研究科, 客員准教授 (50444592)
橋川 和信 神戸大学, 医学部附属病院, 医学研究員 (90403237)
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| 研究期間 (年度) |
2018-04-01 – 2021-03-31
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| キーワード | 皮膚線維芽細胞 / 光受容 / 生体時計 |
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| 研究実績の概要 |
mouse Bmal1 promoter領域にルシフェラーゼ遺伝子およびPEST配列を複合したベクターを構築した。これをトランスフェクション試薬を用いてヒト培養皮膚線維芽細胞に対して導入した。その後、２日間の暗順応を行ったのち、ルシフェリン添加培地に入れ替えた。この際、全て暗室下に実験を行った。検討群を次の５つに分けた。１）ベクター非導入群、２）デキサメタゾン添加群、３）480nm光照射群(10分）、４）デキサメタゾン添加後480nm光照射群、５）480nm光照射後デキサメタゾン添加群 とした。
これらに対してリアルタイムに発光量を５日間、測定した。その結果、１）群では発光は認められなかった。２）から５）はいずれも測定開始後、約12時間かけてBmal1の発現量は上昇し、その後、現象する傾向があった。また、いずれのリズムの形成が認められたが、その周期は約23時間であった。４）および５）については、それぞれの一次刺激ののち１０－１５時間の間に二次刺激を行った。いずれの二次刺激によってもBmal1の発現は減退する傾向にあったが、それぞれの一次刺激によって形成されたリズムを変化させるには至らなかった。
以上のことより、細胞によるリズム形成は一次刺激によりメモリーされた場合、外部環境からの二次刺激を加えても修正されにくいことが示唆された。一方で、二次刺激の導入時刻の検討は行っておらず、これらの実験データは必ずしも二次刺激が無効であることを示すものではない。
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| 現在までの達成度 (段落) |
令和2年度が最終年度であるため、記入しない。
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| 今後の研究の推進方策 |
令和2年度が最終年度であるため、記入しない。
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