| 研究課題/領域番号 |
18J00045
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| 研究機関 | 大学共同利用機関法人自然科学研究機構(新分野創成センター、アストロバイオロジーセンター、生命創成探究 |
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研究代表者 |
鈴木 大地 大学共同利用機関法人自然科学研究機構(新分野創成センター、アストロバイオロジーセンター、生命創成探究, 生命創成探究センター, 特別研究員(PD)
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| 研究期間 (年度) |
2018-04-25 – 2021-03-31
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| キーワード | ゲノム編集 / CRISPR-Cas9 / ヤツメウナギ / in vivo パッチクランプ法 |
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| 研究実績の概要 |
本年度では、まずCRISPR-Cas9 ノックイン実験の条件検討を行った。ヤツメウナギ受精卵へのインジェクションのダメージを極力少なくし、短時間で効率的にインジェクションを進められる実験系を確立した。また、ヤツメウナギのヒートショックプロモーターを組み込んだベクターの活性も確認した。
また行動実験では、独自の実験装置を構築し、自由遊泳下のヤツメウナギに負の光走性が確認された。
さらに in vivo パッチクランプ法の実験系の構築も進めた。本実験手法はゼブラフィッシュ幼生などでは技術が確率されているが、ヤツメウナギでは初の試みである。試行錯誤の結果、本年度中に神経活動の記録に成功した。
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| 現在までの達成度 (区分) |
現在までの達成度 (区分)
2: おおむね順調に進展している
理由
CRISPR-Cas9ノックイン実験については各種の条件検討が済んだ。行動実験についても、自由遊泳下での実験について実験系を構築したうえで所定の実験を行い、所定の結果を得た。 in vivo パッチクランプ法の実験系の構築も進め、神経活動の記録に成功した。
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| 今後の研究の推進方策 |
CRISPR-Cas9ノックイン実験については、来年度から本実験を行い、実際の標的遺伝子特異的にレポーター遺伝子を発現させる実験を行う。行動実験については、頭部固定下での遊泳の実験を行う。in vivo パッチクランプ法については、実験系の精緻化、高効率化を行う。
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