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本研究では、動物体内で臓器を創成する胚盤胞補完法を用いた幹細胞由来臓器移植の実現を目指し、ヒトと共通の疾病を自然発症する唯一の動物種であるイヌを研究対象として人工胚体外内胚葉細胞（iXEN細胞）由来臓器の作製および作製臓器を用いたトランスレーショナルリサーチを目的とし、実験を遂行する。本研究が完成すれば、イヌiXEN細胞を用いた臓器補完技術を使用することで、ヒト臨床試験の疾患治療モデルの作製を行うことが可能であり、得られた情報を人医学に応用し、多くの疾患の治療・機序の解明に寄与することができると考えられる。本年度は、当研究者が作製したイヌiXEN細胞のキメラ形成能の有無を確認するとともに、イヌiXEN細胞の培養条件をヒトに応用することにより、ヒトiPS細胞からイヌiXEN細胞と類似した幹細胞の誘導した。また、新型のセンダイウイルスベクターを用いることで、イヌ体細胞から遺伝子組み換えが無く、酵素を用いた単一細胞継代が可能なイヌiPS細胞の作製に成功し、これを論文報告した。イヌiXEN細胞においては、BCL2遺伝子等の細胞死阻害を誘導する遺伝子発現が無ければ、キメラ胚内で死滅することが確認できたので、当初の計画通り細胞死阻害を誘導する遺伝子を導入し、キメラ胚の作製を試みる。今年度は、イヌiXEN細胞のキメラ形成能を確認するとともに、ヒトにおいてもiXEN細胞に類似した細胞を誘導することができた。また、より安全性の高いイヌ多能性幹細胞の作製に成功したことから、これらの幹細胞を用いることで、胚盤胞補完法による臓器作製を進める予定である。
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