実験モデルを用いた肺非結核性抗酸菌症の疾患感受性遺伝子の機能解析

2019 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 18J02173
• 研究機関: 国立感染症研究所
• 研究代表者: 朝倉 崇徳 国立感染症研究所, ハンセン病研究センター感染制御部, 特別研究員(PD)
• 研究期間 (年度): 2018-04-25 – 2021-03-31
• キーワード: 肺非結核性抗酸菌症 / 気管支拡張症 / Mycobacterium avium

研究実績の概要

共同研究で実施している肺非結核性抗酸菌(NTM)症に関するゲノムワイド関連解析において候補SNPおよび疾患感受性遺伝子Xが同定された。肺NTM症の疾患感受性遺伝子Xが恒常的に検出されていることがデータベースで確認されている、ヒト上皮細胞株H292細胞株に対して、Mycobacterium avium subsp. Hominissuis (MAH)104株を感染させ、菌の細胞内への取り込みおよびその後の細胞内増殖の変化、疾患感受性遺伝子Xの変動を経時的に確認した。菌に関しては培養およびチールニールゼン染色で評価した。その後同様の実験をsiRNAによるknockdown(KD)、プラスミドによるoverexpression(OE)を試み施行した。それぞれの遺伝子のKDおよびOEは確認したものの、菌量および遺伝子発現の明確な差は検出できなかった。同様の実験をヒト気道上皮株であるBEAS2Bで施行したが、同様に明確な差が得られなかった。ヒト末梢血単核球細胞(PBMC)に対する経時的な感染実験においても候補遺伝子をいくつか検討したが、明確な上昇を得ることはできなかった。その後、Primary Human Bronchial Epithelial Cellsの培養系において遺伝子Xの発現を確認し、電気穿孔法を用いたCRISPR-Cas9およびgRNAの導入により遺伝子Xのノックアウト株の樹立に成功した。今後、気相液相界面培養(ALI)による分化後の変化を検討する予定である。また、同細胞の培養系において、レンチウイルスを用いた過剰発現の系も実施予定である。また、肺組織において同遺伝子の発現局在を確認した。今後は疾患肺との比較を行う予定である。

現在までの達成度 (段落)

翌年度、交付申請を辞退するため、記入しない。

今後の研究の推進方策

翌年度、交付申請を辞退するため、記入しない。

研究成果

• [国際共同研究] ノースカロライナ大学(米国)
  • 国名: 米国
  • 外国機関名: ノースカロライナ大学
• [雑誌論文] ADAM17 protects against elastase-induced emphysema by suppressing CD62L+ leukocyte infiltration in mice (2020)
  • 著者名/発表者名: Suzuki Shoji、Ishii Makoto、Asakura Takanori、Namkoong Ho、Okamori Satoshi、Yagi Kazuma、Kamata Hirofumi、Kusumoto Tatsuya、Kagawa Shizuko、Hegab Ahmed E.、Yoda Masaki、Horiuchi Keisuke、Hasegawa Naoki、Betsuyaku Tomoko
  • 雑誌名: American Journal of Physiology-Lung Cellular and Molecular Physiology 巻: 318 ページ: L1172～L1182
  • DOI: 10.1152/ajplung.00214.2019
  • 査読あり
• [雑誌論文] Complete Genome Sequence of Mycobacterium xenopi JCM15661T, Obtained Using Nanopore and Illumina Sequencing Technologies (2020)
  • 著者名/発表者名: Yoshida Mitsunori、Fukano Hanako、Asakura Takanori、Hisatsune Junzo、Hoshino Yoshihiko
  • 雑誌名: Microbiology Resource Announcements 巻: 9 ページ: e01583-19
  • DOI: 10.1128/MRA.01583-19
  • 査読あり
• [雑誌論文] Long-Lasting Response to Nivolumab for a Patient With Lynch Syndrome?Associated Lung Adenocarcinoma (2020)
  • 著者名/発表者名: Masuzawa Keita、Asakura Takanori、Ikemura Shinnosuke、Yasuda Hiroyuki、Kawada Ichiro、Takaoka Sosuke、Hayashi Yuichiro、Nakajima Takeshi、Arai Masami、Fukunaga Koichi、Soejima Kenzo
  • 雑誌名: JCO Precision Oncology 巻: 4 ページ: 74～78
  • DOI: 10.1200/PO.19.00156
  • 査読あり
• [雑誌論文] Low serum estradiol levels are related to Mycobacterium avium complex lung disease: a cross-sectional study (2019)
  • 著者名/発表者名: Yoshifumi Uwamino, Tomoyasu Nishimura, Yasunori Sato, Eiko Tamizu, Takanori Asakura, Shunsuke Uno, Masaaki Mori, Hiroshi Fujiwara, Makoto Ishii, Hiroshi Kawabe, Mitsuru Murata & Naoki Hasegawa
  • 雑誌名: BMC Infectious Diseases 巻: 19 ページ: 1055
  • DOI: /10.1186/s12879-019-4668-x
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] Airway M Cells Arise in the Lower Airway Due to RANKL Signaling and Reside in the Bronchiolar Epithelium Associated With iBALT in Murine Models of Respiratory Disease (2019)
  • 著者名/発表者名: Kimura Shunsuke、Mutoh Mami、Hisamoto Meri、Saito Hikaru、Takahashi Shun、Asakura Takanori、Ishii Makoto、Nakamura Yutaka、Iida Junichiro、Hase Koji、Iwanaga Toshihiko
  • 雑誌名: Frontiers in Immunology 巻: 10 ページ: 1323
  • DOI: 10.3389/fimmu.2019.01323
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] Pneumothorax associated with giant bullous emphysema and mediastinum deviation (2019)
  • 著者名/発表者名: Horiuchi Kohei、Asakura Takanori、Ochi Junichi、Saito Fumitake
  • 雑誌名: BMJ Case Reports 巻: 12 ページ: e230353～e230353
  • DOI: 10.1136/bcr-2019-230353
  • 査読あり
• [雑誌論文] Placental transmogrification of the lung masquerading as difficult-to-treat pneumonia (2019)
  • 著者名/発表者名: Horiuchi K、Asakura T、Sakaguchi S、Saito F、Yamamoto J
  • 雑誌名: QJM: An International Journal of Medicine 巻: 13 ページ: 213-214
  • DOI: 10.1093/qjmed/hcz153
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] Successful osimertinib treatment in a patient who exhibited intramedullary spinal cord metastases of lung adenocarcinoma with an acquired EGFR T790M mutation (2019)
  • 著者名/発表者名: Horiuchi Kohei、Asakura Takanori、Sakaguchi Shinji、Saito Fumitake
  • 雑誌名: BMJ Case Reports 巻: 12 ページ: e229310～e229310
  • DOI: doi: 10.1136/bcr-2019-229310
  • 査読あり