2020 年度研究成果報告書

TALEの高いDNA配列認識特性を利用した遺伝子変異検査法の開発

研究課題

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研究課題/領域番号	18K04849
研究種目	基盤研究(C)
配分区分	基金
応募区分	一般
審査区分	小区分27040:バイオ機能応用およびバイオプロセス工学関連
研究機関	富山大学
研究代表者	迫野昌文富山大学, 学術研究部工学系, 准教授 (50391959)
研究期間 (年度)	2018-04-01 – 2021-03-31
キーワード	遺伝子検査 / TALEN / ゲノム編集
研究成果の概要	特定の位置にミスマッチを故意に導入したTALEを作製（ミスマッチ法）すると、DNAの1塩基の違いを明確に区別し、劇的に解離定数が変化した。ミスマッチ法で作製したTALENは、ターゲット配列を選択的に切断し、1塩基異なる非ターゲット配列は切断されなかった。この結果は、ミスマッチ法で作製したTALEが、従来法で作製したTALEよりも、高い配列特異性と正確性があることを意味している。
自由記述の分野	タンパク質工学
研究成果の学術的意義や社会的意義	ゲノム編集技術は細胞の特定の遺伝子を塩基配列特異的に編集できる技術だが、類似の塩基配列をもつ目的外の遺伝子の編集リスクが存在する。オフターゲット効果の低減は、発がんリスクの低減において極めて重要である。現在の塩基配列分析法において、in vivo遺伝子修正による目的遺伝子以外の遺伝子改変が生じた際の、改変部位の特定は非常に難しいといわれている。オフターゲット変異はゲノムワイドに生じることから、精度の高い全ゲノムシーケンス解析が要求される。したがって、意図しない編集が行われた際の部位特定は現状困難であり、治療の安全性を担保するには、正確性の高い遺伝子編集技術の開発が極めて重要であるといえる。