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2019 年度 実施状況報告書

オルガノゲル電気泳動とオンライン試料濃縮技術の結合に基づく生体高分子の高性能分析

研究課題

研究課題/領域番号 18K05162
研究機関弘前大学

研究代表者

北川 文彦  弘前大学, 理工学研究科, 准教授 (20362452)

研究期間 (年度) 2018-04-01 – 2021-03-31
キーワード分離分析 / 電気泳動分析 / オンライン試料濃縮 / グラジエント溶離
研究実績の概要

試料リザーバーから目的成分を供給しながらカラム全体に注入した試料溶液も濃縮するLVSEP-FASI法と非水系溶媒を用いるキャピラリーゲル電気泳動 (NACGE法) を組み合わせるため,キャピラリー電気泳動における検討を行った。はじめに比較のために水系においてLVSEP-FASIの濃縮性能を検討したところ,注入側の落差15 cm・濃縮時間0.5 minとしたとき,従来のNACGE分析と比較して2600倍の高感度化が達成された。次にメタノール系においてLVSEP-FASI分析を行ったところ,落差10 cm・濃縮時間5 minで濃縮率は14000倍と向上したが,ポリマーの溶解度が悪く,NACGE分析へ展開できなかった。そこでメタノール-DMSO混合溶媒系について検討したところ,0.1% HPMCを溶解でき,20% DMSOを用いると141000倍と非常に高効率な濃縮を達成した。これは20% DMSOの添加により粘性が適度に上昇したことやEOFが効果的に抑制されたことを反映して,試料のピーク広がりが抑制されたことで高い濃縮率が得られたものと考えられる。一方,NACGEとグラジエント溶離の結合について,カチオン性金属錯体の分析を可能とする新規グラジエント剤を探索した。これまでに有効性が明らかとなっているマロン酸を基準とし,種々の有機酸を検討したところ,ホウ酸がより有効であることが明らかとなった。これは,ホウ酸は糖のようなポリオール化合物と強い相互作用することが知られており,PVAとも強く相互作用した結果であると考えられる。以上の結果より,DMSO-メタノール混合溶媒とホウ酸を組み合わせることで,LVSEP-FASI-NACGEによる高感度かつグラジエント溶離を結合した高性能分離の実現の可能性が示された。

現在までの達成度 (区分)
現在までの達成度 (区分)

2: おおむね順調に進展している

理由

実施計画に記載したLVSEP-FASI-NACGE法の開発,NACGE-グラジエント溶離法の開発のいずれも順調に進展しているため

今後の研究の推進方策

当初の計画通り,LVSEP-FASI-NACGE法の進展ならびにNACGE-グラジエント溶離法の生体分析への応用を目指して研究を進めていく。

次年度使用額が生じた理由

前年度に購入予定だった高速CCDカメラの購入を断念したため,今年度使用額が生じており,有機溶媒の購入などに回して使用を進めていたが,次年度使用額が生じてしまった。この金額をすべて次年度の消耗品費(試薬費)に回すことで,研究のさらなる進展を図る。

  • 研究成果

    (7件)

すべて 2019

すべて 雑誌論文 (1件) (うち査読あり 1件、 オープンアクセス 1件) 学会発表 (5件) (うち国際学会 1件、 招待講演 1件) 図書 (1件)

  • [雑誌論文] LVSEP Analysis of Cationic Analytes in Non-Aqueous Capillary Electrophoresis2019

    • 著者名/発表者名
      KITAGAWA Fumihiko、OSANAI Osamu、NUKATSUKA Isoshi
    • 雑誌名

      CHROMATOGRAPHY

      巻: 40 ページ: 79~82

    • DOI

      10.15583/jpchrom.2019.008

    • 査読あり / オープンアクセス
  • [学会発表] グラジエント溶離-非水系キャピラリーゲル電気泳動分析によるアニオン性金属錯体分析2019

    • 著者名/発表者名
      北川文彦
    • 学会等名
      第30回クロマトグラフィー科学会議
  • [学会発表] Analysis of Anionic Metal Complexes by Gradient Elution-Non-aqueous Capillary Gel Electrophoresis2019

    • 著者名/発表者名
      Fumihiko Kitagawa
    • 学会等名
      HPLC2019 Kyoto
    • 国際学会
  • [学会発表] グラジエント溶離-非水系キャピラリーゲル電気泳動法の開発2019

    • 著者名/発表者名
      北川文彦
    • 学会等名
      第39回キャピラリー電気泳動シンポジウム
    • 招待講演
  • [学会発表] 非水系マイクロチップ電気泳動-LVSEP法によるカチオン分析の高感度化2019

    • 著者名/発表者名
      北川文彦
    • 学会等名
      日本分析化学会第68年会
  • [学会発表] LVSEP法によるカチオン種の非水系マイクロチップ電気泳動分析の高感度化2019

    • 著者名/発表者名
      北川文彦
    • 学会等名
      第26回クロマトグラフィーシンポジウム
  • [図書] 超微量分析入門2019

    • 著者名/発表者名
      井上満, 植田郁生, 齊戸美弘, 高橋隆子, 深澤亮一, 堀江正一, 北川文彦, 竹内豊英
    • 総ページ数
      200
    • 出版者
      オーム社
    • ISBN
      978-4274700859

URL: 

公開日: 2021-01-27  

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