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2022 年度 実績報告書

コナダニ類の脂質代謝に関わる酸化的な炭素鎖短縮反応の分子基盤

研究課題

研究課題/領域番号 18K05468
研究機関京都先端科学大学

研究代表者

清水 伸泰  京都先端科学大学, バイオ環境学部, 教授 (30434658)

研究期間 (年度) 2018-04-01 – 2023-03-31
キーワードコナダニ / 脂質代謝 / 炭化水素 / ギ酸エステル / Baeyer-Villiger酸化 / 生合成
研究実績の概要

無気門亜目ダニ(コナダニ)が分泌する脂肪酸由来化合物の代謝機構に注目し、有機化学的手法を用いた生合成研究を展開してきた。リノール酸とオレイン酸を原料とする天然物として希有な2種のギ酸エステルに対して13C標識化合物によるトレーサー実験により、どの生物種からも未発見のBaeyer-Villiger 酸化酵素の存在を実験的に証明した。コナダニの二次代謝物の生合成に深く関与する新規なBaeyer-Villiger 酸化酵素の同定を目指した。大量繁殖させたコナダニから粗酵素液を調製して、遠心分離法によって得た沈殿画分に酵素活性が認められたため、Triton X-100を添加して酵素を可溶化した。これらは膜タンパク質および核タンパク質である可能性が示唆された。現在、硫安による塩析と各種クロマトグラフィーによる精製を進めており、アミノ酸配列の決定を行う。目的の酵素を同定する別のアプローチとして、トランスクリプトーム解析を行った。本種ダニのようにゲノム配列の分かっていない非モデル生物でもde novo RNA-seq を行うことで、RNA分子の情報を網羅的に調べることができる。ダニのトランスクリプトーム塩基配列の情報をもとに既知のBVMOと配列類似性を示すタンパク質を検索したところ、6種のタンパク質が特有のBVMOモチーフ配列と2カ所のRossmanモチーフ配列をもつことが明らかとなった。なお、近年、フラビン含有モノオキシゲナーゼ(FMO)もBaeyer-Villiger 酸化を触媒するものが報告され、BVMOと類似のモチーフ配列をもつことが分かっている。異種発現系により候補遺伝子の酵素機能を調べるため、ダニからmRNAを抽出し、cDNAを合成後、これをテンプレートとして候補遺伝子をクローニングした。

  • 研究成果

    (5件)

すべて 2023 2022

すべて 雑誌論文 (2件) (うち査読あり 2件) 学会発表 (2件) 図書 (1件)

  • [雑誌論文] Do ‘cheese factory-specific’ mites (Acari: Astigmata) exist in the cheese-ripening cabinet?2022

    • 著者名/発表者名
      Shimano Satoshi、Hiruta Shimpei F.、Shimizu Nobuhiro、Hagino Wataru、Aoki Jun-ichi、OConnor Barry M.
    • 雑誌名

      Experimental and Applied Acarology

      巻: 87 ページ: 49~65

    • DOI

      10.1007/s10493-022-00725-8

    • 査読あり
  • [雑誌論文] Mite secretions from three traditional mite-ripened cheese types: are ripened French cheeses flavored by the mites (Acari: Astigmata)?2022

    • 著者名/発表者名
      Shimizu Nobuhiro、OConnor Barry M.、Hiruta Shimpei F.、Hagino Wataru、Shimano Satoshi
    • 雑誌名

      Experimental and Applied Acarology

      巻: 87 ページ: 309~323

    • DOI

      10.1007/s10493-022-00734-7

    • 査読あり
  • [学会発表] ササラダニ類が産生するシアン化合物からシアン化水素の生成機構2023

    • 著者名/発表者名
      森山太介、高原千尋、島野智之、清水伸泰
    • 学会等名
      日本農芸化学会
  • [学会発表] ダニ共生微生物群の菌叢解析とその諸性質の解析2022

    • 著者名/発表者名
      櫻間晴子、清水伸泰、坂本文夫、萩下大郎
    • 学会等名
      日本農芸化学会
  • [図書] 土の中の生き物たちのはなし2022

    • 著者名/発表者名
      島野 智之、長谷川 元洋、萩原 康夫
    • 総ページ数
      168
    • 出版者
      朝倉書店
    • ISBN
      978-4-254-17179-2

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公開日: 2023-12-25  

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