| 研究課題/領域番号 |
18K05669
|
|---|
| 研究機関 | 筑波大学 |
|---|
研究代表者 |
古川 誠一 筑波大学, 生命環境系, 准教授 (10391583)
|
|---|
| 研究期間 (年度) |
2018-04-01 – 2022-03-31
|
| キーワード | アワヨトウ / EPL / 遺伝子発現 / 包囲化反応 |
|---|
| 研究実績の概要 |
昆虫の血球細胞は、体内に侵入した病原微生物などの異物に対して、貪食や包囲化と呼ばれる免疫反応によって、対処する。この2種類の反応は、対象異物のサイズによって使い分けられているとされているが、血球細胞がどのように異物のサイズを認識しているかについての情報はない。我々は包囲下反応を促進するEPLと名付けたタンパク質を発見し、この分子を足掛かりにして、血球細胞がどのように異物のサイズを認識しているのかを明らかにすることを目的としている。
本年度は、EPLに対するポリクローナル抗体を作成し、EPLの局在性を明らかにすることで、EPLがどのように包囲下反応に関わっているかを調べた。その結果、EPLが異物を包囲する細胞に局在していることが分かった。異物を含まない血球の凝集塊にも局在が確認されたことから、EPLの機能は包囲化反応に特化したものではないことも示唆された。
昨年度クローニングしたEPLのプロモーター領域を含むレポータープラスミドを作成し、これをアワヨトウ由来の培養細胞に導入することによって、プロモーター解析を試みている。
|
| 現在までの達成度 (区分) |
現在までの達成度 (区分)
3: やや遅れている
理由
EPL抗体によるEPLタンパク質検出系は確立され、EPLタンパク質の局在する細胞がわかってきた。培養細胞にレポータープラスミドを効率よく導入する実験条件が見つかっていないため、プロモーター解析に関しては進捗が遅れている。EPLが作用する細胞でのRNA-seqを行う準備は整っている。
|
| 今後の研究の推進方策 |
血球細胞における、EPL遺伝子の発現やタンパク質の局在をより詳細に調べる予定である。またEPLが作用した細胞における網羅的な遺伝子解析に加え、包囲化反応によって活性化される初期遺伝子を調べることで異物の認識から包囲化反応までの一連のプロセスを追っていけることを目指す予定である。
|
| 次年度使用額が生じた理由 |
本年度予定していたプロモーター解析に関する研究に若干の遅延が生じたため、次年度に繰越されて計上されている。この繰越金は、次年度予定しているNGS解析を行うための費用としても利用する予定である。
|
