| 研究課題/領域番号 |
18K06057
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| 研究機関 | 金沢大学 |
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研究代表者 |
寺島 農 金沢大学, がん進展制御研究所, 助教 (80507434)
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| 研究分担者 |
鈴木 健之 金沢大学, がん進展制御研究所, 教授 (30262075)
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| 研究期間 (年度) |
2018-04-01 – 2021-03-31
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| キーワード | 上皮間葉転換 / EMT / 長鎖非コードRNA / lncRNA / ポリコーム抑制複合体 / PRC2 |
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| 研究実績の概要 |
上皮細胞が上皮性を失い、間葉系細胞の性質を獲得する上皮間葉転換（ＥＭＴ）において、タンパク質をコードしない長鎖非コードＲＮＡ（ｌｎｃＲＮＡ）がどのような役割を果たしているのかを明らかにすることを目的に、研究を推進している。
これまでに申請者らは、ＴＧＦ－ｂｅｔａによってＥＭＴが誘導されるＥＭＴモデル細胞において、ＭＥＧ３やＲＩＡＮ（ＭＥＧ８）といったｌｎｃＲＮＡがＥＭＴに関わることを見い出した。これらのｌｎｃＲＮＡは、ＥＭＴに重要なマイクロＲＮＡや、上皮マーカー、ＥＭＴを制御する転写因子などの遺伝子発現調節に関わっていること、さらに、遺伝子発現を抑制する働きがあるポリコーム抑制複合体２（ＰＲＣ２）を、標的遺伝子座へリクルートすることに寄与することにより、ＥＭＴに関わることを明らかにした。
これまでの研究成果を踏まえて、ＥＭＴのエピジェネティック調節を司る新しい機能性分子としてのｌｎｃＲＮＡの役割に焦点を当て、ＰＲＣ２などのエピジェネティック制御因子や、転写因子などと協調して転写を調節するｌｎｃＲＮＡをさらに探索している。現在、ＴＧＦ－ｂｅｔａによってモデル細胞のＥＭＴを誘導した際のｌｎｃＲＮＡの発現変化、およびエピジェネティック変化（今回は、その修飾が広範囲に変化する遺伝子が、細胞の性質と関連性の高いことが知られているヒストンＨ３サブユニット４番目のリジンメチル化修飾の変化）を指標に、ＥＭＴを制御する候補ｌｎｃＲＮＡを絞り込んだ。
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| 現在までの達成度 (区分) |
現在までの達成度 (区分)
2: おおむね順調に進展している
理由
本年度は
１.絞り込んだ候補ｌｎｃＲＮＡが実際にＥＭＴに関わっているかを確かめること
２.候補ｌｎｃＲＮＡがＥＭＴのエピジェネティック調節を司る機能があるかを調べること
を計画していた。１に関しては、絞り込んだ候補ｌｎｃＲＮＡをノックダウンしたり、過剰発現させたりして、ＥＭＴの進行に影響を与えるかどうを調べている。また、２に関しては、候補ｌｎｃＲＮＡが発現制御する標的遺伝子を、ＣｈＩＲＰ法（ｌｎｃＲＮＡが認識して結合するＤＮＡ領域を同定する方法）を用いて、また、協調して転写を調節するエピジェネティック制御因子候補との相互作用を、ＲＮＡ共免疫沈降法（ＲＮＡとタンパク質の結合を検出する方法）を用いて調べている。
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| 今後の研究の推進方策 |
まずは絞り込んだ候補ｌｎｃＲＮＡすべてに関して、現在取り組んでいる
１.実際にＥＭＴに関わっているかどうか
２.エピジェネティック調節を司る機能があるかどうか
を調べ終える。１、２両方を満たす候補ｌｎｃＲＮＡに関しては、計画通り、ＥＭＴのエピジェネティック調節を司る機能性分子としてのｌｎｃＲＮＡの役割を明らかにする。１のみを満たす候補ｌｎｃＲＮＡに関しては、エピジェネティック調節に関わることにこだわず、ＥＭＴにおける役割を明らかにする。２のみを満たす候補ｌｎｃＲＮＡに関しては、その候補ｌｎｃＲＮＡだけでなく、同時に、協調して働くエピジェネティック制御因子もノックダウンや、過剰発現させ、組み合わせによるＥＭＴへの影響から、ＥＭＴとの関わりを探る。
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