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2020 年度 実績報告書

1分子DNAのねじれ応答測定による弾性調節型インスレーター機能の検証

研究課題

研究課題/領域番号 18K06149
研究機関東京農工大学

研究代表者

村山 能宏  東京農工大学, 工学(系)研究科(研究院), 准教授 (60334249)

研究分担者 坂本 尚昭  広島大学, 統合生命科学研究科(理), 准教授 (00332338)
粟津 暁紀  広島大学, 統合生命科学研究科(理), 准教授 (00448234)
研究期間 (年度) 2018-04-01 – 2021-03-31
キーワードDNA / インスレーター / ねじれ / 弾性 / 揺らぎ
研究実績の概要

本研究では、蛋白質の結合なしにインスレーター(Ins)活性を示す配列に着目し、これらの配列がDNAの力学的変形を調節する弾性調節型Insとして機能するのか検証することを目的としている。2020年度は、前年度に引き続きGFP遺伝子と1つのエンハンサーを含む約7 kbpのDNA試料(試料1)と試料1の一部をArsIns (578 bp)に置き換えた試料(試料2)を用いて、1分子DNAのねじれ応答(DNAをねじった回数と末端間距離の関係)の観測を行った。その結果、試料1と試料2のねじれ曲線の概形に明確な違いが生じることが分かった。さらに、ArsInsを含む場合(試料2)、試料2に特徴的な概形に加えて、試料1に特徴的な概形も出現する場合があることが分かった。これらの結果は、1)局所的な配列の違いによりDNAのマクロな構造に違いが生じること、2)ArsIns配列がマクロな構造をスイッチさせる機能を持つ可能性があることを示している。
ArsInsのエンハンサー遮断活性について詳細に解析したところ、ArsInsの周囲の配列の特性によって活性が大きく変化することが示された。これは、ArsInsが周囲の領域を介して作用することを示唆している。また、試料2のうちのArsIns (578 bp)とその上流下流 900 bp を含む領域部分と、試料1の対応する領域部分に対し、基準振動解析によりそれらの運動性を評価・比較した。その結果、試料1に比べ試料2 では伸縮や曲げの揺らぎが顕著に小さくなることが見出され、外部操作に対する頑強性が示唆された。
本研究で得られた知見は,DNAの塩基配列が蛋白質の設計情報や結合情報だけでなく,DNA自身のマクロな構造を調節する機能を持つことを示唆する結果といえる。

  • 研究成果

    (6件)

すべて 2021 2020

すべて 雑誌論文 (4件) (うち国際共著 1件、 査読あり 4件、 オープンアクセス 2件) 学会発表 (2件)

  • [雑誌論文] Structural dynamics of DNA depending on methylation pattern2021

    • 著者名/発表者名
      T. Kameda, M. M. Suzuki, A. Awazu, Y. Togashi
    • 雑誌名

      PHYSICAL REVIEW E

      巻: 103 ページ: 012404 (1-8)

    • DOI

      10.1103/PhysRevE.103.012404

    • 査読あり / オープンアクセス
  • [雑誌論文] CRISPR-Cas9 editing of non-coding genomic loci as a means of controlling gene expression in the sea urchin2021

    • 著者名/発表者名
      Pieplow, A., Dastaw, M., Sakuma, T., Sakamoto, N., Yamamoto, T., Yajima, M., Oulhen, N., Wessel, G.M.
    • 雑誌名

      Developmental Biology

      巻: 472 ページ: 85-97

    • DOI

      10.1016/j.ydbio.2021.01.003

    • 査読あり / 国際共著
  • [雑誌論文] Spontaneous Organizations of Diverse Network Structures in Coupled Logistic Maps with a Delayed Connection Change2020

    • 著者名/発表者名
      Ohara, A., Fujii, M., Awazu, A.
    • 雑誌名

      Journal of the Physical Society of Japan

      巻: 89 ページ: 114801 (1-11)

    • DOI

      10.7566/JPSJ.89.114801

    • 査読あり / オープンアクセス
  • [雑誌論文] Recycling endosomes associate with Golgi stacks in sea urchin embryos2020

    • 著者名/発表者名
      Fujii, S., Tago, T., Sakamoto, N., Yamamoto, T., Satoh, T., Satoh, A.K.
    • 雑誌名

      Communicative & Integrative Biology

      巻: 13(1) ページ: 59-62

    • DOI

      10.1080/19420889.2020.1761069

    • 査読あり
  • [学会発表] DNAねじれ応答の局所配列依存性2020

    • 著者名/発表者名
      柏崎今日子,村山能宏
    • 学会等名
      第19回関東ソフトマター研究会
  • [学会発表] 絡まり合ったDNA溶液における微粒子の緩和の変形サイズ依存性2020

    • 著者名/発表者名
      宮本明典,村山能宏
    • 学会等名
      日本物理学会2020年秋季大会

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公開日: 2021-12-27  

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