マウス胎生中期の大動脈血液細胞塊に生じる造血幹細胞の発生・成熟・維持機構の解明

2020 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 18K06249
• 研究機関: 東京医科歯科大学
• 研究代表者: 信久 幾夫 東京医科歯科大学, 難治疾患研究所, 准教授 (40332879)
• 研究期間 (年度): 2018-04-01 – 2021-03-31
• キーワード: 造血幹細胞 / 血液細胞塊 / Sox17 / 胎仔

研究実績の概要

胎生中期マウスの大動脈に生じる造血幹細胞を含む血液細胞塊に発現する転写因子Sox17に注目して、血液細胞塊における造 血幹細胞の発生・成熟・維持に関わる分子機構を明らかとするために、本年度は以下の実験を行った
1)胎生10.5日目のマウス胎仔より血液細胞塊構成細胞(CD45lowc-Kithigh細胞)にSox17を導入することで発現が亢進していた接着分子ESAMの関与について検討を行った。ESAMはマウス胎生中期の大動脈の血管内皮細胞、血液細胞塊において発現を認めた。血液細胞塊構成細胞にSox17を強制発現した細胞集団においてESAMの発現は亢進しており、Sox17強制発現細胞かつESAM陽性細胞はin vitroにおいて高い造血能を示した。さらに、Sox17が直接ESAMの遺伝子プロモーター領域に結合し転写を活性化することを明らかにした。また、Sox17強制発現細胞においてESAMの発現量を減少させると細胞塊の形成能が低下した。
2)DNAの脱メチル化に関与するTET1の発現と未分化性維持の関連を調べるために、Sox17強制発現CD45lowc-Kithigh細胞にTET1shRNAと対照shRNAを導入した後培養し、shRNA導入細胞について半固形培地でMixコロニーを形成させ、TET1ノックダウン時の造血能に対する影響を検討した。その結果、対照と比べ、TET1をノックダウンした細胞は顆粒球・マクロファージ・赤血球の多系列血液細胞を含むコロニー形成能(多分化能)が低くなることを示した。TET1のプロモーター領域には複数のSox17結合配列が存在し、Luciferase assayより、Sox17によって活性化されTET1の発現が誘導された。

研究成果

• [雑誌論文] Glioma stem cell (GSC)-derived autoschizis-like products confer GSC niche properties involving M1-like tumor-associated macrophages (2020)
  • 著者名/発表者名: Tabu Kouichi, Liu Wenyu, Kosaku Akina, Terashima Kazuo, Murota Yoshitaka, Aimaitijiang Alapati, Nobuhisa Ikuo, Hide Takuichiro, Taga Tetsuya
  • 雑誌名: Stem Cells 巻: 38 ページ: 921~935
  • DOI: 10.1002/stem.3193
  • 査読あり
• [雑誌論文] Sox17-mediated expression of adherent molecules is required for the maintenance of undifferentiated hematopoietic cluster formation in midgestation mouse embryos (2020)
  • 著者名/発表者名: Takahashi Satomi, Nobuhisa Ikuo, Saito Kiyoka, Melig Gerel, Itabashi Ayumi, Harada Kaho, Osawa Mitsujiro, Endo Takahiro A, Iwama Atsushi, Taga Tetsuya
  • 雑誌名: Differentiation 巻: 115 ページ: 53~61
  • DOI: 10.1016/j.diff.2020.08.001
  • 査読あり
• [雑誌論文] Sry-related high mobility group box 17 functions as a tumor suppressor by antagonizing the Wingless-related integration site pathway (2020)
  • 著者名/発表者名: Anani Maha, Nobuhisa Ikuo, and Taga Tetsuya
  • 雑誌名: Journal of Cancer Prevention 巻: 25 ページ: 204~212
  • DOI: 10.15430/JCP.2020.25.4.204
  • 査読あり
• [学会発表] 胎生中期マウス内動脈内腔における転写因子Sox17を介したGIMAP6発現の造血能に対する寄与 (2020)
  • 著者名/発表者名: 信久幾夫, 塚原涼太,齋藤清香, 金井克晃, 金井正美, 田賀哲也
  • 学会等名: 第41回日本炎症・再生医学会
• [学会発表] Role of the Rasip1 in the hematopoiesis of HSC-containing hematopoietic cluster cells in midgestation of mouse embryos (2020)
  • 著者名/発表者名: Melig G, Nobuhisa I, Kiyoka S, Tsukahara R, Itabashi A, Kanai Y, Kanai M, Taga T
  • 学会等名: 第41回日本炎症・再生医学会
• [学会発表] マウス胎仔肝臓・成体骨髄の造血幹細胞を含む細胞集団への転写因子Sox17強制発現による細胞塊形成と未分化性維持 (2020)
  • 著者名/発表者名: 板橋歩未、信久幾夫、横居優貴、齋藤清香、塚原涼太、Melig Gerel、田賀哲也
  • 学会等名: 第41回日本炎症・再生医学会
• [学会発表] Contribution of Rasip1 to the maintenance of hematopoietic activity of cluster-forming cells in midgestation mouse embryos (2020)
  • 著者名/発表者名: Melig G, Nobuhisa I, Kiyoka S, Tsukahara R, Itabashi A, Kanai Y, Kanai M, Taga T
  • 学会等名: 第43回分子生物学会年会
• [学会発表] 転写因子Sox17を導入した造血幹・前駆細胞の細胞塊形成能は発生の進行に伴い低下する (2020)
  • 著者名/発表者名: 板橋歩未、信久幾夫、横居優貴、齋藤清香、塚原涼太、Melig Gerel、田賀哲也
  • 学会等名: 第43回分子生物学会年会
• [備考] 東京医科歯科大学 難治疾患研究所 幹細胞制御分野
  • URL: https://www.tmd.ac.jp/mri/scr/index.html