| 研究課題/領域番号 |
18K06357
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| 研究機関 | 東北大学 |
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研究代表者 |
矢野 大和 東北大学, 生命科学研究科, 講師 (20646773)
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| 研究期間 (年度) |
2018-04-01 – 2021-03-31
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| キーワード | 抗酸菌 / ゲノム |
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| 研究実績の概要 |
Mycobacterium avium株間のDNA伝達を検出する実験系を構築するため、形質転換しややすい株のスクリーニングを臨床分離株を対象として行った。３株には、蛍光タンパク質遺伝子を保有するプラスミドを導入することができた。
本研究の目的の一つは可動遺伝因子に依存しないDNA伝達の仕組みを解明することであるが、これまでにゲノムが解読されたMycobacterium aviumアジア系統株はプラスミドを保有していた。プラスミドを保有していないMycobacterium aviumアジア系統株を探すため、２株についてロングリードを用いたゲノムシーケンシングを行った。
本計画に含まれている環境分離株の収集作業を効率化するため、ジェノタイピングに利用できる系統マーカーとなるSNPを保有している遺伝子座を情報学的にスクリーニングした。これには１２５株分の公開されているゲノム情報を利用した。
健常者の浴室のシャワー水、バイオフィルムを対象として、Mycobacterium avium株の分離培養実験を行い３７株のMycobacterium avium分離株を取得した。
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| 現在までの達成度 (区分) |
現在までの達成度 (区分)
3: やや遅れている
理由
M.aviumの形質転換能力が低いためか染色体にトランスポゾンを用いてDNAを挿入することができなかった。
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| 今後の研究の推進方策 |
次年度は他のマイコバクテリウム種で形質導入に利用されているファージを用いるなどし、DNAの導入系を改善したい。また、他のマイコバクテリウム種の遺伝学実験で実績のある専門家に協力していただく。
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| 次年度使用額が生じた理由 |
次年度使用額が生じた理由は主にM.avium株の分子遺伝学実験が予想以上に困難であり、DNA伝達の実験を行うことができなかったためである。次年度使用額は、形質導入実験系の検討、及びプラスミドを持たない株の実験または情報解析を用いたスクリーニングに充てる。
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