• 研究課題をさがす
  • 研究者をさがす
  • KAKENの使い方
  1. 課題ページに戻る

2018 年度 実施状況報告書

精神神経疾患における新規mTOR相互作用因子の機能解析

研究課題

研究課題/領域番号 18K06478
研究機関東京大学

研究代表者

葛西 秀俊  東京大学, 大学院医学系研究科(医学部), 准教授 (40403232)

研究期間 (年度) 2018-04-01 – 2021-03-31
キーワードmTOR / Flightless-I / 遺伝子操作マウス
研究実績の概要

申請時の計画通り本年度は、CRISPR/Casシステムによって作製したFlightless-I (Flii)のコンディショナルノックアウト(Flii-flox)マウスを用いて、終脳特異的Fliiノックアウトマウスを作製した。具体的には、このマウスをEmx1-creノックインマウスと交配することによって、Flii(flox/-); Emx1(cre/+)マウスおよびコントロールとしてFlii(flox/+); Emx1(cre/+)マウスを得た。これらのマウスの大脳皮質および小脳よりタンパク質を抽出し、ウエスタンブロット解析によってFliiタンパク質の発現を検証した。その結果、終脳特異的Fliiノックアウトマウスはコントロールマウスと比較して、Fliiの発現が大脳皮質において著しく減少していた一方、小脳においては発現に大きな違いは見られなかった。このことから大脳皮質においてFlii遺伝子がノックアウトされていることが示唆された。
次に、終脳特異的Fliiノックアウトマウスの脳形態を調べたところ、大脳皮質がコントロールマウスと比較して顕著に萎縮していることが明らかとなった。この萎縮は胎生14日齢の終脳特異的Fliiノックアウトマウスでも観察されたことから、Fliiは大脳皮質の発生に深く関与していることが考えられた。さらに、大脳皮質において活性化型mTORを発現したトランスジェニックマウスにおいても同様の表現型が観察されたことから(Kassai et al., Cell Rep., 2014)、FliiとmTORの大脳皮質発生におけるシグナルの関連性が示唆された。

現在までの達成度 (区分)
現在までの達成度 (区分)

2: おおむね順調に進展している

理由

本年度は申請時の予定通り、Flii遺伝子のノックアウトマウスの作製を行うことができ、さらに、表現型の解析にも着手し、大脳皮質は萎縮などを明らかにすることができた。従って、現段階では順調に進展していると判断した。

今後の研究の推進方策

終脳特異的Fliiノックアウトマウスにおいて大脳皮質の萎縮が観察されたことから、今後は、大脳皮質発生のどの段階でどのような異常が起こっているのかを詳細に解析する。さらにその異常とFliiと関連性を調べることによって、大脳皮質発生におけるFliiの役割を明らかにしたい。また、上記の表現型は活性化型mTORを大脳皮質で発現したマウスと類似しているので、mTORシグナル経路との関連を同時に解析し、研究を発展させることができると考えられる。
さらに、小脳におけるFliiの役割についても、プルキンエ細胞特異的Cre発現マウスを用いて解析していく予定である。

次年度使用額が生じた理由

本年度は学会などによる成果発表を行わなかったため、旅費として補助金を使用しなかったため。来年度は本年度得られた成果を基に研究を発展させ、成果発表を行う予定である。

  • 研究成果

    (3件)

すべて 2019 2018 その他

すべて 雑誌論文 (2件) (うち国際共著 1件、 査読あり 2件、 オープンアクセス 2件) 備考 (1件)

  • [雑誌論文] Hyperactivation of mTORC1 disrupts cellular homeostasis in cerebellar Purkinje cells2019

    • 著者名/発表者名
      Yusuke Sakai, Hidetoshi Kassai, Hisako Nakayama, Masahiro Fukaya, Tatsuya Maeda, Kazuki Nakao, Kouichi Hashimoto, Hiroyuki Sakagami, Masanobu Kano, Atsu Aiba
    • 雑誌名

      Scientific Reports

      巻: 9 ページ: 2799

    • DOI

      10.1038/s41598-019-38730-4

    • 査読あり / オープンアクセス
  • [雑誌論文] New Features on the Expression and Trafficking of mGluR1 Splice Variants Exposed by Two Novel Mutant Mouse Lines.2018

    • 著者名/発表者名
      Rika Naito, Hidetoshi Kassai, Yusuke Sakai, Sabine Schönherr, Masahiro Fukaya, Christoph Schwarzer, Hiroyuki Sakagami, Kazuki Nakao, Atsu Aiba, Francesco Ferraguti
    • 雑誌名

      Frontiers in Molecular Neuroscience

      巻: 11 ページ: 439

    • DOI

      10.3389/fnmol.2018.00439. eCollection 2018

    • 査読あり / オープンアクセス / 国際共著
  • [備考] 東京大学大学院医学系研究科・疾患生命工学センター・動物資源学部門

    • URL

      http://lar.cdbim.m.u-tokyo.ac.jp/index.html

URL: 

公開日: 2019-12-27  

サービス概要 検索マニュアル よくある質問 お知らせ 利用規程 科研費による研究の帰属

Powered by NII kakenhi