研究課題/領域番号 |
18K06735
|
研究機関 | 東京薬科大学 |
研究代表者 |
横須賀 章人 東京薬科大学, 薬学部, 講師 (20318190)
|
研究期間 (年度) |
2018-04-01 – 2021-03-31
|
キーワード | ステロイド / がん分子標的 / 微小管 / 細胞周期 / 細胞毒性 / アポトーシス |
研究実績の概要 |
植物由来のステロイド化合物に着目し、細胞分裂期のがん細胞にのみ作用する「がん分子標的治療薬シーズ」を見出すことを目的に研究を進めている。2018年度は、3種のキンポウゲ科植物(Helleborus foetidus、Helleborus lividus、Helleborus niger)および1種のイネ科植物(Avena sativa)を研究材料として用いた。これらの植物をメタノールで抽出し、抽出エキスを調整した。抽出エキスを多孔質ポリスチレン樹脂で粗分画し、5つの溶出画分(30%メタノール、50%メタノール、メタノール、エタノール、酢酸エチル)を得た。その後、HL-60ヒト白血病細胞およびA549ヒト肺がん細胞に対する細胞毒性を指標に活性成分の分離を行った。その結果、H. foetidusから9種の新規ステロイド配糖体を、H. lividusから7種の新規化合物を含む10種のブファジェノリド誘導体を、H. nigerから2種の新規ブファジェノリド誘導体を、A. sativaから6種の新規化合物を含む12種のステロイド配糖体を単離した。単離化合物の構造は、NMRを中心とした各種機器スペクトルの解析と加水分解により決定した。単離された化合物のHL-60およびA549細胞に対する細胞毒性を評価した結果、数種の化合物に活性が認められた。さらに、活性の認められた化合物のHL-60細胞に対するアポトーシス誘導活性を評価するとともに細胞周期を解析した。
|
現在までの達成度 (区分) |
現在までの達成度 (区分)
2: おおむね順調に進展している
理由
2018年度は、3種のキンポウゲ科植物(Helleborus foetidus、Helleborus lividus、Helleborus niger)および1種のイネ科植物(Avena sativa)から、合計33種の植物由来ステロイド化合物を単離・構造決定した。単離された化合物のうち、HL-60細胞に対して細胞毒性を示した化合物の細胞周期を解析した。現在まで、顕著に細胞周期を細胞分裂期で停止させる化合物は見出せていないことから、今後、化合物の濃度や細胞との接触時間等の条件を検討していく。また、新たに、ステロイド系化合物が含まれることが推定される植物の抽出エキスおよび粗分画後の溶出画分の細胞周期解析を行い、細胞分裂期で細胞周期を停止させる化合物の迅速な同定を試みる。
|
今後の研究の推進方策 |
2018年度は、HL-60ヒト白血病およびA549ヒト肺がん細胞に対する細胞毒性を指標に、3種のキンポウゲ科植物および1種のイネ科植物から、合計33種の植物由来ステロイド化合物を単離・構造決定した。さらに単離された化合物の細胞毒性とアポトーシス誘導活性を評価し、細胞周期を解析した。2019年度は、以下の項目について研究を進めていく。 1)新たに、ステロイド系化合物が含まれることが推定される植物の抽出エキスおよび粗分画後の溶出画分を調製し、それらの細胞周期解析を行い、細胞分裂期で細胞周期を停止させるステロイド化合物の探索を行う。 2)過去に単離・構造決定している植物由来ステロイド化合物のうち、細胞周期を細胞分裂期で停止させた化合物を用いて、細胞分裂期における紡錘体形成を蛍光イメージングにより判定する。
|