| 研究課題/領域番号 |
18K06915
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| 研究機関 | 香川大学 |
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研究代表者 |
宇山 徹 香川大学, 医学部, 助教 (30457337)
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| 研究期間 (年度) |
2018-04-01 – 2021-03-31
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| キーワード | cPLA2ε / N-アシル-ホスファチジルエタノールアミン / ホスファチジルセリン / 脂質代謝酵素 / N-アシルエタノールアミン |
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| 研究実績の概要 |
N-アシル-ホスファチジルエタノールアミン (N-アシル-PE) は生体膜リン脂質を構成する微量リン脂質として存在しており、脂質メディエーターとして知られるN-アシルエタノールアミンの前駆体として機能する。N-アシル-PEはグリセロリン脂質のアシル基をPEのアミノ基に転移するN-アシル転移酵素によって合成され、最近、細胞質型ホスホリパーゼA2ε (cPLA2ε) がCa2+依存的に同活性を示す酵素として同定された。我々の研究室ではcPLA2εの酵素活性が酸性リン脂質であるホスファチジルセリン (PS) によって上昇することをin vitroで報告していたが、細胞内においても同様に制御されるかは不明であった。これより本研究では、PSを含む種々の酸性リン脂質のcPLA2εに対する効果について細胞レベルで検討した。樹立したcPLA2ε発現細胞においてPSを合成する酵素の発現をsiRNAによってノックダウンすると、抑制の程度に応じてcPLA2εの細胞内含量がタンパク質レベルで有意に減少した。また、共焦点レーザー顕微鏡の解析より、コントロールsiRNAで処理した細胞ではcPLA2εが形質膜や細胞内小胞に局在していたが、PS合成を抑制した細胞ではcPLA2εの細胞内小胞での局在は減少し、主に形質膜に局在していた。精製した組換えcPLA2εに対する種々の酸性リン脂質の効果を検討したところ、ホスファチジルイノシトール4,5-ビスリン酸やホスファチジン酸などはPSと同様にcPLA2εの酵素活性を上昇させた。以上の結果から、cPLA2εは細胞内においてもPSによって制御されており、PS以外の酸性リン脂質も同分子の制御に関与する可能性が示された。
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| 現在までの達成度 (区分) |
現在までの達成度 (区分)
2: おおむね順調に進展している
理由
申請書に記載した内容の多くは達成でき、おおむね期待していた結果が得られた。しかしながら、一部の研究に関しては、予定していたほどは進まなかった。
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| 今後の研究の推進方策 |
最近見出した知見を報告できるよう研究を進める。また、予定している研究で着手できていない部分があるので、これについても同様に進める。
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| 次年度使用額が生じた理由 |
次年度に使用する予定である。
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