免疫系特異的オートファジー制御因子Rufy4による炎症応答制御

2020 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 18K06937
• 研究機関: 大阪市立大学
• 研究代表者: 寺脇 正剛 大阪市立大学, 大学院医学研究科, 助教 (60437217)
• 研究期間 (年度): 2018-04-01 – 2021-03-31
• キーワード: 炎症応答 / オートファジー / NETosis

研究実績の概要

IL-4によって樹状細胞に発現が誘導される免疫系特異的オートファジー制御因子Rufy4は好中球において恒常的に発現しているが、好中球における機能は明らかになっていない。本研究では好中球においてオートファジーの分子機構の関与が指摘されている細胞死NETosisに注目し、その分子機構と好中球におけるRufy4の生理学的機能の解明を目的として、研究をおこなった。野生型およびRufy4欠損マウスにカゼインを腹腔内投与し、腹腔洗浄液からPercollを用いた密度勾配遠心にて好中球を単離した。この初代培養好中球をPMAでNETosisを誘導し、NETsの形成を蛍光顕微鏡で観察した。またNETosisを誘導した好中球をS7ヌクレアーゼ処理し、上清に遊離したエラスターゼの活性を測定することで、放出されたNETsの定量をおこなった。PMAにより刺激された野生型好中球ではクロマチンDNAを大きく放出する典型的なNETosisが認められたのに対し、Rufy4欠損マウス由来の好中球では細胞死は誘導されるものの、形成されるNETsは顕著に縮小していた。一方、A23187で誘導したNETosisでは明確な差は認められなかった。これと一致して、S7ヌクレアーゼ処理依存的に検出されたエラスターゼ活性は、Rufy4欠損マウス由来の好中球において低かった。以上の結果よりRufy4はNETosisの開始には寄与していないが、欠損下ではNETosisの進行やNETsの形成に異常が生じており、Rufy4がNETosisの進行に重要な機能を持っていることを示唆している。

研究成果

• [雑誌論文] Th2 cells and macrophages cooperatively induce allergic inflammation through histamine signaling (2021)
  • 著者名/発表者名: Iwasaki Naruhito、Terawaki Seigo、Shimizu Kouhei、Oikawa Daisuke、Sakamoto Hirokazu、Sunami Kishiko、Tokunaga Fuminori
  • 雑誌名: PLOS ONE 巻: 16 ページ: -
  • DOI: 10.1371/journal.pone.0248158
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] Crosstalk Between NDP52 and LUBAC in Innate Immune Responses, Cell Death, and Xenophagy (2021)
  • 著者名/発表者名: Miyashita Hirohisa、Oikawa Daisuke、Terawaki Seigo、Kabata Daijiro、Shintani Ayumi、Tokunaga Fuminori
  • 雑誌名: Frontiers in Immunology 巻: 12 ページ: -
  • DOI: 10.3389/fimmu.2021.635475
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] Th2 cell-derived histamine is involved in nasal Th2 infiltration in mice (2021)
  • 著者名/発表者名: Iwasaki Naruhito、Terawaki Seigo、Shimizu Kouhei、Oikawa Daisuke、Sakamoto Hirokazu、Sunami Kishiko、Tokunaga Fuminori
  • 雑誌名: Inflammation Research 巻: - ページ: -
  • DOI: 10.1007/s00011-021-01458-x
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] Molecular bases for HOIPINs-mediated inhibition of LUBAC and innate immune responses (2020)
  • 著者名/発表者名: Oikawa Daisuke、Sato Yusuke、Ohtake Fumiaki、Komakura Keidai、Hanada Kazuki、Sugawara Koji、Terawaki Seigo、Mizukami Yukari、Phuong Hoang T.、Iio Kiyosei、Obika Shingo、Fukushi Masaya、Irie Takashi、Tsuruta Daisuke、Sakamoto Shinji、Tanaka Keiji、Saeki Yasushi、Fukai Shuya、Tokunaga Fuminori
  • 雑誌名: Communications Biology 巻: 3 ページ: -
  • DOI: 10.1038/s42003-020-0882-8
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] LC3 lipidation is essential for TFEB activation during the lysosomal damage response to kidney injury (2020)
  • 著者名/発表者名: Nakamura Shuhei, Shigeyama Saki, Minami Satoshi, Shima Takayuki, Akayama Shiori, Matsuda Tomoki, Esposito Alessandra, Napolitano Gennaro、Kuma Akiko, Namba-Hamano Tomoko, Nakamura Jun, Yamamoto Kenichi, Sasai Miwa, Tokumura Ayaka, Miyamoto Mika, Oe Yukako, Fujita Toshiharu, Terawaki Seigo, Yoshimori Tamotsu
  • 雑誌名: Nature Cell Biology 巻: 22 ページ: 1252～1263
  • DOI: 10.1038/s41556-020-00583-9
  • 査読あり / 国際共著
• [学会発表] NDP52のユビキチン結合性を介した炎症応答・細胞死制御とLUBAC阻害剤の影響 (2020)
  • 著者名/発表者名: 宮下 裕久, 及川 大輔, 寺脇 正剛, 徳永 文稔
  • 学会等名: 第93回 日本生化学会大会
• [学会発表] Macrophages produce histamine through the interaction with antigen specific Th2 cells (2020)
  • 著者名/発表者名: Naruhito Iwasaki, Seigo Terawaki, Hirokazu Sakamoto, Kishiko Sunami, Fuminori Tokunaga
  • 学会等名: 第69回 日本アレルギー学会学術大会