| 研究課題/領域番号 |
18K06971
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| 研究機関 | 東海大学 |
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研究代表者 |
石井 恭正 東海大学, 医学部, 講師 (20548680)
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| 研究期間 (年度) |
2018-04-01 – 2021-03-31
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| キーワード | 転写因子 / 複製ストレス / DNA損傷修復 / 代謝 / クロマチン再構築 |
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| 研究実績の概要 |
我々は老化メカニズムの解明を長期目標とし、老化関連遺伝子の探索・解析を行っている。独自に開発したジーントラップ法により確立した短寿命モデルマウスから、明確な病態を示さず肥満を呈して短寿命の原因となる遺伝子を特定した。当該原因遺伝子は、BTB/POZドメインを有するzinc finger転写抑制因子：ZBTB20（Zinc finger and BTB domain-containing protein 20），HOFをコードし、マウスでは16番染色体16qC1.1-3領域、ヒトでは3番染色体3q13.31領域上に位置する。本研究課題では、当該タンパク質機能の肥満および寿命への影響を明らかにすることを目的とした。初年度となる当該年度には、各種細胞株の樹立に尽力した。先ず、我々独自の短寿命モデルマウスにより、肥満を呈して短寿命となる原因の候補となったZBTB20転写抑制因子の機能を細胞レベルで詳細に解析するため、siRNA手法をもちいたsiZBTB20ノックダウン細胞株、およびレトロウィルスベクターをもちいたZBTB20過剰発現細胞株を樹立した。さらに、ヒトでは、転写抑制因子ZBTB20の機能損失は、3番染色体欠失症候群や常染色体劣性遺伝子疾患であるプリムローズ症候群を発症し、早老症に酷似した病態を呈する。そこで、当該疾患原因遺伝子を発現するレトロウィルスベクターを構築し、当該疾患モデルZBTB20H596R細胞株を樹立した。現在、これらの細胞株をもちいて細胞増殖能・分化能、およびエネルギー代謝能の変化について解析を進めている。
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| 現在までの達成度 (区分) |
現在までの達成度 (区分)
2: おおむね順調に進展している
理由
順調に細胞株の樹立に成功し、明確な病態を示さず肥満を呈して短寿命となったジーントラップモデルマウスの原因遺伝子がコードする生体分子の機能解析に着手できたため。
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| 今後の研究の推進方策 |
樹立に成功した、プリムローズ症候群を模した機能欠失型細胞株、当該生体分子の発現抑制を誘導したノックダウン細胞株、および過剰発現細胞株をもちいて、明確な病態を示さず肥満を呈して短寿命となるジーントラップモデルマウスの原因遺伝子がコードする転写抑制因子の機能解析を当初の計画通り実施する。
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| 次年度使用額が生じた理由 |
購入予定だった試薬および抗体が、海外受注品で年度内の納品が困難だったため。再度、在庫確認をおこない、速やかに発注し、次年度中に予算執行する。
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