腸型・胃型胃癌オルガノイドを用いた新規癌幹細胞標的治療の探索

2019 年度 実施状況報告書

• 研究課題/領域番号: 18K07017
• 研究機関: 広島大学
• 研究代表者: 坂本 直也 広島大学, 医系科学研究科(医), 助教 (20571798)
• 研究期間 (年度): 2018-04-01 – 2021-03-31
• キーワード: オルガノイド

研究実績の概要

胃がんは免疫組織学的な粘液発現のパターンにより、MUC2もしくはCD10陽性の腸型胃がん、MUC5ACもしくはMUC6陽性の胃型胃がんに大別される。腸型・胃型胃
がんでは、背景に存在する遺伝子・分子異常を含めたpathogenesisが大きく異なることが知られている。
本研究では、外科的切除材料から、胃がん組織及び非腫瘍部胃粘膜を採取し、いずれのサンプルも二分して、胃もしくは小腸/結腸オルガノイド培養のmediumを用い、腸型・胃型胃がんオルガノイドもしくは正常胃粘膜/腸上皮化生オルガノイドを樹立した。各々のオルガノイドに関して、MUC2/CD10/MUC5AC/MUC6の免疫染色やPAS/Alcian Blueの特殊染色を行い、その特性を確認した。現在までに50例の胃癌オルガノイドの樹立に成功しており、内訳としては胃型:17例、腸型:15例、胃腸混合型:18例、分類不能型:3例であった。
樹立した胃癌オルガノイドを用いて、p53、MLH1、β-cateninの免疫染色や、MSI解析、TP53、KRAS、RHOA、TGFBR2、ARID1、ACVR2Aの遺伝子変異解析を行い、全ての情報を含めたライブラリー構築を進めている。
加えて、胃がんの化学療法に用いられる代表的な薬剤 (5-FU、オキサリプラチン)に対する薬剤感受性の検討も進めており、現在37例において5-FU、オキサリプラチンのIC50値の測定を終えた。
現在オルガノイドサンプルを用いたRNA sequencing解析による遺伝子発現プロファイルの解析中である。

現在までの達成度 (区分)

2: おおむね順調に進展している

理由

オルガノイドの樹立、薬剤感受性の解析まで順調に終了している

今後の研究の推進方策

現在胃型胃がん5例、腸型胃がん5例に関して、RNA sequencingの解析を依頼しており、結果を待っている状態である。薬剤感受性、表現型の結果も含めて、発現プロファイルの解析を行い、薬剤耐性マーカーの絞り込みを行う。

研究成果

• [雑誌論文] Annexin A10 Is Involved in the Induction of Pancreatic Duodenal homeobox in Gastric Cancer Tissue, Cells and Organoids (2020)
  • 著者名/発表者名: Ishikawa A, Sakamoto N, Honma R, Taniyama D, Fukada K, Hattori T, Sentani K, Oue N, Yanagihara K, Tanabe K, Ohdan H, Yasui W.
  • 雑誌名: Oncol Rep 巻: 43 ページ: 581-590
  • DOI: 10.3892/or.2019.7422
  • 査読あり
• [雑誌論文] Molecular Carcinogenesis of Gastric Cancer: Lauren Classification, Mucin Phenotype Expression, and Cancer Stem Cells (2019)
  • 著者名/発表者名: Oue N, Sentani K, Sakamoto N, Uraoka N, Yasui W.
  • 雑誌名: Int J Clin Oncol. 巻: 24 ページ: 771-778
  • DOI: 10.1007/s10147-019-01443-9.
  • 査読あり
• [雑誌論文] Cancer Extracellular Vesicles Contribute to Stromal Heterogeneity by Inducing Chemokines in Cancer-Associated Fibroblasts (2019)
  • 著者名/発表者名: Naito Y, Yamamoto Y, Sakamoto N, Shimomura I, Kogure A, Kumazaki M, Yokoi A, Yashiro M, Kiyono T, Yanagihara K, Takahashi RU, Hirakawa K, Yasui W, Ochiya T.
  • 雑誌名: Oncogene 巻: 38 ページ: 5566-5579
  • DOI: 10.1038/s41388-019-0832-4
  • 査読あり
• [雑誌論文] SEC11A Expression Is Associated With Basal-Like Bladder Cancer and Predicts Patient Survival (2019)
  • 著者名/発表者名: Shigematsu Y, Oue N, Sekino Y, Sakamoto N, Sentani K, Uraoka N, Hayashi T, Teishima J, Matsubara A, Yasui W.
  • 雑誌名: Pathobiology 巻: 86 ページ: 208-216
  • DOI: 10.1159/000497206
  • 査読あり
• [雑誌論文] CD204-Positive Tumor-associated Macrophages Relate to Malignant Transformation of Colorectal Adenoma (2019)
  • 著者名/発表者名: Taniyama D, Taniyama K, Kuraoka K, Yamamoto H, Zaitsu J, Saito A, Sakamoto N, Sentani K, Oue N, Yasui W.
  • 雑誌名: Anticancer Res. 巻: 39 ページ: 2767-2775
  • DOI: 10.21873/anticanres.13403.
  • 査読あり
• [雑誌論文] miR-130b Promotes Sunitinib Resistance Through Regulation of PTEN in Renal Cell Carcinoma (2019)
  • 著者名/発表者名: Sekino Y, Sakamoto N, Sentani K, Oue N, Teishima J, Matsubara A, Yasui W.
  • 雑誌名: Oncology 巻: 97 ページ: 164-172
  • DOI: 10.1159/000500605
  • 査読あり
• [雑誌論文] Synbiotics Suppress Colitis-Induced Tumorigenesis in a Colon-Specific Cancer Mouse Model (2019)
  • 著者名/発表者名: Saito Y, Hinoi T, Adachi T, Miguchi M, Niitsu H, Kochi M, Sada H, Sotomaru Y, Sakamoto N, Sentani K, Oue N, Yasui W, Tashiro H, Ohdan H.
  • 雑誌名: PLoS One 巻: 14 ページ: e0216393
  • DOI: 10.1371/journal.pone.0216393
  • 査読あり
• [雑誌論文] IMP dehydrogenase-2 Drives Aberrant Nucleolar Activity and Promotes Tumorigenesis in Glioblastoma (2019)
  • 著者名/発表者名: Kofuji S, Hirayama A, Eberhardt AO, Kawaguchi R, Sakamoto N, Kitahara S, Wolfe K, Lange L, Onishi N, Uematsu M, Saya H, Soga T, Grummt I, Bierhoff H, Sasaki AT.
  • 雑誌名: Nat Cell Biol 巻: 21 ページ: 1003-1014
  • DOI: 10.1038/s41556-019-0363-9
  • 査読あり / 国際共著
• [学会発表] オルガノイドを用いた癌幹細胞特異的な遺伝子・分子異常の解析. (2019)
  • 著者名/発表者名: 坂本直也、本間りりの、鵜飼翔一、仙谷和弘、大上直秀、安井 弥
  • 学会等名: 第108回日本病理学会総会、シンポジウム 5「オルガノイドとPDX」
  • 招待講演