2019 年度実施状況報告書

肝癌細胞特異的薬物搬送とClass選択的HDAC阻害薬による新規肝癌治療開発

研究課題

研究課題/領域番号	18K07914
研究機関	札幌医科大学
研究代表者	宮西浩嗣札幌医科大学, 医学部, 准教授 (60372819)
研究分担者	加藤淳二札幌医科大学, 医学部, 教授 (20244345) 田中信悟札幌医科大学, 医学部, 助教 (60561024) 菊地尚平札幌医科大学, 医学部, 助教 (80515792)
研究期間 (年度)	2018-04-01 – 2021-03-31
キーワード	肝細胞癌 / 化学療法
研究実績の概要	各種ヒト肝癌細胞株（HUH-7, JHH-7, JHH-5, HepG2, HuH-1, Li-7, JHH-4, JHH-6, SK-Hep-1）におけるAFP産生をELISAおよびwestern blotにより検索し、HuH-7, JHH-7におけるAFPの高発現を確認後、HuH-7における治療効果を検討している。ヒストン脱アセチル化酵素 (HDAC) pan inhibitorであるLBH589によるIC50は0.32 μM、HDAC class IIa選択的inhibitorであるTMP269によるIC50は107.7μMであった。殺細胞性抗癌薬および分子標的薬単独の治療効果は、5-FUによるIC50が24.65μM、CDDPによるIC50が2.25 μM、Lenvatinibが1.60μMであった。TMP269と各種殺細胞性抗癌薬および分子標的薬併用治療の効果を検討したところ、TMP269とLenvatinib併用において治療相乗効果が認められる傾向にあり、今後フコース結合リポソームに内包し、さらなる治療効果の検討を行う。フコース結合リポソームは現在既報に基づき作製中である。抗癌薬（5-FU、CDDP、Lenvatinib）を0-1000 μMの濃度で内包し作製する
現在までの達成度 (区分)	現在までの達成度 (区分) 3: やや遅れている理由これまでにフコース結合リポソームは現在既報に基づき作製したものの、細胞内取り込みが不十分であり、再度抗癌薬（5－FU、CDDP、Lenvatinib）を0-1000 μMの濃度で内包し作製を依頼しているが、完成が遅れている。
今後の研究の推進方策	抗癌薬（5-FU、CDDP、Lenvatinib）を0-1000 μMの濃度で内包したフコース結合リポソームを作製した後、HUH-7,とJHH-7における抗腫瘍効果をWST－1 assayにより検討する。またHDAC class IIa選択的阻害薬の単独抗腫瘍効果についても各種細胞株において検討する。その後、両者併用の抗腫瘍効果解析に用いる細胞株と内包抗癌薬を選定し、in vitroおよび in vivoにおいて効果の確認、作用機序の検討を行う。
次年度使用額が生じた理由	研究の進行がやや遅延しており、それに伴い物品の購入も遅れているため。次年度には必要物品（試薬、細胞株、細胞培養用器具、薬品等）に使用を予定している。