腫瘍特異的siRNAデリバリーによるKRAS変異型大腸癌に対する新規治療法開発

2021 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 18K07979
• 研究機関: 名古屋市立大学
• 研究代表者: 志村 貴也 名古屋市立大学, 医薬学総合研究院(医学), 講師 (90405192)
• 研究分担者: 田上 辰秋 名古屋市立大学, 医薬学総合研究院(薬学), 准教授 (10609887) ; 尾関 哲也 名古屋市立大学, 医薬学総合研究院(薬学), 教授 (60277259)
• 研究期間 (年度): 2018-04-01 – 2022-03-31
• キーワード: 大腸癌 / KRAS変異 / DDS

研究実績の概要

KRAS変異型大腸癌に有意に高発現する膜結合性タンパクに対する抗体：抗MBP-X抗体をリポソーム表面に結合させたリポソームを担体とし、内部にsiKRASを内包した新規リポソームである①siKRAS-MBP-X-LPの他、コントロールとして表面にIgGを結合した②siKRAS-IgG-LP、非特異的siRNAのコントロール(siNT)を内包した③siNT-MBP-X-LP、④siNT-IgG-LPの4種類のリポソームを作成した。作成したリポソームがKRAS変異型大腸癌細胞の表面へ集積・結合することを、蛍光免疫染色やフローサイトメトリーにより確認するとともに、癌細胞中のKRASタンパクの発現が抑制されることを確認した。4種類のKRAS変異型大腸癌細胞株を用いた細胞増殖抑制効果の検討において、①siKRAS-MBP-X-LPが、他のリポソームに比べ、より強い細胞増殖抑制効果を示した。
さらにKRAS変異を高頻度みとめる膵癌細胞に対しても同様の実験を行い、リポソームの膵癌細胞への集積・結合とともに、膵癌細胞のKRAS遺伝子の発現を抑制することに加え、siKRAS-MBP-X-LPが膵癌細胞の増殖も抑制した。次のステップとして動物実験にて検証するために、研究分担者によりリポソームの作成過程を種々の条件下で検討していただいたが、リポソームの多量生産および長期の安定性を担保することが困難との結論に至り、動物実験での検証は行うことができなかった。

研究成果

• [雑誌論文] A Novel Urinary miRNA Biomarker for Early Detection of Colorectal Cancer. (2022)
  • 著者名/発表者名: Iwasaki H, Shimura T, Kitagawa M, Yamada T, Nishigaki R, Fukusada S, Okuda Y, Katano T, Horike SI, Kataoka H.
  • 雑誌名: Cancers 巻: 14 ページ: 461
  • DOI: 10.3390/cancers14020461.
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] The Risk Analyses of Lymph Node Metastasis and Recurrence for Submucosal Invasive Colorectal Cancer: Novel Criteria to Skip Completion Surgery (2022)
  • 著者名/発表者名: Ozeki T, Shimura T, Ozeki T, Ebi M, Iwasaki H, Kato H, Inaguma S, Okuda Y, Katano T, Nishie H, Takahashi S, Kataoka H
  • 雑誌名: Cancers 巻: 14 ページ: 822
  • DOI: 10.3390/cancers14030822.
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] Relationship between gene mutations and clinicopathological features in nonampullary duodenal epithelial tumors. (2021)
  • 著者名/発表者名: Fukusada S, Shimura T, Iwasaki H, Okuda Y, Katano T, Ozeki T, Kitagawa M, Nishie H, Tanaka M, Ozeki K, Kubota E, Tanida S, Kataoka H.
  • 雑誌名: Dig Liver Dis. 巻: Dec 24 ページ: in press
  • DOI: 10.1016/j.dld.2021.12.004.
  • 査読あり
• [雑誌論文] Urinary microRNA biomarkers for detecting the presence of esophageal cancer. (2021)
  • 著者名/発表者名: Okuda Y, Shimura T, Iwasaki H, Fukusada S, Nishigaki R, Kitagawa M, Katano T, Okamoto Y, Yamada T, Horike SI, Kataoka H.
  • 雑誌名: Sci Rep. 巻: 11 ページ: 8508
  • DOI: 10.1038/s41598-021-87925-1.
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] 5-aminolaevulinic acid (5-ALA) accumulates in GIST-T1 cells and photodynamic diagnosis using 5-ALA identifies gastrointestinal stromal tumors (GISTs) in xenograft tumor models. (2021)
  • 著者名/発表者名: Sasaki M, Tanaka M, Ichikawa H, Suzuki T, Nishie H, Ozeki K, Shimura T, Kubota E, Tanida S, Kataoka H
  • 雑誌名: PLoS One 巻: 16 ページ: e0249650
  • DOI: 10.1371/journal.pone.0249650.
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] Relationship between Immunophenotype and Clinicopathological Findings for Superficial Nonampullary Duodenal Epithelial Tumor. (2021)
  • 著者名/発表者名: Fukusada S, Shimura T, Iwasaki H, Okuda Y, Katano T, Nishigaki R, Ozeki T, Kitagawa M, Nishie H, Tanaka M, Ozeki K, Kubota E, Tanida S, Kataoka H.
  • 雑誌名: Digestion 巻: 102 ページ: 870
  • DOI: 10.1159/000514812.
  • 査読あり