Sirt7 による非ヒストン核タンパク HMGB１ 制御機構の解明

2018 年度 実施状況報告書

• 研究課題/領域番号: 18K08059
• 研究機関: 山形大学
• 研究代表者: 久保田 功 山形大学, 学内共同利用施設等, 理事 (30161673)
• 研究分担者: 宍戸 哲郎 山形大学, 医学部, 助教 (60400545)
• 研究期間 (年度): 2018-04-01 – 2021-03-31
• キーワード: Sirt7 / 心不全

研究実績の概要

心不全が新規に出現したり増悪するような状況下では心筋細胞のＤＮＡ障害が出現していることが知られており、非ヒストン核蛋白であるHigh mobility group box 1 (ＨＭＧＢ１)は、ＤＮＡ傷害に対する修復機構に関与するかについて検討を行った。我々は核内に存在するＨＭＧＢ１が心筋障害の抑制やHSP27の発現、抗アポトーシス作用があることを動物モデルで報告していることから、心不全患者の心筋細胞でのＨＭＧＢ１の局在を明らかにするとともに、心不全患者の心筋生検サンプルを用いて、ＨＭＧＢ１ とＤＮＡ傷害の程度の比較検討を行った。同意を得られている症例の心筋症患者から得られた生検サンプルの解析を行い、対象として当初心筋症が疑われたもの否定的であった症例から得られた生検サンプルを用いて検討を行った。心筋症患者から得られた心筋では、ＨＭＧＢ１は核内ではなく核外に局在変化していることを確認した。様々な指標がＤＮＡ傷害の指標として知られているが、今回は免疫染色法で γ-H2AXの変化を観察し、比較検討を行った。その結果、核内 ＨＭＧＢ１の減少に応じて、ＤＮＡ傷害の修復機構が障害を受け, 心不全の進展に関連することが示唆された。次に、ＨＭＧＢ１の脱アセチル化に関する検討を免疫沈降法を用いて行った。いくつかの候補タンパクがＨＭＧＢ１の脱アセチル化を促すことを明らかにした。さらに、これらの発現をＳｉＲＮＡを用いて抑制すると、Ｈ＜ＧＢ１の脱アセチル化が起こらなくなることを明らかにした。

現在までの達成度 (区分)

2: おおむね順調に進展している

理由

ＨＭＧＢ１の脱アセチル化に関与するタンパクをいくつか同定できているため。

今後の研究の推進方策

作用機序の解明、心肥大に与える効果の検討を行っていく。

次年度使用額が生じた理由

（理由）
予定されていた予算はほぼ使用したが1452円わずかに残金が生じた。
（使用計画）
来年度に消耗品購入に使用する予定である

研究成果

• [雑誌論文] Cardiac Nuclear High-Mobility Group Box 1 Ameliorates Pathological Cardiac Hypertrophy by Inhibiting DNA Damage Response (2019)
  • 著者名/発表者名: Tetsuya Takahashi, Tetsuro Shishido, Daisuke Kinoshita, Ken Watanabe, Taku Toshima, Takayuki Sugai, Taro Narumi, Yoichiro Otaki, Harutoshi Tamura, Satoshi Nishiyama, Takanori Arimoto, Hiroki Takahashi, Takuya Miyamoto, Tetsu Watanabe, Chang-Hoon Woo, Jun-ichi Abe, Yasuchika Takeishi, Isao Kubota and Masafumi Watanabe
  • 雑誌名: JACC: Basic to Translational Science 巻: 4 ページ: -
  • DOI: 10.1016/j.jacbts.2018.11.011
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] Ventricular wall stress and silent myocardial damage are associated with pulse pressure in the general population. (2018)
  • 著者名/発表者名: Takahashi T, Shishido T, Watanabe K, Sugai T, Toshima T, Kinoshita D, Yokoyama M, Tamura H, Nishiyama S, Takahashi H, Arimoto T, Miyamoto T, Watanabe T, Shibata Y, Konta T, Ueno Y, Kato T, Kayama T, Kubota I, Watanabe M.
  • 雑誌名: J Clin Hypertens (Greenwich). 巻: 20 ページ: 1319-1326
  • DOI: 10.1111/jch.13349. Epub 2018 Jul 23.
  • 査読あり / オープンアクセス
• [学会発表] Cardiac nuclear higt-mobility grop box 1 attenuates angiotesin Ⅱinduced pathological cardiac hypertrophy by inhibitting DAN damage response pathway. (2018)
  • 著者名/発表者名: T.Takahashi
  • 学会等名: ESC, Munich；2018.8
  • 国際学会