構造活性相関に基づく新規腎尿細管尿酸トランスポーターMCT9を分子標的とする創薬

2020 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 18K08200
• 研究機関: 千葉大学
• 研究代表者: 安西 尚彦 千葉大学, 大学院医学研究院, 教授 (70276054)
• 研究分担者: 大内 基司 獨協医科大学, 医学部, 准教授 (20409155)
• 研究期間 (年度): 2018-04-01 – 2021-03-31
• キーワード: トランスポーター

研究実績の概要

本研究ではMCT9分子標的創薬による新規尿酸降下薬の創製を目指し、(A)MCT9による尿酸輸送特性の更なる解析によるその構造活性相関の解明からの阻害化合物合成、(B)MCT9結合タンパク質同定と輸送制御機構の詳細、の２点の解析を目的とする。平成30年度は主に (A)についての解析を実施した。平成31年度／令和元年度は(A)の研究を継続するとともに、(B)については研究代表者がこれまでに実績を持つ酵母Two-hybrid法を用いた。その中で(1)新規尿酸トランスポーターMCT9の細胞内C末端配列をもつベイトベクターの作成に成功し、(2)ベイトベクターの酵母細胞でのタンパク質発現の確認を行い、(3)MCT9 C末端をベイトとした腎臓cDNAライブラリーのスクリーニングを行った結果、結合タンパク質の候補と思われる陽性クローンの取得に成功した。最終年度となる令和２年度はこれまでの成果の上に立ち、平成30年度に実施した(A)についての継続課題と、平成31年度／令和元年度に実施した(B)についての継続課題に取り組んだ。
継続課題(A)では、ほ乳類培養細胞HEK293に、Lipofection法を用いてMCT9遺伝子導入を行って作成したMCT9発現HEK293細胞を用いて、Chiba Chemical Libraryの化合物付加による、MCT9阻害候補化合物スクリーニングを実施したが、これまでのところ、有意な阻害効果を示す化合物の同定には至らなかった。初年度より進めてきたMCT9タンパク質の発現および精製に関しても種々の条件検討を行ったが、少量調整では成功するものの大量調整には至らなかった。継続課題(B)MCT9結合タンパク質候補陽性83クローンの酵母への再導入を行い、17クローンが再び陽性を示したため、この後のシークエンス解析によるタンパク質の同定に向けた酵母プラスミドの調整まで実施した。

研究成果

• [雑誌論文] Contribution of Rare Variants of the SLC22A12 Gene to the Missing Heritability of Serum Urate Levels (2020)
  • 著者名/発表者名: Misawa K, Hasegawa T, Mishima E, Jutabha P, Ouchi M, Kojima K, Kawai Y, Matsuo M, Anzai N, Nagasaki M.
  • 雑誌名: Genetics 巻: 214 ページ: 1079-1090
  • DOI: 10.1534/genetics.119.303006
  • 査読あり / オープンアクセス / 国際共著
• [雑誌論文] Recent approaches to gout drug discovery: an update. (2020)
  • 著者名/発表者名: Otani N, Ouchi M, Kudo H, Tsuruoka S, Hisatome I, Anzai N.
  • 雑誌名: Expert Opin Drug Discov. 巻: 15 ページ: 943-954
  • DOI: 10.1080/17460441.2020.1755251
  • 査読あり
• [雑誌論文] Uric Acid Elevation by Favipiravir, an Antiviral Drug. (2020)
  • 著者名/発表者名: Mishima E, Anzai N, Miyazaki M, Abe T.
  • 雑誌名: Tohoku J Exp Med. 巻: 251 ページ: 87-90
  • DOI: 10.1620/tjem.251.87
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] Evidence for Urate Uptake Through Monocarboxylate Transporter 9 Expressed in Mammalian Cells and Its Enhancement by Heat Shock (2020)
  • 著者名/発表者名: Otani N, Kurata Y, Maharani N, Kuwabara M, Ikeda N, Notsu T, Li P, Miake J, Yoshida A, Sakaguchi H, Higaki K, Nakasone N, Tsuneto M, Shirayoshi Y, Ouchi M, Ninomiya H, Yamamoto K, Anzai N, Hisatome I.
  • 雑誌名: Circ Rep . 巻: 2 ページ: 425-432
  • DOI: 10.1253/circrep.CR-20-0016
  • 査読あり / オープンアクセス
• [学会発表] ヒトの尿酸代謝：腸腎連関の解明に向けて (2020)
  • 著者名/発表者名: 安西尚彦、大内基司
  • 学会等名: 第51回日本消化吸収学会総会
  • 招待講演
• [図書] エース薬理学 (2020)
  • 著者名/発表者名: 金井好克、安西尚彦、安藤 仁、浅井 聰
  • 総ページ数: 303
  • 出版者: 南山堂
  • ISBN: 978-4-525-14071-7