メラノーマに対する遺伝子改変iPS細胞由来M1マクロファージ療法の開発

2018 年度 実施状況報告書

• 研究課題/領域番号: 18K08301
• 研究機関: 熊本大学
• 研究代表者: 福島 聡 熊本大学, 大学院生命科学研究部(医), 准教授 (50398210)
• 研究分担者: 尹 浩信 熊本大学, 大学院生命科学研究部(医), 教授 (20282634)
• 研究期間 (年度): 2018-04-01 – 2021-03-31
• キーワード: 免疫細胞療法 / iPS細胞 / マクロファージ / メラノーマ

研究実績の概要

B6マウスに同一の遺伝的背景を持つマウスメラノーマを播種させ、同系統のiPS細胞由来マクロファージ（iPS-MP）で治
療する実験系を用いて、IL-15、OX40L、4-1BBLによる遺伝子改変、あるいはSTINGリガンドの付与による効果増強を検証した。IL-15、OX40、4-1BBL遺伝子改変を行なったiPS-MPは、遺伝子改変をおこなっていないiPS-MPよりも、有意に腫瘍の播種を抑制した。また、STINGリガンドの付与も同様の傾向を示した。iPS-MPのin vitroの解析としては、マクロファージとしての特性を確認するため、フローサイトメトリー解析による細胞表面分子の解析、サイトカインアレイを用いた解析等についての解析を行なった。また、OX40L、4-1BBLを強制発現させたときのiPS-MPの抗原提示能、T細胞活性化能をマウス体内でのin vivo primingの系で検証した。結果として、抗原特異的なキラーT細胞の増加、メモリーT細胞の増加を示すデータを得た。IL-15を導入したiPS-MPについては、in vivo primingの系において、NK細胞を活性化することを確認した。また、ヒトへ応用する前臨床研究として、iPS-MPの腫瘍化や自己免疫現象等の副作用発現がないか検証するために、 B6マウスのiPS-MLにIL-15を遺伝子導入したもの、あるいは遺伝子導入していないiPS-MPを投与し、長期経過を観察した。予想通り、MHCが同じ、iPS-MPは腫瘍化する傾向を認めたが、allogenicなiPS-MPを用いれば、宿主の免疫によって徐々に排除され、腫瘍化しないことを確認した。また、このとき、各臓器に自己免疫現象も起きていないことを組織学的に確認した。

現在までの達成度 (区分)

1: 当初の計画以上に進展している

理由

計画した実験については、すべて進行中で、かつ結果も順調に得られている。上記の実験のうち、OX-40Lについてはとくに順調に進行し、論文投稿中である。IL-15および4-1BBLについても、論文作成中の段階である。

今後の研究の推進方策

現在、順調に計画は進捗しているため、このまま実験を継続する。IL-15、OX40L、4-1BBLに関する成果を論文化、学会発表へと持っていく。STING リガンドを用いた実験系は、まだ解析すべき実験が多くのこっているが、このまま継続すれば、研究機関内には結果を得ることができると考えている。

次年度使用額が生じた理由

適正な研究費使用に努め、ほぼ予定通り研究に使用したが、603円という少額が残存した。これについては、翌年度の物品購入に使用する予定である。

研究成果

• [雑誌論文] Recurrent Fusion Gene ADCK4-NUMBL in Cutaneous Squamous Cell Carcinoma Mediates?Cell?Proliferation. (2019)
  • 著者名/発表者名: Egashira S, Jinnin M, Makino K, Ajino M, Shimozono N, Okamoto S, Tazaki Y, Hirano A, Ide M, Kajihara I, Aoi J, Harada M, Igata T, Masuguchi S, Fukushima S, Ihn H
  • 雑誌名: The Journal of investigative dermatology 巻: 139 ページ: 954-957
  • DOI: 10.1016/j.jid.2018.09.030
  • 査読あり
• [雑誌論文] Overexpression of cyclin-dependent kinase 4 protein in extramammary Paget's disease. (2019)
  • 著者名/発表者名: Urata K, Kajihara I, Myangat TM, Tasaki Y, Otsuka-Maeda S, Sawamura S, Kanazawa-Yamada S, Sakamoto R, Makino K, Aoi J, Igata T, Makino T, Masuguchi S, Fukushima S, Jinnin M, Ihn H
  • 雑誌名: The Journal of dermatology 巻: 印刷中 ページ: 印刷中
  • DOI: 10.1111/1346-8138.14858
  • 査読あり
• [雑誌論文] Nivolumab-induced colitis in a patient with malignant melanoma: A case report and immunological analysis. (2019)
  • 著者名/発表者名: Miyashita A, Fukushima S, Tsukamoto H, Itai H, Miyamoto H, Nakahara S, Kubo Y, Kimura T, Kuriyama H, Ihn H
  • 雑誌名: The Journal of dermatology 巻: 印刷中 ページ: 印刷中
  • DOI: 10.1111/1346-8138.14857
  • 査読あり
• [雑誌論文] Serum concentrations of HGF are correlated with response to anti-PD-1 antibody therapy in patients with metastatic melanoma. (2019)
  • 著者名/発表者名: Kubo Y, Fukushima S, Inamori Y, Tsuruta M, Egashira S, Yamada-Kanazawa S, Nakahara S, Tokuzumi A, Miyashita A, Aoi J, Kajihara I, Tomita Y, Wakamatsu K, Jinnin M, Ihn H
  • 雑誌名: Journal of dermatological science 巻: 93 ページ: 33-10
  • DOI: 10.1016/j.jdermsci.2018.10.001
  • 査読あり
• [雑誌論文] Serum cytokine profiles are altered in patients with progressive infantile hemangioma. (2019)
  • 著者名/発表者名: Yamashita T, Jinnin M, Makino K, Kajihara I, Aoi J, Masuguchi S, Fukushima S, Ihn H
  • 雑誌名: Bioscience trends 巻: 12 ページ: 438-441
  • DOI: 10.5582/bst.2018.01118
  • 査読あり
• [雑誌論文] Case of cutaneous myoepithelioma managed with surgical resection without recurrence for 4?years. (2019)
  • 著者名/発表者名: Kanemaru H, Honda N, Kubo Y, Nishihara H, Onuma T, Sakai K, Fukushima S, Inoue Y, Honda Y, Ihn H
  • 雑誌名: The Journal of dermatology 巻: 印刷中 ページ: 印刷中
  • DOI: 10.1111/1346-8138.14769
  • 査読あり
• [雑誌論文] Onychomycosis caused by Aspergillus subramanianii. (2019)
  • 著者名/発表者名: Hirose M, Noguchi H, Yaguchi T, Matsumoto T, Hiruma M, Fukushima S, Ihn H
  • 雑誌名: The Journal of dermatology 巻: 45 ページ: 1362-1366
  • DOI: 10.1111/1346-8138.14616
  • 査読あり
• [雑誌論文] Natural course of epidermolysis bullosa simplex with mottled pigmentation in a Japanese family with the p.P25L mutation in KRT5. (2019)
  • 著者名/発表者名: Okamura K, Fukushima S, Yamashita J, Abe Y, Hayashi M, Hozumi Y, Ihn H, Suzuki T
  • 雑誌名: The Journal of dermatology 巻: 印刷中 ページ: 印刷中
  • DOI: 10.1111/1346-8138.14788
  • 査読あり
• [雑誌論文] Reduction of stratum corneum ceramides in Neu-Laxova syndrome caused by phosphoglycerate dehydrogenase deficiency. (2018)
  • 著者名/発表者名: Reduction of stratum corneum ceramides in Neu-Laxova syndrome caused by phosphoglycerate dehydrogenase deficiency.
  • 雑誌名: Journal of lipid research 巻: 59 ページ: 2413-1420
  • DOI: 10.1194/jlr.P087536
  • 査読あり
• [雑誌論文] Immune checkpoint inhibitors in the onset of myasthenia gravis with hyperCKemia. (2018)
  • 著者名/発表者名: Takamatsu K, Nakane S, Suzuki S, Kosaka T, Fukushima S, Kimura T, Miyashita A, Mukaino A, Yamakawa S, Watanabe K, Jinnin M, Komohara Y, Ihn H, Ando Y
  • 雑誌名: Annals of clinical and translational neurology 巻: 5 ページ: 1421-1427
  • DOI: 10.1002/acn3.654
  • 査読あり
• [雑誌論文] Topical efinaconazole: A promising therapeutic medication for tinea unguium. (2018)
  • 著者名/発表者名: Noguchi H, Matsumoto T, Hiruma M, Asao K, Hirose M, Fukushima S, Ihn H
  • 雑誌名: The Journal of dermatology 巻: 45 ページ: 1225-1228
  • DOI: 10.1111/1346-8138.14575
  • 査読あり
• [雑誌論文] Regulatory mechanisms of collagen expression by interleukin-22 signaling in scleroderma fibroblasts. (2018)
  • 著者名/発表者名: Sawamura S, Jinnin M, Inoue K, Yamane K, Honda N, Kajihara I, Makino T, Masuguchi S, Fukushima S, Ihn H
  • 雑誌名: Journal of dermatological science 巻: 90 ページ: 52-59
  • DOI: 10.1016/j.jdermsci.2017.12.017
• [雑誌論文] Combined Blockade of IL6 and PD-1/PD-L1 Signaling Abrogates Mutual Regulation of Their Immunosuppressive Effects in the Tumor Microenvironment. (2018)
  • 著者名/発表者名: Tsukamoto H, Fujieda K, Miyashita A, Fukushima S, Ikeda T, Kubo Y, Senju S, Ihn H, Nishimura Y, Oshiumi H
  • 雑誌名: Cancer research 巻: 78 ページ: 5011-5022
  • DOI: 10.1158/0008-5472.CAN-18-0118
  • 査読あり
• [雑誌論文] Dabrafenib and trametinib combination therapy safely performed in a patient with metastatic melanoma after severe liver toxicity due to vemurafenib. (2018)
  • 著者名/発表者名: Shimada S, Fukushima S, Niimori D, Miyashita A, Setoyama H, Sasaki Y, Ihn H
  • 雑誌名: The Journal of dermatology 巻: 45 ページ: 157-158
  • DOI: 10.1111/1346-8138.14206
  • 査読あり
• [雑誌論文] Simple and effective modification of the axial frontonasal flap to prevent flap distortion. (2018)
  • 著者名/発表者名: Aoi J, Kajihara I, Masuguchi S, Fukushima S, Ihn H
  • 雑誌名: The Journal of dermatology 巻: 46 ページ: 46-47
  • DOI: 10.1111/1346-8138.14506
  • 査読あり
• [雑誌論文] Severe bacterial sepsis results in delayed diagnosis of tuberculous lymphadenitis in a rheumatoid arthritis patient treated with adalimumab. (2018)
  • 著者名/発表者名: Sawamura S, Makino T, Johno T, Yamashita J, Niimori D, Fukushima S, Ihn H
  • 雑誌名: Intractable & rare diseases research 巻: 7 ページ: 138-140
  • DOI: 10.5582/irdr.2018.01050
  • 査読あり
• [雑誌論文] 免疫チェックポイント阻害薬による副作用とその対策 (2018)
  • 著者名/発表者名: 福島聡
  • 雑誌名: Vita 巻: 35 ページ: 64-70
• [学会発表] 腫瘍免疫の先駆け、メラノーマ (2018)
  • 著者名/発表者名: 福島聡
  • 学会等名: 第46回日本臨床免疫学会総会
• [学会発表] 皮膚悪性腫瘍の新しい生物学的製剤 (2018)
  • 著者名/発表者名: 福島聡
  • 学会等名: 第117回日本皮膚科学会総会
• [学会発表] 血清可溶性PD-L1濃度のメラノーマ患者における検討 (2018)
  • 著者名/発表者名: 福島聡、稲森有貴子、久保陽介、中原智史、宮下梓、鶴田美菜、徳澄亜紀、新森大佑、熊井良彦、高村晴香、折田頼尚、尹浩信
  • 学会等名: 第22回日本がん免疫学会総会
• [学会発表] Serum levels of soluble programmed death-ligand 1 in patients with metastatic melanoma (2018)
  • 著者名/発表者名: Satoshi FUKUSHIMA, Yukiko INAMORI, Yosuke KUBO, Satoshi NAKAHARA, Azusa MIYASHITA, Mina TSURUTA, Aki TOKUZUMI, Daisuke NIIMORI, Ikko KAJIHARA, Masatoshi JINNIN, Hironobu IHN1
  • 学会等名: 第77回日本癌学会学術総会
• [学会発表] Serum levels of soluble programmed death-ligand 1 in patients with metastatic melanoma treated with anti-programmed death-1 antibodies (2018)
  • 著者名/発表者名: S. FUKUSHIMA, Y. INAMORI, Y. KUBO S. NAKAHARA, A. MIYASHITA, M. KADOHISA, A. TOKUZUMI, D. NIIMORI, S. MASUGUCHI, M. JINNIN, H. IHN
  • 学会等名: 13th Meeting of the German-Japanese Society for Dermatology