メラノーマに対する遺伝子改変iPS細胞由来M1マクロファージ療法の開発

2019 年度 実施状況報告書

• 研究課題/領域番号: 18K08301
• 研究機関: 熊本大学
• 研究代表者: 福島 聡 熊本大学, 大学院生命科学研究部(医), 准教授 (50398210)
• 研究分担者: 尹 浩信 熊本大学, 大学院生命科学研究部(医), 教授 (20282634) [辞退]
• 研究期間 (年度): 2018-04-01 – 2021-03-31
• キーワード: メラノーマ / 免疫療法 / マクロファージ / iPS細胞

研究実績の概要

B6マウスに同一の遺伝的背景を持つマウスメラノーマを播種させ、同系統のiPS細胞由来マクロファージ（iPS-MP）で治
療する実験系を用いて研究を行った。IL-15、OX40L、4-1BBLによる遺伝子改変、あるいはSTINGリガンドの付与による効果増強を検証した。IL-15、OX40、4-1BBL遺伝子改変を行なったiPS-MPは、遺伝子改変をおこなっていないiPS-MPよりも、有意に腫瘍の播種を抑制した。また、STINGリガンドの付与も同様の傾向を示した。
今年度は特にiPS-MP-OX40L（OX40Lを高発現する遺伝子改変を行ったiPS-MP）の効果発現メカニズム、特に抗原特異的なT細胞に対する影響を解析した。モデル抗原として卵白アルブミン（OVA）とOVA発現マウスメラノーマ（MO4）を用いた。OVAペプチドを負荷したiPS-MP-OX40Lの投与によりマウス体内でOVA特異キラーT細胞が脾臓で増加すること、さらには腫瘍内浸潤も増加することを確認した。腫瘍内浸潤リンパ球の中で制御性T細胞は減少させ、エフェクターT細胞やエフェクターメモリーT細胞は増加させることも確認した。また不死化したiPS細胞をヒトへ応用する前臨床研究として、iPS-MPの腫瘍化や自己免疫現象等の副作用発現がないか検証するために、 B6マウスのiPS-MPにOX40Lを遺伝子導入したもの、あるいはMOCK遺伝子だけを導入したものについて長期経過を観察した。興味深いことに、MHCが同じiPS-MPは腫瘍化すると思われたが、遺伝子改変をしたiPS-MPはより免疫原性が高く排除される傾向にあることがわかった。またこのとき、各臓器に自己免疫現象も起きていないことを組織学的に確認した。

現在までの達成度 (区分)

2: おおむね順調に進展している

理由

OX40Lを用いた一連の実験結果については、Pigment cell & melanoma research誌にアクセプトされ、in pressの状態である。他の分子についても、実験は順調に進行している。とくに4-1BBLに関しては、論文作成中の段階である。IL-15と、STINGリガンド負荷については、まだ完全に実験は終了はしていないが、重要な実験成果はすでに得ており、あとは、メカニズムを解析する実験を追加する必要がある。以上より、本研究はおおむね順調に進展していると考える。

今後の研究の推進方策

4-1BBL、IL-15、STINGリガンドの実験結果について論文化に入る。さらにはiPS-MPプロジェクトを臨床につなげるために、効果の増強という面から免疫チェックポイント阻害薬との併用も検討する。また安全性を確認するために、MHC一部不一致のアロiPS細胞を用いた実験を行なうこと、安全装置としてのHSV-TKシステムなどの自殺遺伝子の導入することも検討していく。

研究成果

• [雑誌論文] Induced pluripotent stem cell-derived myeloid cells expressing OX40 ligand amplify antigen-specific T cells in advanced melanoma. (2020)
  • 著者名/発表者名: Kimura T, Fukushima S, Okada E, Kuriyama H, Kanemaru H, Kadohisa-Tsuruta M, Kubo Y, Nakahara S, Tokuzumi A, Kajihara I, Makino K, Miyashita A, Aoi J, Makino T, Tsukamoto H, Nishimura Y, Inozume Y, Zhang R, Uemura Y, Senju S, Ihn H.
  • 雑誌名: Pigment Cell & Melanoma Research. 巻: - ページ: -
  • 査読あり
• [雑誌論文] Inhibition of Endoglin Exerts Antitumor Effects through the Regulation of Non-Smad TGF-β Signaling in Angiosarcoma. (2020)
  • 著者名/発表者名: Sakamoto R, Kajihara I, Miyauchi H, Maeda-Otsuka S, Yamada-Kanazawa S, Sawamura S, Kanemaru H, Makino K, Aoi J, Makino T, Fukushima S, Masuzawa M, Masuzawa M, Amoh Y, Hoshina D, Abe R, Ihn H.
  • 雑誌名: J Invest Dermatol. 巻: - ページ: -
  • 査読あり
• [雑誌論文] Successful treatment of occult pancreatic melanoma using BRAF/MEK inhibitors. (2020)
  • 著者名/発表者名: Mizukami Y, Kanemaru H, Nakamura K, Hashigo S, Kajihara I, Miyashita A, Aoi J, Fukushima S, Honda Y, Ihn H.
  • 雑誌名: J Dermatol. 巻: 47 ページ: e126-e127
  • DOI: 10.1111/1346-8138.15198.
  • 査読あり
• [雑誌論文] MicroRNAs that predict the effectiveness of anti-PD-1 therapies in patients with advanced melanoma. (2020)
  • 著者名/発表者名: Nakahara S, Fukushima S, Okada E, Morinaga J, Kubo Y, Tokuzumi A, Matsumoto S, Tsuruta-Kadohisa M, Kimura T, Kuriyama H, Miyashita A, Kajihara I, Jinnin M, Ihn H.
  • 雑誌名: J Dermatol Sci. 巻: 97 ページ: 77-79
  • DOI: 10.1016/j.jdermsci.2019.11.010.
  • 査読あり
• [雑誌論文] Effect of topical immunotherapy with squaric acid dibutylester for alopecia areata in Japanese patients. (2020)
  • 著者名/発表者名: Sakai K, Fukushima S, Mizuhashi S, Jinnin M, Makino T, Inoue Y, Ihn H.
  • 雑誌名: Allergol Int. 巻: 69 ページ: 274-278
  • DOI: 10.1016/j.alit.2019.10.008.
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] IL-16 expression is increased in the skin and sera of patients with systemic sclerosis. (2020)
  • 著者名/発表者名: Kawabata K, Makino T, Makino K, Kajihara I, Fukushima S, Ihn H.
  • 雑誌名: Rheumatology (Oxford). 巻: 59 ページ: 519-523
  • DOI: 10.1093/rheumatology/kez318.
  • 査読あり
• [雑誌論文] Serious disseminated intravascular coagulation associated with combination therapy of nivolumab and ipilimumab in advanced melanoma. (2020)
  • 著者名/発表者名: Kuriyama H, Fukushima S, Nakahara S, Kanemaru H, Miyashita A, Aoi J, Tomita Y, Kawasaki T, Nosaka K, Ihn H.
  • 雑誌名: J Dermatol. 巻: - ページ: -
  • DOI: 10.1111/1346-8138.15336.
  • 査読あり
• [雑誌論文] Remarkable antitumor effect of nivolumab in a patient with metastatic renal cell carcinoma previously treated with a peptidebased vaccine. (2020)
  • 著者名/発表者名: Kurahashi R, Motoshima T, Fukushima Y, Murakami Y, Yatsuda J, Yamaguchi T, Sugiyama Y, Fukushima S, Komohara Y, Suekane S, Tomomi Kamba T.
  • 雑誌名: IJU Case Reports 巻: - ページ: -
  • 査読あり
• [雑誌論文] Non-small-cell Lung Cancer with Severe Skin Manifestations Related to Radiation Recall Dermatitis after Atezolizumab Treatment: A Case Report. (2020)
  • 著者名/発表者名: Nakashima K, Saruwatari K, Sato R, Imamura K, Kajihara I, Fukushima S, Saito T, Ishizuka S, Tamanoi D, Jodai T, Hamada S, Tomita Y, Saeki S, Ichiyasu H, Oya N, Ihn H, Sakagami T.
  • 雑誌名: Intern Med. 巻: - ページ: -
• [雑誌論文] Onychomycosis caused by Trichosporon cacaoliposimilis. (2020)
  • 著者名/発表者名: Noguchi H, Matsumoto T, Kimura U, Hiruma M, Kano R, Yaguchi T, Fukushima S, Ihn H.
  • 雑誌名: J Dermatol. 巻: - ページ: -
  • DOI: 10.1111/1346-8138.15305.
  • 査読あり
• [雑誌論文] Case of metastatic extramammary Paget's disease treated with trastuzumab-biosimilar monotherapy after S-1 and docetaxel combination chemotherapy. (2020)
  • 著者名/発表者名: Kimura T, Akamatsu Y, Kajihara I, Fukushima S, Ihn H. Ihn H.
  • 雑誌名: J Dermatol. 巻: 47 ページ: e1-e2
  • DOI: 10.1111/1346-8138.15096.
  • 査読あり
• [雑誌論文] Cytomegalovirus Enterocolitis in a Patient with Refractory Immune-Related Colitis (2020)
  • 著者名/発表者名: Furuta Y, Miyamoto H, Naoe H, Shimoda M, Hinokuma Y, Miyamura T, Miyashita A, Fukushima S, Tanaka M, Sasaki Y.
  • 雑誌名: Case Rep Gastroenterol. 巻: 14 ページ: 103-109
  • DOI: 10.1159/000506186.
  • 査読あり
• [雑誌論文] he Warburg effect and tumour immune microenvironment in extramammary Paget's disease: overexpression of lactate dehydrogenase A correlates with immune resistance. (2019)
  • 著者名/発表者名: Urata K, Kajihara I, Miyauchi H, Mijiddorj T, Otsuka-Maeda S, Sakamoto R, Sawamura S, Kanemaru H, Kanazawa-Yamada S, Makino K, Aoi J, Makino T, Fukushima S, Komohara Y, Ihn H.
  • 雑誌名: J Eur Acad Dermatol Venereol. 巻: - ページ: -
  • DOI: 10.1111/jdv.16145.
  • 査読あり
• [雑誌論文] Japanese Dermatological Association Guidelines: Outlines of guidelines for cutaneous melanoma 2019. (2019)
  • 著者名/発表者名: Nakamura Y, Asai J, Igaki H, Inozume T, Namikawa K, Hayashi A, Fukushima S, Fujimura T, Ito T, Imafuku K, Tanaka R, Teramoto Y, Minagawa A, Miyagawa T, Miyashita A, Wada M, Koga H, Sugaya M.
  • 雑誌名: J Dermatol. 巻: 47 ページ: 89-103
  • DOI: 10.1111/1346-8138.15151.
  • 査読あり
• [雑誌論文] Royal jelly regulates the proliferation of human dermal microvascular endothelial cells through the down-regulation of a photoaging-related microRNA. (2019)
  • 著者名/発表者名: Kawano Y, Makino K, Jinnin M, Sawamura S, Shimada S, Fukushima S, Ihn H.
  • 雑誌名: Drug Discov Ther. 巻: 13 ページ: 268-273
  • DOI: 10.5582/ddt.2019.01070.
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] Differential predictive factors for cardiovascular events in patients with or without cancer history. (2019)
  • 著者名/発表者名: Sueta D, Tabata N, Ikeda S, Saito Y, Ozaki K, Sakata K, Matsumura T, Yamamoto-Ibusuki M, Murakami Y, Jodai T, Fukushima S, Yoshida N, Kamba T, Araki E, Iwase H, Fujii K, Ihn H, Kobayashi Y, Minamino T, Yamagishi M, Maemura K, Baba H, Matsui K, Tsujita K.
  • 雑誌名: Medicine (Baltimore). 巻: 98 ページ: e17602.
  • DOI: 10.1097/MD.0000000000017602.
  • 査読あり
• [雑誌論文] Dermatologic Oncology Group of the Japan Clinical Oncology Group. Confirmatory trial of non-amputative digit preservation surgery for subungual melanoma: Japan Clinical Oncology Group study (JCOG1602, J-NAIL study protocol). (2019)
  • 著者名/発表者名: Tanaka K, Nakamura Y, Mizutani T, Shibata T, Tsutsumida A, Fukuda H, Matsushita S, Aoki M, Namikawa K, Ohe S, Fukushima S, Yamazaki N
  • 雑誌名: BMC Cancer. 巻: 19 ページ: 1002
  • DOI: 10.1186/s12885-019-6248-2.
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] Type I Interferon Delivery by iPSC-Derived Myeloid Cells Elicits Antitumor Immunity via XCR1+ Dendritic Cells. (2019)
  • 著者名/発表者名: Tsuchiya N, Zhang R, Iwama T, Ueda N, Liu T, Tatsumi M, Sasaki Y, Shimoda R, Osako Y, Sawada Y, Kubo Y, Miyashita A, Fukushima S, Cheng Z, Nakaki R, Takubo K, Okada S, Kaneko S, Ihn H, Kaisho T, Nishimura Y, Senju S, Endo I, Nakatsura T, Uemura Y.
  • 雑誌名: Cell Rep. 巻: 29 ページ: 162-175
  • DOI: 10.1016/j.celrep.2019.08.086.
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] Japanese real-world study of sequential nivolumab and ipilimumab treatment in melanoma. (2019)
  • 著者名/発表者名: Tsutsumida A, Fukushima S, Yokota K, Yoshikawa S, Yamasaki O, Tanemura A, Okuyama R, Uhara H, Muto Y, Miyashita A, Akiyama M, Kaji T, Koga H, Kato J, Katayama T, Itakura E, Yamazaki N, Kiyohara Y.
  • 雑誌名: J Dermatol. 巻: 46 ページ: 947-955
  • DOI: 10.1111/1346-8138.15073.
  • 査読あり
• [雑誌論文] A potential significance of circ_0024169 down regulation in angiosarcoma tissue. (2019)
  • 著者名/発表者名: Nakashima S, Jinnin M, Ide M, Kajihara I, Igata T, Harada M, Masuguchi S, Fukushima S, Masuzawa M, Masuzawa M, Amoh Y, Ihn H.
  • 雑誌名: Intractable Rare Dis Res. 巻: 8 ページ: 129-133
  • DOI: 10.5582/irdr.2019.01034.
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] Classification of 3097 patients from the Japanese melanoma study database using the American joint committee on cancer eighth edition cancer staging system. (2019)
  • 著者名/発表者名: Fujisawa Y, Yoshikawa S, Minagawa A, Takenouchi T, Yokota K, Uchi H, Noma N, Nakamura Y, Asai J, Kato J, Fujiwara S, Fukushima S et al.
  • 雑誌名: J Dermatol Sci. 巻: 94 ページ: 284-289
  • DOI: 10.1016/j.jdermsci.2019.04.003.
  • 査読あり
• [雑誌論文] Clinical and histopathological characteristics and survival analysis of 4594 Japanese patients with melanoma. (2019)
  • 著者名/発表者名: Fujisawa Y, Yoshikawa S, Minagawa A, Takenouchi T, Yokota K, Uchi H, Noma N, Nakamura Y, Asai J, Kato J, Fujiwara S, Fukushima S et al.
  • 雑誌名: Cancer Med. 巻: 8 ページ: 2146-2156
  • DOI: 10.1002/cam4.2110.
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] Nivolumab-induced colitis in a patient with malignant melanoma: A case report and immunological analysis. (2019)
  • 著者名/発表者名: Miyashita A, Fukushima S, Tsukamoto H, Itai H, Miyamoto H, Nakahara S, Kubo Y, Kimura T, Kuriyama H, Ihn H.
  • 雑誌名: J Dermatol. 巻: 46 ページ: e339-e341
  • DOI: 10.1111/1346-8138.14857.
  • 査読あり
• [雑誌論文] Overexpression of cyclin-dependent kinase 4 protein in extramammary Paget's disease. (2019)
  • 著者名/発表者名: Urata K, Kajihara I, Myangat TM, Tasaki Y, Otsuka-Maeda S, Sawamura S, Kanazawa-Yamada S, Sakamoto R, Makino K, Aoi J, Igata T, Makino T, Masuguchi S, Fukushima S, Jinnin M, Ihn H.
  • 雑誌名: J Dermatol. 巻: 46 ページ: 444-448
  • DOI: 10.1111/1346-8138.14858.
  • 査読あり
• [雑誌論文] Serum cell-free DNA levels are a useful marker for extramammary Paget disease. (2019)
  • 著者名/発表者名: Mijiddorj T, Kajihara I, Tasaki Y, Otsuka-Maeda S, Sakamoto R, Sawamura S, Kanazawa-Yamada S, Egashira S, Inoue K, Makino K, Miyashita A, Aoi J, Igata T, Makino T, Masuguchi S, Fukushima S, Jinnin M, Morinaga J, Ikeda T, Ihn H.
  • 雑誌名: Br J Dermatol. 巻: 181 ページ: 505-511
  • DOI: 10.1111/bjd.17709.
  • 査読あり
• [雑誌論文] Recurrent Fusion Gene ADCK4-NUMBL in Cutaneous Squamous Cell Carcinoma Mediates Cell Proliferation. (2019)
  • 著者名/発表者名: Egashira S, Jinnin M, Makino K, Ajino M, Shimozono N, Okamoto S, Tazaki Y, Hirano A, Ide M, Kajihara I, Aoi J, Harada M, Igata T, Masuguchi S, Fukushima S, Ihn H.
  • 雑誌名: J Invest Dermatol. 巻: 139 ページ: 954-957
  • DOI: 10.1016/j.jid.2018.09.030.
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] Tinea unguium caused by terbinafine-resistant Trichophyton rubrum successfully treated with fosravuconazole. (2019)
  • 著者名/発表者名: Noguchi H, Matsumoto T, Hiruma M, Kimura U, Kano R, Yaguchi T, Fukushima S, Ihn H.
  • 雑誌名: J Dermatol. 巻: 46 ページ: e446-e447
  • DOI: 0.1111/1346-8138.15033.
  • 査読あり
• [雑誌論文] Fungal melanonychia caused by Candida parapsilosis successfully treated with oral fosravuconazole. (2019)
  • 著者名/発表者名: Noguchi H, Matsumoto T, Kimura U, Hiruma M, Kano R, Yaguchi T, Fukushima S, Ihn H.
  • 雑誌名: J Dermatol. 巻: 46 ページ: 911-913
  • DOI: 10.1111/1346-8138.15024.
  • 査読あり
• [雑誌論文] Interdigital Hyalohyphomycosis Caused by Members of the Fusarium solani Species Complex. (2019)
  • 著者名/発表者名: Noguchi H, Matsumoto T, Hiruma M, Kimura U, Yaguchi T, Hirose M, Fukushima S, Ihn H.
  • 雑誌名: Acta Derm Venereol. 巻: 99 ページ: 835-836
  • DOI: 10.2340/00015555-3202.
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] Natural course of epidermolysis bullosa simplex with mottled pigmentation in a Japanese family with the p.P25L mutation in KRT5. (2019)
  • 著者名/発表者名: Okamura K, Fukushima S, Yamashita J, Abe Y, Hayashi M, Hozumi Y, Ihn H, Suzuki T
  • 雑誌名: J Dermatol. 巻: 46 ページ: e233-e235
  • DOI: 10.1111/1346-8138.14788.
  • 査読あり
• [雑誌論文] Case of cutaneous myoepithelioma managed with surgical resection without recurrence for 4 years. (2019)
  • 著者名/発表者名: Kanemaru H, Honda N, Kubo Y, Nishihara H, Onuma T, Sakai K, Fukushima S, Inoue Y, Honda Y, Ihn H.
  • 雑誌名: J Dermatol. 巻: 46 ページ: e206-e208
  • DOI: 10.1111/1346-8138.14769.
  • 査読あり
• [学会発表] Combination of anti-IL-6 and anti-PD-L1 antibodies synergistically induced a potent cancer immunity by activating both CTL and Th1 cells in mice. (2019)
  • 著者名/発表者名: Nishimura Y, Fujieda K, Miyashita A, Fukushima S, Ikeda T, Kubo Y, Senju S, Ihn H, Oshiumi H, Tsukamoto H.
  • 学会等名: AACR (American Association for Cancer Research)
  • 国際学会