移植前にGVHD関連T細胞を推定するヒト急性GVHDにおけるT細胞応答の解析

2020 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 18K08321
• 研究機関: 名古屋大学
• 研究代表者: 村田 誠 名古屋大学, 医学系研究科, 准教授 (40378063)
• 研究期間 (年度): 2018-04-01 – 2021-03-31
• キーワード: 造血幹細胞移植 / 移植片対宿主病 / T細胞 / アロ抗原 / T細胞受容体

研究実績の概要

本研究では、ヒト急性移植片対宿主病（GVHD）組織に浸潤しているT細胞のT細胞受容体（TCR）塩基配列を次世代シークエンサーにより網羅的に決定し、TCRレパトアの偏りの強さとGVHD重症度・治療反応性などとの相関を明らかにする。また、患者とドナーの末梢血単核球（PBMC）を混合培養（MLR）することで、GVHD組織浸潤T細胞中の高頻度T細胞クローン（GVHD関連T細胞クローン）をin vitro assayにより推定可能かどうかを明らかにする。
平成30年度から令和2年度に、皮膚急性GVHD発症患者29例から計32検体のGVHD皮膚生検組織の提供を受けた。生検組織浸潤T細胞のTCR塩基配列を決定し、シンプソン多様性指数（1/Ds）を用いてTCRレパトアの偏りを評価した。その結果、皮膚GVHDの重症度（stage）が高い症例で1/Dsが低値となる傾向が確認された。また、stage 2と3の皮膚GVHDに限定した場合、ならびにstage 3の皮膚GVHDに限定した場合のいずれにおいても、ステロイド治療難反応性の症例で1/Dsが低値となる傾向が確認された。
また平成30年度から令和2年度に、4組の患者・ドナーペアから末梢血の提供を受けMLRを行った。患者PBMCで刺激し分裂したドナーT細胞のTCRと、ドナーPBMCで刺激し分裂したドナーT細胞（コントロール）のTCRの違いに着目し、4組それぞれにおいて228、221、261、73個のアロ反応性T細胞TCRを決定した。そしてそれらTCRの、移植後に発症した皮膚GVHD組織における頻度を確認したところ、予想に反して高頻度（10%以上と定義）を示すクローンはなかった。

研究成果

• [雑誌論文] A multicenter phase II study of intrabone single-unit cord blood transplantation without antithymocyte globulin. (2021)
  • 著者名/発表者名: Nishida T, Kobayashi T, Sawa M, Masuda S, Shibasaki Y, Goto T, Fukuhara N, Fujii N, Ikegame K, Sugita J, Ikeda T, Kuwatsuka Y, Suzuki R, Najima Y, Doki N, Kato T, Inagaki Y, Utsu Y, Aotsuka N, Masuko M, Terakura S, Onishi Y, Maeda Y, Okada M, Teshima T, Murata M.
  • 雑誌名: Annals of Hematology 巻: 100 ページ: 743～752
  • DOI: 10.1007/s00277-020-04365-z
  • 査読あり
• [雑誌論文] Outcome of Allogeneic Hematopoietic Stem Cell Transplantation in Patients with Myelodysplastic/Myeloproliferative Neoplasms-Unclassifiable: A Retrospective Nationwide Study of the Japan Society for Hematopoietic Cell Transplantation. (2020)
  • 著者名/発表者名: Kurosawa S, Shimomura Y, Tachibana T, Ishiyama K, Ota S, Kobayashi T, Uchida N, Fukushima K, Ashida T, Matsuoka K, Kanda J, Ichinohe T, Atsuta Y, Murata M, Aoki J.
  • 雑誌名: Biology of Blood and Marrow Transplantation 巻: 26 ページ: 1607～1611
  • DOI: 10.1016/j.bbmt.2020.05.013
  • 査読あり
• [雑誌論文] Capturing Differential Allele-Level Expression and Genotypes of All Classical HLA Loci and Haplotypes by a New Capture RNA-Seq Method. (2020)
  • 著者名/発表者名: Yamamoto F, Suzuki S, Mizutani A, Shigenari A, Ito S, Kametani Y, Kato S, Fernandez-Via M, Murata M, Morishima S, Morishima Y, Tanaka M, Kulski JK, Bahram S, Shiina T.
  • 雑誌名: Frontiers in Immunology 巻: 11 ページ: 941
  • DOI: 10.3389/fimmu.2020.00941
  • 査読あり / オープンアクセス / 国際共著
• [雑誌論文] Prospective evaluation of alternative donor from unrelated donor and cord blood in adult acute leukemia and myelodysplastic syndrome. (2020)
  • 著者名/発表者名: Terakura S, Nishida T, Sawa M, Kato T, Miyao K, Ozawa Y, Goto T, Kohno A, Ozeki K, Onishi Y, Fukuhara N, Fujii N, Yokoyama H, Kasai M, Iida H, Kanemura N, Endo T, Ago H, Onizuka M, Iyama S, Nawa Y, Nakamae M, Nagata Y, Kurahashi S, Tomiya Y, Yanagisawa A, Suzuki R, Kuwatsuka Y, Atsuta Y, Miyamura K, Murata M.
  • 雑誌名: Bone Marrow Transplantation 巻: 55 ページ: 1399～1409
  • DOI: 10.1038/s41409-020-0859-8
  • 査読あり
• [雑誌論文] Allogeneic Hematopoietic Stem Cell Transplantation for Post-essential Thrombocythemia and Post-polycythemia Vera Myelofibrosis. (2020)
  • 著者名/発表者名: Murata M, Suzuki R, Nishida T, Shirane S, Shimazu Y, Minami Y, Mori T, Doki N, Kanda Y, Uchida N, Tanaka M, Ishikawa J, Togitani K, Fukuda T, Ichinohe T, Atsuta Y, Nagamura-Inoue T, Kiyoi H.
  • 雑誌名: Internal Medicine 巻: 59 ページ: 1947～1956
  • DOI: 10.2169/internalmedicine.4375-19
  • 査読あり / オープンアクセス
• [学会発表] HSCT for Myelofibrosis in Japan. (2020)
  • 著者名/発表者名: Murata M.
  • 学会等名: The International Congress of BMT 2020
  • 国際学会 / 招待講演
• [学会発表] Phase I study of cord blood transplantation with intra-bone marrow injection of MSC. (2020)
  • 著者名/発表者名: Goto T, Murata M, Nishida T, Terakura S, Kamoshita S, Ishikawa Y, Ushijima Y, Adachi Y, Kato K, Hirakawa A, Nishiwaki S, Nishio N, Takahashi Y, Kodera Y, Matsushita T, Kiyoi H.
  • 学会等名: 第82回日本血液学会学術集会
• [学会発表] Prospective evaluation of alternative donor from unrelated donor and cord blood in adult AL and MDS. (2020)
  • 著者名/発表者名: Goto T, Terakura S, Nishida T, Sawa M, Kato T, Miyao K, Ozawa Y, Kohno A, Ozeki K, Onishi Y, Fukuhara N, Fujii N, Yokoyama H, Kasai M, Iida H, Kanemura N, Endo T, Ago H, Onizuka M, Iyama S, Nagata Y, Kurahashi S, Yanagisawa A, Suzuki R, Kuwatsuka Y, Atsuta Y, Miyamura K, Murata M.
  • 学会等名: 第82回日本血液学会学術集会