| 研究課題/領域番号 |
18K08372
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| 研究機関 | 順天堂大学 |
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研究代表者 |
楊 インジェ 順天堂大学, 医学部, 助教 (90808643)
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| 研究分担者 |
小松 則夫 順天堂大学, 医学部, 教授 (50186798)
今井 美沙 順天堂大学, 医学(系)研究科(研究院), 助教 (50709003)
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| 研究期間 (年度) |
2018-04-01 – 2021-03-31
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| キーワード | 骨髄増殖性腫瘍 / 変異型CALR / 低分子化合物 |
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| 研究実績の概要 |
フィラデルフィア染色体陰性の骨髄増殖性腫瘍（以下MPNと略する）は、造血幹細胞レベルに体細胞変異が生じることで引き起こされる造血器の腫瘍である。MPNの予後は概ね良好であるが、一部の患者は、血栓症の併発による著しいQOLの低下や、予後不良の骨髄線維症や急性白血病を発症する。最新の分子標的薬を用いても寛解には至らず、根治は、治療関連死のリスクのある造血幹細胞移植に限られていることから、根治を目指した有効な治療薬の開発が切望されている。そこで、我々が同定した変異型CALR依存性の細胞増殖および変異型CALRによるTPO非依存性のMPL活性化を阻害する低分子化合物が変異型 CALR とMPLの分子間相互作用に影響を与えるか評価を行なった。具体的には、FLAG タグを付加したCALR 遺伝子 を導入した UT-7/TPO 細胞や、FLAG タグを付加した変異型CALR 遺伝子や受容体であるMPL遺伝子をリポフェクションにより発現させた HEK293T 細胞を低分子化合物とともに一定時間培養後、細胞抽出液を調製し、抗FLAG抗体を添加してからProtein Gビーズと反応させることで、変異型CALR とMPLの結合が阻害されるかの評価を行なった。その結果、同定した低分子化合物は変異型 CALR とMPLの分子間相互作用に影響を与えないことが明らかとなった。現在は、骨髄増殖腫瘍患者より樹立したiPS細胞やMPN病態モデルマウスを用いて我々が同定した低分子化合物が、腫瘍性巨核球増殖に与える影響の解析を行なっている。本研究により、腫瘍細胞選択性の高い低分子化合物の作用メカニズムの解明と医薬候補分子としての可能性が明らかにされ、MPNの根治を目指した有効な治療薬の開発が推進されることが期待される。
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| 現在までの達成度 (区分) |
現在までの達成度 (区分)
2: おおむね順調に進展している
理由
同定した低分子化合物は変異型 CALR とMPLの分子間相互作用に影響を与えなかった。しかしながら、現在は、当初の計画通り、骨髄増殖腫瘍患者より樹立したiPS細胞やMPN病態モデルマウスを用いて同定した低分子化合物が、腫瘍性巨核球増殖に与える影響や医薬候補分子としての可能性の検証を行なっていることから、概ね研究は順調に進んでいると言える。
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| 今後の研究の推進方策 |
骨髄増殖性腫瘍の患者さんより樹立したiPS細胞と患者細胞を用いて、低分子化合物の腫瘍性巨核球増殖に与える影響について解析を行うとともに、MPN疾患モデルマウスを用いて同定した低分子化合物の医薬候補分子としての可能性の実証する予定である。
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| 次年度使用額が生じた理由 |
研究協力者の協力により、研究は順調に進んでいるが、一部の試薬の購入を見送ったことで次年度使用額が生じた。次年度使用額は、細胞の培養に必要な培地や血清、低分子化合物の購入費用などの一部に使用する予定である。
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