関節リウマチにおけるシトルリン化ITIH4蛋白の病因的意義の探索

2018 年度 実施状況報告書

• 研究課題/領域番号: 18K08403
• 研究機関: 筑波大学
• 研究代表者: 松本 功 筑波大学, 医学医療系, 准教授 (30343081)
• 研究期間 (年度): 2018-04-01 – 2021-03-31
• キーワード: 関節リウマチ

研究実績の概要

A）新規バイオマーカ―になり得る血清cit-ITIH4定量のELISAキット開発
ITIH4全長蛋白をバクテリア、哺乳類細胞で作成し、全長ヒトITIH4蛋白を得た。この蛋白をシトルリン化して免疫した。また、用同研究でR438をシトルリン化（R438Cit）した15merのペプチドを免疫し、10種類以上のモノクローナル抗体作製に成功した。これらモノクローナル抗体はPADでシトルリン化したITIH4蛋白に反応し手織り、関節リウマチ患者血清のcit-ITIH4への反応性を検討している。
B）Cit-ITIH4の産生メカニズムと病因的意義
関節リウマチ患者関節液でもcit-ITIH4が疾患特異的に存在することが判明し、局所のITIH4濃度も上昇していた。関節局所でのCit-ITIH4の産生メカニズムに関して、関節炎動物モデルを使用し、局所の好中球、その細胞の保持するPAD4酵素が関節局所でのcit-ITIH4の産生に関与している可能性が示唆され、検討を進めている。

現在までの達成度 (区分)

2: おおむね順調に進展している

理由

cit-ITIH4モノクローナル抗体、ITIH4蛋白の作成に成功し、順調に経過している。

今後の研究の推進方策

A),B)とも順調に進んでおり、バイオマーカとしてのCit-ITIH4測定ELISAシステムの構築、また、cit-ITIH4の関節炎における病因的意義を明らかにできると考えている。

研究成果

• [雑誌論文] Peptidyl arginine deiminase inhibition suppresses arthritis via decreased protein citrullination in joints and serum with the downregulation of interlukin-6. (2019)
  • 著者名/発表者名: Kawaguchi H, *Matsumoto I, Osada A, Kurata I, Ebe H, Tanaka Y, Inoue A, Umeda N, Kondo Y, Tsuboi H, Ishigami A, Sumida T.
  • 雑誌名: Modern Rheumatology 巻: in press ページ: in press
  • 査読あり
• [雑誌論文] Identification of novel biomarker as citrullinated inter-alpha-trypsin inhibitor heavy chain 4, specifically increased in sera with experimental and rheumatoid arthritis. (2018)
  • 著者名/発表者名: Kawaguchi H, *Matsumoto I, Osasda A, Kurata I, Ebe H, Tanaka Y, Inoue A, Umeda N, Kondo Y, Tsuboi H, Shinkai Y, Kumagai Y, Ishigami A, Sumida T.
  • 雑誌名: Arthritis Res Ther 巻: 20 ページ: 66
  • 査読あり