| 研究課題/領域番号 |
18K08499
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| 研究機関 | 東北福祉大学 |
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研究代表者 |
井樋 慶一 東北福祉大学, 健康科学部, 教授 (60232427)
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| 研究分担者 |
佐藤 達也 東北大学, 情報科学研究科, 准教授 (00568222) [辞退]
内田 克哉 東北大学, 情報科学研究科, 助教 (40344709) [辞退]
山形 聡 弘前大学, 医学部附属病院, 助教 (50769940) [辞退]
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| 研究期間 (年度) |
2018-04-01 – 2021-03-31
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| キーワード | ドライバーマウス / 視床下部 / コルチコトロピン / 糖質コルチコイド / ストレス / 光遺伝学 / ウイルスベクター |
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| 研究実績の概要 |
視床下部室傍核（PVH）に存在するコルチコトロピン放出因子（CRF）産生ニューロンは視床下部‐下垂体‐副腎（HPA）系を活性化しストレスから生体を防御する．我々はPVH の CRF ニューロンが正中隆起以外にも複数の脳内領域に直接投射し，しかも， CRF ニューロンの細胞体は投射領域に対応して PVH 内で subnuclei（亜核）を形成していることを発見した．そこで本研究では亜核ごとの細胞構築と機能の解明に着手した．まず，CRF ニューロン選択的 Cre 発現マウス（CRF-iCreDeltaNeo）を用い，CRF ニューロン一次投射野に逆行性ウイルスベクター HiRetを注入し，亜核選択的に蛍光タンパク質を発現させて亜核の細胞構築を明らかにした．すなわち，PVH CRFニューロンの一次投射野として同定された領域のうち，視床下部外側核（LH），青斑核(LC)/外側結合腕傍核（LPB），または背側縫線核（DR）にCre依存的GFP発現HiRetレンチウイルスベクターを注入し，GFP発現細胞の分布を検討したところ，これらが互いに異なるニューロン群であることが明らかにされた．次に，末梢から逆行性神経トレーサーFluoro-Goldを投与して正中隆起投射性ニューロンを同定し，上記ニューロンの分布と比較検討したところ，これらは脳内投射性CRFニューロン群と異なることが明らかにされた．さらに，同様の手法を用いて，CRF-iCreDeltaNeoマウスのLH，LC/LPB，またはDRにCre依存的チャネルロドプシン2発現HiRetまたは，Cre依存的陰イオン性チャネルロドプシン2発現HiRetを注入した．そして，予めPVH内に光ファイバーを植え込みLED光源から青色光照射を行い，マウスの行動を解析して亜核ごとの機能解明を試みているが，未だ実験が完了しておらず現在引き続き検討中である．
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