NAFLD病態改善作用を持つ新規化合物の探索および特異的バイオマーカーの探索

2018 年度 実施状況報告書

• 研究課題/領域番号: 18K08654
• 研究機関: 大阪市立大学
• 研究代表者: 竹村 茂一 大阪市立大学, 大学院医学研究科, 講師 (00322363)
• 研究分担者: 南山 幸子 京都府立大学, 生命環境科学研究科, 教授 (00362989) ; 久保 正二 大阪市立大学, 大学院医学研究科, 准教授 (80221224)
• 研究期間 (年度): 2018-04-01 – 2021-03-31
• キーワード: 脂肪性肝炎 / 肝線維化

研究実績の概要

非アルコール性脂肪性肝疾患（NAFLD）や非アルコール性脂肪肝炎（NASH）の病態進展にマクロファージ（MΦ）の活性化は重要な役割を演じている。種々のシグナル伝達物質により活性化されたMΦは炎症型のM1型と抗炎症型のM2型に分極することが知られている。我々は様々な肝硬変モデルやMΦ細胞株を用いてSアリル化合物によりMΦの分極を制御できることを報告してきた。本研究の目的はSアリルグルタチオン（SAG）によるMΦ分極制御を介したNAFLD／NASH病態の進展抑制効果を検討することである。同時にMΦの分極に関与する生理活性セラミドを病態別に解析することで、NAFLD/NASHの病態増悪の関与するセラミド分子種を同定し、新規バイオマーカーとなりうるかを検討する。
初年度である平成30年度は既報を参考に下記のNAFLDモデルラットを作成した。すなわちSprangue-Dawley雄性ラットに高脂肪食（脂質エネルギー比40%）にコレステロール2.5%付加を与え20週、30週、40週まで飼育し、脂肪肝並びに肝線維化の進行状態を確認したが、脂肪肝のみで線維化が生じないことが判明した。そこで高脂肪食を新規食餌内容に変更し、21週後に肝脂肪化および線維化を確認したところ高度な脂肪化、酸化ストレス関連タンパクの増加並びにマクロファージの分極の変化、軽度の線維化を確認できた。さらに同モデルに肝での慢性炎症由来の線維化を惹起するため、よりヒトNAFLD病態に近いモデル作成のため新規モデルを作成中である。予定より実験進行は遅れているが、プレリミナリーな実験ではより有用なモデルが作成できたため、次年時以降、前述の本実験に進む予定である。

現在までの達成度 (区分)

3: やや遅れている

理由

当初研究計画に記載の既報のようなNAFLD・NASHモデルでは脂肪肝は惹起されるが、線維化は生じないことが判明した。また、我々の考案した新規モデルでは高度脂肪肝並びに軽度の線維化が惹起されるが、未だ線維化は不十分であると考えられる。そこでさらにひとNAFLD/NASH病態に近い病態を作成するために種々の工夫を加え、プレリミナリーではあるが動物モデルの作成に至った。本実験モデル作成の過程は、最低1～1.5ヶ月単位の期間がかかるため、新規モデルの作成のために長時間を要した。現在、新規モデルを作成し、計画書に記載の実験内容を遂行中である。

今後の研究の推進方策

より有効な実験モデルの確立できたため、当初の実験モデルを変更し、新規モデルの特徴を解析の上、当初研究計画に記載のごとくSAGの治療効果および線維化抑制効果の確認をはじめ、研究計画に記載の項目につき検討していく予定である。

次年度使用額が生じた理由

当初研究計画に記載の既報のようなNAFLD・NASHモデルでは脂肪肝は惹起されるが、ヒト類似の肝線維化は生じないことが判明した。結果、我々は新規モデルを考案する必要があり、予備実験のための時間を要したため、研究経過のように実験が進んでいない。しかし現在すでに記述のごとく実験モデルは確立し、現在、研究計画推進に向けて実験を進行中である。

研究成果

• [雑誌論文] Histidine and arginine modulate intestinal cell restitution via transforming growth factor-β1 (2019)
  • 著者名/発表者名: Matsui Tatsunobu、Ichikawa Hiroshi、Fujita Tomoka、Takemura Shigekazu、Takagi Tomohisa、Osada-Oka Mayuko、Minamiyama Yukiko
  • 雑誌名: European Journal of Pharmacology 巻: 850 ページ: 35～42
  • DOI: 10.1016/j.ejphar.2019.02.006
  • 査読あり
• [雑誌論文] Long-term outcomes after biliary diversion operation for pancreaticobiliary maljunction in adult patients (2019)
  • 著者名/発表者名: Aota Takanori、Kubo Shoji、Takemura Shigekazu、Tanaka Shogo、Amano Ryosuke、Kimura Kenjiro、Yamazoe Sadaaki、Shinkawa Hiroji、Ohira Go、Shibata Toshihiko、Horiike Masaki
  • 雑誌名: Annals of Gastroenterological Surgery 巻: 19 ページ: 217-223
  • DOI: 10.1002/ags3.12239
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] Indications for laparoscopic liver resection of mass‐forming intrahepatic cholangiocarcinoma (2019)
  • 著者名/発表者名: Kinoshita Masahiko、Kanazawa Akishige、Takemura Shigekazu、Tanaka Shogo、Kodai Shintaro、Shinkawa Hiroji、Shimizu Sadatoshi、Murata Akihiro、Nishio Kohei、Hamano Genya、Ito Tokuji、Tsukamoto Tadashi、Kubo Shoji
  • 雑誌名: Asian Journal of Endoscopic Surgery 巻: - ページ: -
  • DOI: 10.1111/ases.12703
  • 査読あり
• [雑誌論文] Perioperative allogenic blood transfusion is a poor prognostic factor after hepatocellular carcinoma surgery: a multi-center analysis (2018)
  • 著者名/発表者名: Wada Hiroshi、Eguchi Hidetoshi、Nagano Hiroaki、Kubo Shoji、Nakai Takuya、Kaibori Masaki、Hayashi Michihiro、Takemura Shigekazu、Tanaka Shogo、Nakata Yasuyuki、Matsui Kosuke、Ishizaki Morihiko、Hirokawa Fumitoshi、Komeda Koji、Uchiyama Kazuhisa、Kon Masanori、Doki Yuichiro、Mori Masaki
  • 雑誌名: Surgery Today 巻: 48 ページ: 73～79
  • DOI: 10.1007/s00595-017-1553-3
  • 査読あり
• [雑誌論文] Carbon monoxide-releasing molecule, CORM-3, modulates alveolar macrophage M1/M2 phenotype in vitro (2018)
  • 著者名/発表者名: Yamamoto-Oka Hiroko、Mizuguchi Shinjiro、Toda Michihito、Minamiyama Yukiko、Takemura Shigekazu、Shibata Toshihiko、Cepinskas Gediminas、Nishiyama Noritoshi
  • 雑誌名: Inflammopharmacology 巻: 26 ページ: 435～445
  • DOI: 10.1007/s10787-017-0371-y
  • 査読あり / 国際共著
• [雑誌論文] S-allyl-glutathione improves experimental liver fibrosis by regulating Kupffer cell activation in rats (2018)
  • 著者名/発表者名: Takemura Shigekazu、Azuma Hideki、Osada-Oka Mayuko、Kubo Shoji、Shibata Toshihiko、Minamiyama Yukiko
  • 雑誌名: American Journal of Physiology-Gastrointestinal and Liver Physiology 巻: 314 ページ: G150～G163
  • DOI: 10.1152/ajpgi.00023.2017
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] A phase I study for adjuvant chemotherapy of gemcitabine plus S-1 in patients with biliary tract cancer undergoing curative resection without major hepatectomy (KHBO1202) (2018)
  • 著者名/発表者名: Yanagimoto Hiroaki、Toyokawa Hideyoshi、Sakai Daisuke、Wada Hiroshi、Satoi Sohei、Yamamoto Tomohisa、Nagano Hiroaki、Toyoda Masanori、Ajiki Tetsuo、Satake Hironaga、Tsuji Akihito、Miyamoto Atsushi、Tsujie Masanori、Takemura Shigekazu、Yanagihara Kazuhiro、Ioka Tatsuya
  • 雑誌名: Cancer Chemotherapy and Pharmacology 巻: 81 ページ: 461～468
  • DOI: 10.1007/s00280-017-3513-4
  • 査読あり
• [雑誌論文] Stagnation of histopathological improvement is a predictor of hepatocellular carcinoma development after hepatitis C virus eradication (2018)
  • 著者名/発表者名: Motoyama Hiroyuki、Tamori Akihiro、Kubo Shoji、Uchida-Kobayashi Sawako、Takemura Shigekazu、Tanaka Shogo、Ohfuji Satoko、Teranishi Yuga、Kozuka Ritsuzo、Kawamura Etsushi、Hagihara Atsushi、Morikawa Hiroyasu、Enomoto Masaru、Murakami Yoshiki、Kawada Norifumi
  • 雑誌名: PLOS ONE 巻: 13 ページ: 0194163～0194163
  • DOI: 10.1371/journal.pone.0194163
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] Obesity and recurrence-free survival in patients with hepatocellular carcinoma after achieving sustained virological response to interferon therapy for chronic hepatitis C (2018)
  • 著者名/発表者名: Shinkawa Hiroji、Tanaka Shogo、Takemura Shigekazu、Ito Tokuji、Aota Takanori、Koda Masaki、Miyazaki Toru、Yamamoto Takatsugu、Kubo Shoji
  • 雑誌名: Annals of Gastroenterological Surgery 巻: 2 ページ: 319～326
  • DOI: 10.1002/ags3.12183
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] Pirfenidone suppresses polarization to M2 phenotype macrophages and the fibrogenic activity of rat lung fibroblasts (2018)
  • 著者名/発表者名: Toda Michihito、Mizuguchi Shinjiro、Minamiyama Yukiko、Yamamoto-Oka Hiroko、Aota Takanori、Kubo Shoji、Nishiyama Noritoshi、Shibata Toshihiko、Takemura Shigekazu
  • 雑誌名: Journal of Clinical Biochemistry and Nutrition 巻: 63 ページ: 58～65
  • DOI: 10.3164/jcbn.17-111
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] Long-Term Prognostic Factors after Hepatic Resection for Hepatitis C Virus-Related Hepatocellular Carcinoma, with a Special Reference to Viral Status (2018)
  • 著者名/発表者名: Koda Masaki、Tanaka Shogo、Takemura Shigekazu、Shinkawa Hiroji、Kinoshita Masahiko、Hamano Genya、Ito Tokuji、Kawada Norifumi、Shibata Toshihiko、Kubo Shoji
  • 雑誌名: Liver Cancer 巻: 7 ページ: 261～276
  • DOI: 10.1159/000486902
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] Operative outcomes after laparoscopic splenectomy with special reference to prophylactic antibiotics (2018)
  • 著者名/発表者名: Matsuda Tsunemi、Kubo Shoji、Ueno Masaki、Takifuji Katsunari、Yamaue Hiroki、Takemura Shigekazu、Tanaka Shogo、Shinkawa Hiroji、Yamada Koichi、Kakeya Hiroshi
  • 雑誌名: Asian Journal of Endoscopic Surgery 巻: - ページ: -
  • DOI: 10.1111/ases.12661
  • 査読あり
• [学会発表] Clinicopathological features and outcomes in patients with non-B, non-C hepatocellular carcinoma and hepatitis C-related hepatocellular carcinoma (2018)
  • 著者名/発表者名: Shinkawa H, Tanaka S, Takemura S, Ito T, Aota T, Koda M, Miyazaki T, Kubo S
  • 学会等名: The 30th Meeting of Japanese Society of Hepato-Biliary-Pancreatic Surgery
• [学会発表] Survival outcomes of non-B, non-C hepatocellular carcinoma with reference to hepatitis C-related hepatocellular carcinoma (2018)
  • 著者名/発表者名: Shinkawa H, Tanaka S, Takemura S, Ito T, Aota T, Koda M, Miyazaki T, Kubo S
  • 学会等名: 13th IHPBA World Congress
  • 国際学会
• [学会発表] Clinical features and surgical treatment outcome in HCC patients with tumor thrombus expanding to inferior vena cava or right atrium (2018)
  • 著者名/発表者名: Takemura S
  • 学会等名: The 8th Japan-Chaina Hepato-Pancreato-Biliary Symposium
  • 国際学会
• [学会発表] New criteria of hepatectomy for multiple hepatocellular carcinoma to be expected for long-term survival ―Multicenter collaborative research― (2018)
  • 著者名/発表者名: Iida H, Kaibori M, Hirokawa F, Inoue Y, Ueno M, Matsui K, Ishizaki M, Tanaka S, Takemura S, Nomi T, Hokutou D, Noda T, Eguchi H, Nakai T, Maehira H, Mori H, Tani M, Kubo S
  • 学会等名: Advances in Liver Surgery-Wakayama Medical University International Symposium in 2019
  • 国際学会
• [学会発表] 進行肝細胞癌に対する外科切除術後の予後の変遷と集学的治療の影響 (2018)
  • 著者名/発表者名: 竹村茂一，田中肖吾，新川寛二，伊藤得路，江田将樹，青田尚哲，宮崎 徹，久保正二
  • 学会等名: 第118回日本外科学会定期学術集会
• [学会発表] マクロファージ分極制御による臓器線維化治療薬の開発 －ラット肝線維化モデルにおけるS-アリルグルタチオンの効果－ (2018)
  • 著者名/発表者名: 竹村茂一，南山幸子，青田尚哲，戸田道仁，岡 真優子，小林慧子，宮本 光，久保正二
  • 学会等名: 第71回日本酸化ストレス学会学術集会
• [図書] 手術 (2019)
  • 著者名/発表者名: 竹村茂一、久保正二
  • 総ページ数: 11
  • 出版者: 金原出版株式会社
• [図書] 臨床消化器内科 (2018)
  • 著者名/発表者名: 久保正二、竹村茂一、田中肖吾、新川寛二
  • 総ページ数: 6
  • 出版者: (株)日本メディカルセンター