| 研究課題/領域番号 |
18K08676
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| 研究機関 | 滋賀医科大学 |
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研究代表者 |
三宅 亨 滋賀医科大学, 医学部, 講師 (70581924)
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| 研究分担者 |
谷 眞至 滋賀医科大学, 医学部, 教授 (60236677)
生田 大二 滋賀医科大学, 医学部, 客員助教 (00581935)
徳田 彩 滋賀医科大学, 医学部, 医員 (80814392)
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| 研究期間 (年度) |
2018-04-01 – 2021-03-31
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| キーワード | Claudin / 大腸癌 |
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| 研究実績の概要 |
Claudinは接着因子であり、細胞間結合に重要な役割を果たす。本研究では癌リンパ節転移におけるClaudinの機能解析をおこなった。 マウス大腸癌細胞株 であるCT26を用いて、Claudin9の強制発現株を作成した。Claudin9の発現が上昇していることをqPCRで確認し、強制発現株ではCT26の親株と比較して約5000倍の mRNAの発現の上昇があることを確認した。また、western blottingを用いて、CT26でのClaudin9強制発現株においてClaudin9蛋白が高発現であることを確認し た。次に、Claudin9の強制発現細胞株と親株であるCT26を用いて細胞増殖についてCCK-8を用いて検討した。CT26とClaudin9の強制発現細胞株では細胞増殖に有意な差を認めなかった。これより、in vitroにおいてはClaudin9はCT26の細胞増殖には影響しないと考えられた。 確立した遺伝子改変細胞株をマウスへ静脈注射にて移植を行い、肺転移腫瘍の面積で検討すると肺転移がClaudin9高発現細胞株で増加していた。また、肺の重量 も増加しており、肺転移の増加と矛盾しない結果であると考えられた。また、肺組織 からRNAを抽出し、マイクロアレイにて発現を検討した結果、IFNの低下を認め、免疫が抑制されている可能性が示唆された。 また、臨床検体を用いて大腸癌の原発巣におけるClaudin9の発現について検討を行った。薄切スライドを作成し、免疫染色を行い、生存率で差を認めた。
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