CAGE発現解析を用いた大腸がん肺転移予測マーカーの特定

2018 年度 実施状況報告書

• 研究課題/領域番号: 18K08798
• 研究機関: 順天堂大学
• 研究代表者: 柳沼 行宏 順天堂大学, 医学部, 非常勤講師 (60338415)
• 研究分担者: 小見山 博光 順天堂大学, 医学部, 非常勤講師 (30348982) ; 茂櫛 薫 順天堂大学, 医学(系)研究科(研究院), 非常勤講師 (60569292)
• 研究期間 (年度): 2018-04-01 – 2021-03-31
• キーワード: 大腸がん / 肺転移 / CAGE法 / 腫瘍マーカー

研究実績の概要

我々はこれまで大腸癌をはじめとする癌の鋭敏な新規マーカー開発，分子標的治療の可能性を探り研究を進めてきた．とくに大腸癌では転移はリンパ節のほか，肝，肺に多く見られるが，現在は転移巣に対しても積極的治療が選択される．転移においても早期発見，早期治療は大腸癌患者の平均余命を向上させると考えられている．しかし現状では転移を検出するための「転移マーカー」は存在しない．そのため一様に抗癌剤投与を施すのが現状である．このような事情から，転移を予測可能な，あるいは早期に発見するために有効な「転移マーカー」の開発が今後の大腸癌治療の進歩をもたらすものと考えられる．
我々は，先に述べたCAGE法の適用により，遺伝子の発現を転移有り，無しの2群の症例からのサンプル間で比較解析し，転移特異的な遺伝子を特定することで今までに指摘されることのなかった新たな診断マーカーの開発を行うとの着想に至った．
本研究はCAGE法（Cap Analysis of Gene Expression）によって抽出した候補遺伝子群から，大腸がんの肺転移マーカーを特定することを主目的とする．本研究では癌部と採血検体も用い、発現を検証する.また患者の追跡により, 採血検体で特定したマーカーレベルによる術後肺転移の予測も目指していく．以上，本研究では大腸癌の肺転移を予測できうるマーカーを取得を目指す. 現状では評価できない肺転移リスク，また初期の肺転移を，診断可能にすることまでを目的とする。

現在までの達成度 (区分)

2: おおむね順調に進展している

理由

大腸がん肺転移を引き起こす原因遺伝子を突き止め，大腸癌の肺転移マーカーを新たに開発することを目標とする．本研究では，CAGE法というRNA転写開始点と遺伝子発現を同時に同定する方法で同定した18万のヒト転写開始点を用いる．すでに患者から採取し保管してあるサンプルを用い、肺転移を起こした大腸がん原発巣の転移有り群と転移無し群の遺伝子をCAGE法で比較解析する。その後に転移巣の解析を行うことによって，肺転移マーカー候補を選別し肺転移マーカーを特定する．

今後の研究の推進方策

特定した複数のマーカー候補遺伝子群について、患者の臨床データを解析することによって、さらに絞り込みを行う。さらに、臨床検体の追加解析を行い、腫瘍部よりRNAを抽出し、CAGEによる再解析を行う予定である。

次年度使用額が生じた理由

本年度購入予定であったフリーザーの購入を研究棟の移転による設置場所の事情等で見送った事による．また，試薬の購入も欠品などが有り，一部次年度に購入することとなった．さらにデーター解析について、今年度はアルバイトを雇用することなく、
研究代表者・分担者にて進めたため、人件費が発生しなかったことなどから、次年度使用額が生じた。これは31年度研究における試薬・器具などの購入に当てる．また解析を要するデーター量，また実験操作で要する作業量が増えてきており，研究の潤滑な推進のために，アルバイトの雇用を検討している．

研究成果

• [雑誌論文] Mitochondrial ribosomal protein PTCD3 mutations cause oxidative phosphorylation defects with Leigh syndrome. (2019)
  • 著者名/発表者名: Borna NN, Kishita Y, Kohda M, Lim SC, Shimura M, Wu Y, Mogushi K, Yatsuka Y, Harashima H, Okazaki Y. et al
  • 雑誌名: Neurogenetics 巻: 20(1) ページ: 9-25
  • DOI: 10.1007/s10048-018-0561-9
  • 査読あり
• [雑誌論文] Comprehensive molecular and immunological characterization of hepatocellular carcinoma. (2019)
  • 著者名/発表者名: Shimada S, Mogushi K, Akiyama Y, Furuyama T, Watanabe S, Ogura T, Ogawa K, Ono H, Mitsunori Y, Ban D, Kudo A, Arii S, Tanaka S., et al.
  • 雑誌名: EBioMedicine 巻: 40 ページ: 457-470
  • DOI: 10.1016/j.ebiom.2018.12.058
  • 査読あり
• [雑誌論文] Identification of genes and pathways, including the CXCL2 axis, altered by DNA methylation in hepatocellular carcinoma. (2019)
  • 著者名/発表者名: Subat S, Mogushi K, Yasen M, Kohda T, Ishikawa Y, Tanaka H.
  • 雑誌名: Journal of cancer research and clinical oncology 巻: 145(3) ページ: 675-684
  • DOI: 10.1007/s00432-018-2824-0
  • 査読あり / 国際共著
• [雑誌論文] Pharmacological targeting of neutrophil serine proteases prevents lethality in dextran sulfate sodium (DSS)-induced colitis in mice. (2018)
  • 著者名/発表者名: Ro H, Munakata S, Ueyama T, Komiyama H, Takahashi M, Kojima Y, Tomiki Y, Sakamoto K.
  • 雑誌名: J Gastrointest Dig Syst 巻: 8(1) ページ: 1-6
  • DOI: 10.4172/2161-069X.1000551
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] High-sensitivity detection of micrometastases generated by GFP lentivirus-transduced organoids cultured from a patient-derived colon tumor. (2018)
  • 著者名/発表者名: OkazawaY, Mizukoshi K, KoyamaY, Okubo S, Komiyama H, Kojima Y, Goto M, Habu S, Hino O, Sakamoto K, Orimo A.
  • 雑誌名: J Vis Exp 巻: 136(e57374) ページ: -
  • DOI: 10.3791/57374
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] COQ2 variants in Parkinson's disease and multiple system atrophy. (2018)
  • 著者名/発表者名: Mikasa M, Kanai K, Li Y, Yoshino H, Mogushi K, Hayashida A, Ikeda A, Kawajiri S, Okuma Y, Kashihara K, Sato T, Kondo H, Funayama M, Nishioka K, Hattori N.
  • 雑誌名: Journal of Neural Transmission 巻: 125(6) ページ: 938-944
  • DOI: 10.1007/s00702-018-1885-1
  • 査読あり
• [雑誌論文] Elucidation of inhibitory effects on metastatic sentinel lymph nodes of breast cancer during One-Step Nucleic Acid Amplification. (2018)
  • 著者名/発表者名: Horimoto Y, Tanabe M, Kazuno S, Miura Y, Mogushi K, Sonoue H, Arakawa A, Kajino K, Kobayashi T, Saito M.
  • 雑誌名: Scientific Reports 巻: 8(1):7563 ページ: -K:AG
  • DOI: 10.1038/s41598-018-25911-w
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] Fatty Acid Binding Protein 4 (FABP4) Overexpression in Intratumoral Hepatic Stellate Cells within Hepatocellular Carcinoma with Metabolic Risk Factors. (2018)
  • 著者名/発表者名: Chiyonobu N, Shimada S, Akiyama Y, Mogushi K, Itoh M, Akahoshi K, Matsumura S, Ogawa K, Ono H, Mitsunori Y, Ban D, Kudo A, Arii S, Suganami T, Yamaoka S, Ogawa Y, Tanabe M, Tanaka S.
  • 雑誌名: Am J Pathol 巻: 188(5) ページ: 1213-1224.
  • DOI: 10.1016/j.ajpath.2018.01.012
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] Non-small cell lung carcinoma with diffuse co-expression of thyroid transcription factor-1 and ΔNp63/p40. (2018)
  • 著者名/発表者名: Hayashi T, Takamochi K, Yanai Y, Mitani K, Tomita H, Mogushi K, Suehara Y, Takahashi F, Suzuki K, Saito T, Yao T.
  • 雑誌名: Hum Pathol 巻: 78 ページ: 177-181
  • DOI: 10.1016/j.humpath.2018.01.023
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] Tumor sidedness and enriched gene groups for efficacy of first-line cetuximab treatment in metastatic colorectal cancer. (2018)
  • 著者名/発表者名: Sunakawa Y, Mogushi K, Lenz HJ, Zhang W, Tsuji A, Takahashi T, Denda T, Shimada K, Kochi M, Nakamura M, Kotaka M, Ichikawa W. et al
  • 雑誌名: Molecular Cancer Therapeutics 巻: 17(12) ページ: 2788-2795
  • DOI: 10.1158/1535-7163
  • 査読あり / 国際共著
• [雑誌論文] Tumor suppressor functions of DAXX through histone H3.3/H3K9me3 pathway in pancreatic NETs. (2018)
  • 著者名/発表者名: Ueda H, Akiyama Y, Shimada S, Mogushi K, Serizawa M, Matsumura S, Mitsunori Y, Aihara A, Ban D, Ochiai T, Kudo A, Tanabe M, Tanaka S.
  • 雑誌名: Endocrine-Related Cancer 巻: 25(6) ページ: 619-631
  • DOI: 10.1530/ERC-17-0328
  • 査読あり
• [雑誌論文] KCTD12 is negatively regulated by Kit in gastrointestinal stromal tumors. (2018)
  • 著者名/発表者名: Suehara Y, Akaike K, Mukaihara K, Kurisaki-Arakawa A, Kubota D, Okubo T, Mitomi H, Mitani K, Takahashi M, et al.
  • 雑誌名: Oncotarget 巻: 9(43) ページ: 27016-27026
  • DOI: 10.18632/oncotarget.25469
  • 査読あり
• [雑誌論文] GCH1 mutations in dopa-responsive dystonia and Parkinson's disease. (2018)
  • 著者名/発表者名: Yoshino H, Nishioka K, Li Y, Oji Y, Oyama G, Hatano T, Machida Y, Shimo Y, Hayashida A, Ikeda A, Mogushi K,, Hattori N et al..
  • 雑誌名: Journal of Neurology 巻: 265(8) ページ: 1860-1870
  • DOI: 10.1007/s00415-018-8930-8
  • 査読あり
• [雑誌論文] Clinical features of squamous cell lung cancer with anaplastic lymphoma kinase (ALK)-rearrangement: a retrospective analysis and review. (2018)
  • 著者名/発表者名: Watanabe J, Togo S, Sumiyoshi I, Namba Y, Suina K, Mizuno T, Kadoya K, Motomura H, Iwai M, Nagaoka T, Sasaki S, Hayashi T, Uekusa T, Abe K, Urata Y, Sakurai F, Mizuguchi H, Kato S, Takahashi K.
  • 雑誌名: Oncotarget 巻: 9(35) ページ: 24000-24013
  • DOI: 10.18632/oncotarget.25257
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] Correction: Radiotherapy increases plasma levels of tumoral cell-free DNA in non-small cell lung cancer patients. (2018)
  • 著者名/発表者名: Kageyama SI, Nihei K, Karasawa K, Sawada T, Koizumi F, Yamaguchi S, Kato S, Hojo H, Motegi A, Tsuchihara K, Akimoto T.
  • 雑誌名: Oncotarget 巻: 9(34) ページ: 23844
  • DOI: 10.18632/oncotarget.25378
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] Intermittent Withdrawal of Oxaliplatin for Alleviating Neurotoxicity during Oxaliplatin-Based Chemotherapy for Japanese Patients with Inoperable or Metastatic Colorectal Cancer: A Phase 2 Multicenter Study. (2018)
  • 著者名/発表者名: Kato S, Imai H, Gamoh M, Takahata T, Ohori H, Yasuda K, Niitani T, Murakawa Y, Amagai K, Isobe H, Shindo Y, Kuroki M, Sakamoto Y, Shimodaira H, Yoshioka T, Ishioka C.
  • 雑誌名: The Tohoku Journal of Experimental Medicine 巻: 245(1) ページ: 21-28
  • DOI: 10.1620/tjem.245.21
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] Radiotherapy increases plasma levels of tumoral cell-free DNA in non-small cell lung cancer patients. (2018)
  • 著者名/発表者名: Kageyama SI, Nihei K, Karasawa K, Sawada T, Koizumi F, Yamaguchi S, Kato S, Hojo H, Motegi A, Tsuchihara K, Akimoto T.
  • 雑誌名: Oncotarget 巻: 9(27) ページ: 19368-19378
  • DOI: 10.18632/oncotarget.25053
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] 四次治療のトラベクテジン投与にて長期の無増悪生存期間が得られている平滑筋肉腫再発の1症例 (2018)
  • 著者名/発表者名: 野崎 由美, 山口 茂夫, 高木 辰哉, 加藤 俊介
  • 雑誌名: 癌と化学療法 巻: 46巻2号 ページ: 275-277
  • 査読あり
• [備考] 順天堂大学大学院 下部消化管外科学
  • URL: https://www.juntendo.ac.jp/graduate/laboratory/labo/kabusyoukakan/