| 研究実績の概要 |
液滴接触二重膜法（Contact Babble Bilayer法；CBB法）を用いて、KcsAカリウムチャネル機能計測方法を確立することを試みた。スライドグラスに油相としてヘキサデカン(100ul)を満たす。油相にはあらかじめリン脂質（アゾレクチン）を分散させた。ガラス電極（ピペット）に電解質溶液を満たし、先端を油相に入れ、圧力をかけてバブルを吹き出す。KcsAカリウムチャネルは酸性のpHで開口する性質を利用して、片側のバブルはｐH7.5（200mM KCL,10mM Hepes,pH7.5）に調節し、反対側のバブルはpH4.0（200mM KCL,10mM こはく酸,pH4.0）に調節した。こうすることでチャネルの向きをそろえることができる。KcsAの濃度は、チャネルが約10個程度入るくらいの濃度で行った。２つのバブルを接触させて脂質二重層を形成することに成功できた。KcsAカリウムチャネルの変異体であるE71Aを用いてチャネルの電流計測を試みている。開確率はほぼ100%であった。その状態に、さらに細いピペットを作成し、バブルの中央（脂質二重膜部分）に置き、ヘキサデカン（コントロール）が入ったピペットで吹きかけを試みた。
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