| 研究実績の概要 |
本研究は,膝OAにおける滑膜に発現するプロテオグリカンであるパールカンの機能の詳細および軟骨下骨や骨棘病変との関連を分子レベルで解明し, 膝OAの滑膜炎を制御しうる分子を探索することを目的とする. 膝OAマウスモデルを用いて,下記実験を計画した. ①パールカンの発現の有無による滑膜の炎症性メディエーターの発現の違いの検出.②炎症性メディエーターと軟骨下骨及び骨棘の変化を評価. ③軟骨下骨及び骨棘の変化に寄与する炎症性メディエーターとパールカンの機能解析.④標的分子による膝OAの治療効果の検討.
2020年度までに,膝OAモデルを作成したマウスにおいて, 滑膜パールカンが欠損すると組織学的滑膜炎がコントロールに比べ強く,TNFα, TGFβ, CCL21, VEGF,CD31, CD68およびCCR7の発現が上昇することを示した. さらに, 滑膜パールカン欠損マウスおよびコントロールマウスより採取した滑膜をTGFβで刺激しウエスタンブロット法で解析すると, パールカン欠損滑膜では, 下流シグナルであるp-Smad2/3の発現が低下していたが, パールカンを添加することにより濃度依存性にp-Smad2/3は回復することを示した. 同様にTGFβで刺激したパールカン欠損滑膜ではSmad非依存性のp-p38の発現が低下し, パールカンを添加することにより濃度依存性にp-Smad2/3は回復することを示し, 滑膜炎にかかわるTGFβの2つの下流シグナルに変化があった.
2021年は, 膝OAモデルの初期段階を追加評価し, 膝OA早期において, 滑膜パールカン欠損マウスは滑膜炎が強い一方, 軟骨下骨の膝OA変化はコントロールマウスに比べて少ないことを示した.
今後は, 膝OA滑膜のTGFβ刺激による下流シグナルのさらに詳しい解析に加え, 滑膜炎の制御と膝OAの変化について解析する.
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| 現在までの達成度 (区分) |
現在までの達成度 (区分)
3: やや遅れている
理由
新型コロナウイルス(COVID-19)の蔓延およびマウス飼育室改修の準備により, 実験室の利用制限, 継続したマウスの飼育が不可になったこと, COVID-19の医療への参画により, 継続した実験の遂行が制限されたことによる. そのため, 実験の継続性が失われ, 1つの結果を出すのに時間を要し実験が遅延した.
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| 今後の研究の推進方策 |
膝OAにおける滑膜に発現するプロテオグリカンであるパールカンの機能の詳細および軟骨下骨および骨棘病変との関連を分子レベルで解明し, 膝OAの滑膜炎をはじめとする病態を制御しうる分子を探索することを目的とし, 昨年の結果にもとづき,膝OA滑膜のTGFβ刺激による下流シグナルのさらに詳しい解析に加え, 滑膜炎の制御と膝OAの治療方法について解析する. さらに, 他の炎症性メディエーターの膝OAへの役割や効果についても検討を行う.
すでに, 実験は順調に経過しており, 論文執筆及び成果報告を行う.
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| 次年度使用額が生じた理由 |
2021年度は, 2020年度と同様にCOVID-19の蔓延により, 実験室の利用制限, 継続したマウスの飼育が不可になったこと, COVID-19の医療への参画により, 継続した実験の遂行が制限された. そのため, 実験の継続性が失われ, 1つの結果を出すのに時間を要した.そのためマウスを用いた治療効果の実験部分において大きな遅延を要した. しかしながら, 2020年度のCOVID-19により混乱していた時期に比べ, 実験の成果はでている. よって, 2022年度にも実験の継続を申請する運びとなったが,実験成果の公表の準備を行っていく. 予算は, 2021年度の予定学会の中止やWeb開催のため繰り越しが生じた. 2022年度は,本研究の成果公表のために繰り越し予算を使用予定である.
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