| 研究実績の概要 |
多血小板血漿（Platelet Rich Plasma: PRP）を凍結乾燥し作成した凍結乾燥（freeze-dried:fd）PRPについて，前年度の内容を踏まえ，生理活性を分子生物学的に定量計測し，長期保存後の薬理活性についてin vitro, in vivoで評価した．PRPでは、PDGFは24.1±8.3 ng/mLに対し、52週常温保存したfdPRPでは20.2±11.9 ng/mLだった。TGFβ1はPRPで552.3±459.8 ng/mLに対して、493.6±311.5 ng/mLだった。52週常温保存後もfdPRPはPRPとほぼ同様の成長因子のタンパク濃度が保たれていた. 1x106個のosteoblastsをPRPと52週常温保存したdfPRPで刺激し，対照群と比較して最大1.8倍の増殖が見られた．両方でplatelet-derived growth factor receptor (PDGFR), その下流に存在するextracellular signal-regulated kinase (ERK)のリン酸化 活性化がwestern blottingで確認された.リン酸化の程度には両群に有意差は認められなかった.各濃度で骨芽細胞PDGFRのノックダウンにより新鮮PRPとfdPRPの両群で下流ERK活性化が減衰した．8週令のSDラット用いて骨移植した実験では、骨新生した領域全体でみると自家骨移植群ではPRP, df-PRP群より高かった.新生した骨梁の数はPRP, fd-PRP群では自家骨移植群より高くなっていた。凍結乾燥多血小板血漿は作製後1年までの効化は確認できた。更に長期経過を検討する必要があるとともにiPSを用いたユニバーサルタイプのfd-PRPの検討が必要である。
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