| 今後の研究の推進方策 |
骨欠損モデルにおいてMR画像を撮像し、多裂筋と腸腰筋の評価を行う。筋面積から筋萎縮を、筋内輝度変化か ら脂肪変性の程度を検討する。
ラット骨髄細胞にM-CSFとRANKLを作用させることで破骨細胞を分化誘導する。筋芽細胞はマウスあるいはラット骨格筋筋芽細胞株を用いる。コントロールとしてマウスあるいはラット線維芽細胞株を用いることとする。定常酸素濃度に加え、酸素濃度1.5%の低酸素環境下でも同様に検討する。また、適宜HG F投与下において評価を行う。
MTTassayを用い、それぞれの細胞のviabilityを評価する。HGF/c-Metシグナル関連因子( HGF,c-Met, ERK,Akt,STAT)の発現は Real time PCR 法およびWestern Blotting法を用いて評価する。破骨細胞分化はTRAP染色 を用い、骨芽細胞分化はALP活性で評価する。また、骨代謝マーカー(OCN,OPG,RANK,RANKL,PICP,PINP)についてもReal time PCR 法およびELISAで評価する。
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