| 研究課題/領域番号 |
18K09285
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| 研究機関 | 信州大学 |
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研究代表者 |
宮本 強 信州大学, 学術研究院医学系, 准教授 (70418721)
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| 研究分担者 |
竹内 穂高 信州大学, 医学部附属病院, 助教(診療) (30816351)
鹿島 大靖 信州大学, 学術研究院医学系(医学部附属病院), 講師 (70464089) [辞退]
山田 靖 信州大学, 学術研究院医学系(医学部附属病院), 助教 (60646652)
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| 研究期間 (年度) |
2018-04-01 – 2021-03-31
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| キーワード | Lipocalin2 / 癌幹細胞性 / 抗がん剤耐性 / 酸化ストレス耐性 / Sphere形成能 |
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| 研究実績の概要 |
我々はこれまで、子宮内膜癌（EMC）や卵巣明細胞癌（OCCC）でLCN2発現が亢進し、これらの癌の悪性度上昇や抗癌剤耐性に関与することを報告してきた。また、LCN2発現抑制によりCD44v9やCD133といった癌幹細胞マーカー発現が低下することも見出し、LCN2は癌幹細胞性維持に作用している可能性が考えられる。これを検証するため、本研究ではEMC細胞、OCCC細胞において、LCN2による癌幹細胞性への影響、およびその分子機構を解明することを目的とする。癌幹細胞で亢進する酸化ストレス耐性を検討した。子宮内膜癌細胞株HHUA、RL95-2においてshRNAによるLCN2発現抑制（LCN2-shRNA）により細胞内の抗酸化物質グルタチオン（GSH）濃度は低下し、合成LCN2（sLCN2）添加もしくはLCN2発現細胞のconditioned mediumでの培養によりGSH濃度は上昇した。また幹細胞性の指標として、HHUA細胞において軟寒天培地上の足場非依存性増殖コロニー数は、LCN2-shRNAで有意に低下し、sLCN2添加により回復した。またSphere formation assayでも、LCN2-shRNAによりsphere数の減少が認められ、さらにsLCN2添加により、sphere数が一部回復した。また、HHUAでのmicroarrayによる網羅的遺伝子発現解析では、シスプラチン添加12時間後での遺伝子発現変化はLCN2発現状況により差が認められ、Control細胞でのみ発現変化を認める遺伝子が67個、LCN2-shRNA細胞でのみ発現変化を認める遺伝子が52個認められ、これらの中には薬剤耐性に関連する遺伝子も含まれていた。一方、mRNAレベルでのOCT4やKLF4、MYCなどの幹細胞マーカー遺伝子発現変化に差は認められなかった。
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