薬剤感受性およびゲノム異常に基づいた難治性卵巣癌個別化治療戦略の確立

2019 年度 実施状況報告書

• 研究課題/領域番号: 18K09298
• 研究機関: 慶應義塾大学
• 研究代表者: 冨永 英一郎 慶應義塾大学, 医学部(信濃町), 講師 (80276328)
• 研究分担者: 角田 達彦 東京医科歯科大学, 難治疾患研究所, 教授 (10273468) ; 平沢 晃 岡山大学, 医歯薬学総合研究科, 教授 (90296658)
• 研究期間 (年度): 2018-04-01 – 2021-03-31
• キーワード: 薬剤感受性 / 卵巣癌

研究実績の概要

卵巣癌の初回化学療法はプラチナ製剤が主体であるが初回治療終了後から６カ月以内の再発はプラチナ製剤抵抗性と判定される。化学療法抵抗性の難治性卵巣癌症例はセカンドライン以降の薬剤が乏しいうえ、完治が難しいという理由から緩和医療やQOLの向上および生存期間の延長を目的とする治療がなされているのが現状である。そこで本研究は難治性卵巣癌の癌性腹水からゲノム解析を実施し、得られたデーターから患者個人に適合した薬剤感受性試験を行うことで難治性卵巣癌に対して奏功性の高い個別化治療法へと発展させることを目指している。検討内容として癌性腹水を集細胞法にて分離した腫瘍細胞検体を次世代シークエンサー解析し再発に関連するドライバージーンを検出。ドライバージーンに適した既存薬剤の薬剤感受性試験(DSRT)を行い化学療法薬剤の奏効性を確認する。解析結果は実臨床への妥当性を各専門分野の意見により判断することを予定している。
そこで本年度はDSRTの基礎的検討を中心に研究を実施した。すでに実臨床にて使用されている既存の36種の化学療法薬のDSRTを卵巣癌由来の培養細胞株を使用し2次元平面 (2D)培養および3次元立体培養(3D)の2系列を行って比較した。培養細胞を96wellplateに播種した時点をDay0とし、Day１に薬剤を添加、Day3にATPアッセイにて吸光度を測定しDSRTはIC50値を基準にして細胞増殖能を比較した。その結果、2D培養は3D培養に比較して薬剤の奏功性が高い傾向にあった。次に卵巣癌発症例より患者同意の元で採取された患者腹水を用い同様の比較を行った。検討の結果、3D培養下のIC50値は2D培養に比較し腹水検体採取時の化学療法奏功性を正確に反映した。これらの結果から3次元培養条件の薬剤感受性試験は患者検体採取時の化学療法奏功性を反映した結果が得られている可能性が高いと考えられた。

現在までの達成度 (区分)

2: おおむね順調に進展している

理由

培養条件の違いによる薬剤感受性試験の奏効の違いについて解明した。また、患者腹水を用いた検討のなかで、希少疾患である悪性腹膜中皮腫症例より樹立細胞株を確立し、論文とする成果を挙げた。

今後の研究の推進方策

現在までに実施している培養条件下で得られた結果を実際の臨床検体を用いた薬剤感受性試験へと応用する。さらに現行法の三次元培養法に加えて、生体外臓器であるオルガノイドの作成により臨床状態を反映した解析を追加して検討する予定である。

次年度使用額が生じた理由

（次年度使用額が生じた理由）次世代シークエンサーが設置されている解析室が閉鎖され解析中止状態となっており解析に掛かる費用や試薬の購入を保留しているため次年度使用額が生じた。
（次年度使用計画）解析保留としている次世代シークエンサー解析用のmulti-gene panelの購入を主体に解析に必要な消耗品および試薬類の購入を予定している。

研究成果

• [雑誌論文] LAMC1 is a prognostic factor and a potential therapeutic target in endometrial cancer (2020)
  • 著者名/発表者名: Kunitomi Haruko, Kobayashi Yusuke, Wu Ren-Chin, Takeda Takashi, Tominaga Eiichiro, Banno Kouji, Aoki Daisuke.
  • 雑誌名: Journal of Gynecologic Oncology 巻: 31 ページ: -
  • DOI: 10.3802/jgo.2020.31.e11
  • 査読あり / オープンアクセス / 国際共著
• [雑誌論文] Establishment and Characterization of a New Malignant Peritoneal Mesothelioma Cell Line, KOG-1, From the Ascitic Fluid of a Patient With Pemetrexed Chemotherapy Resistance (2020)
  • 著者名/発表者名: Akahane Tomoko, Hirasawa Akira, Imoto Issei, Okubo Aki, Itoh Manabu, Nanki Yoshiko, Yoshihama Tomoko, Tominaga Eichiro, Aoki Daisuke.
  • 雑誌名: Hum Cell 巻: 33 ページ: 272-282
  • DOI: 10.1007/s13577-019-00286-w
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] Mutations of RAS genes in endometrial polyps (2019)
  • 著者名/発表者名: Takeda Takashi, Banno Kouji, Kobayashi Yusuke, Adachi Masataka, Yanokura Megumi, Tominaga Eiichiro, Kosaki Kenjiro, Aoki Daisuke.
  • 雑誌名: Oncology Reports 巻: 42 ページ: 2303-2308
  • DOI: 10.3892/or.2019.7353
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] Is antidyslipidemic statin use for cancer prevention a promising drug repositioning approach? (2019)
  • 著者名/発表者名: Kobayashi Yusuke, Banno Kouji, Kunitomi Haruko, Nagai Shimpei, Takahashi Takayuki, Anko Mayuka, Iijima Moito, Takeda Takashi, Matoba Yusuke, Nakamura Kanako, Tsuji Kosuke, Tominaga Eiichiro, Aoki Daisuke.
  • 雑誌名: European Journal of Cancer Prevention 巻: 28 ページ: 562-567
  • DOI: 10.1097/CEJ.0000000000000497
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] Upregulation of IGF2R evades lysosomal dysfunction-induced apoptosis of cervical cancer cells via transport of cathepsins (2019)
  • 著者名/発表者名: Takeda Takashi, Komatsu Masayuki, Chiwaki Fumiko, Komatsuzaki Rie, Nakamura Kanako, Tsuji Kosuke, Kobayashi Yusuke, Tominaga Eiichiro, Ono Masaya, Banno Kouji, Aoki Daisuke, Sasaki Hiroki.
  • 雑誌名: Cell Death & Disease 巻: 10(876) ページ: 1-17
  • DOI: 10.1038/s41419-019-2117-9
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] Hysteroscopic Photodynamic Diagnosis Using 5-Aminolevulinic Acid: A High-Sensitivity Diagnostic Method for Uterine Endometrial Malignant Diseases (2019)
  • 著者名/発表者名: Matoba Yusuke, Banno Kouji, Kisu Iori, Kobayashi Yusuke, Tsuji Kosuke, Nagai Shimpei, Yamagami Wataru, Nakamura Masaru, Tominaga Eiichiro, Kawaida Miho, Aoki Daisuke.
  • 雑誌名: Journal of Minimally Invasive Gynecology 巻: Aug 12:S1553-4650(19) ページ: 30372-30373
  • DOI: 10.1016/j.jmig.2019.08.012
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] Profiling of the Causative Bacteria in Infected Lymphocysts after Lymphadenectomy for Gynecologic Cancer by Pyrosequencing the 16S Ribosomal RNA Gene Using Next-Generation Sequencing Technology (2019)
  • 著者名/発表者名: Nogami Yuya, Banno Kouji, Adachi Masataka, Kunitomi Haruko, Kobayashi Yusuke, Tominaga Eiichiro, Aoki Daisuke.
  • 雑誌名: Infectious Diseases in Obstetrics and Gynecology 巻: 2019 ページ: 1-5
  • DOI: 10.1155/2019/9326285
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] Laparoscopic Surgery for Ovarian Cyst Infection with Avoidance of Ureteral Injury and Uterine Perforation following Intrauterine Insemination after Abdominal Modified Radical Trachelectomy (2019)
  • 著者名/発表者名: Iijima Moito, Hayashi Shigenori, Kobayashi Yusuke, Tsuji Kosuke, Tominaga Eiichiro, Banno Kouji, Aoki Daisuke.
  • 雑誌名: Case Reports in Obstetrics and Gynecology 巻: 2019 ページ: 1-4
  • DOI: 10.1155/2019/8607417
  • 査読あり / オープンアクセス
• [学会発表] Insulin like growth factor 2 receptor is a novel prognostic biomarker and behaves as an oncogene in cervical cancer through escape from Golgi-centered catastrophe (2019)
  • 著者名/発表者名: Takeda T,Komatsu M,Banno K,Tsuji K,Kobayashi Y,Tominaga E,Sasaki H,Tanaka M,Aoki D
  • 学会等名: 第71回 日本産科婦人科学会学術講演会
• [学会発表] Evaluation of preoperative diagnosis of uterine sarcoma (2019)
  • 著者名/発表者名: Tsuji K,Kobayashi Y,Banno K,Nagai S,Anko M,Takahashi T,Takeda T,Iida M,Yamagami W,Tominaga E,Tanaka M,Aoki D
  • 学会等名: 第71回 日本産科婦人科学会学術講演会
• [学会発表] Postirradiation PD-L1 expression and low tumor-infiltrating CD8+ cytotoxic lymphocytes are predictors of an improved prognosis after carbon ion radiotherapy for uterine cervical adenocarcinoma (2019)
  • 著者名/発表者名: Iijima M,Okonogi N,Banno K,Tsuji K,Kobayashi Y,Tominaga E,Hasegawa S,Tanaka M,Aoki D
  • 学会等名: 第71回 日本産科婦人科学会学術講演会
• [学会発表] 子宮頸がんに対する治療戦略構築のための新規予後相関バイオマーカーの探索 (2019)
  • 著者名/発表者名: 竹田 貴,中村加奈子,小松将之,千脇史子,辻 浩介,小林佑介,冨永英一郎,阪埜浩司,佐々木博己,青木大輔
  • 学会等名: 第7回 婦人科がんバイオマーカー研究会学術集会