| 研究課題/領域番号 |
18K09387
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| 研究機関 | 順天堂大学 |
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研究代表者 |
飯塚 崇 順天堂大学, 医学部, 非常勤助教 (40372932)
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| 研究分担者 |
神谷 和作 順天堂大学, 医学部, 准教授 (10374159)
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| 研究期間 (年度) |
2018-04-01 – 2023-03-31
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| キーワード | 遺伝子治療 |
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| 研究実績の概要 |
遺伝性難聴は1600出生に一人と高頻度に発生するが、その根本的治療法はなく次世代の治療法開発が期待されている。遺伝性難聴の原因遺伝子として世界中で圧倒的に検出頻度が高いのがギャップ結合タンパク質Connexin (CX) 26をコードするGJB2遺伝子である。CX26は蝸牛ギャップ結合の主要構成要素として蝸牛リンパ液のイオン組成を高電位に維持することで音の振動から神経活動への変換を可能としている。
申請者はアデノ随伴ウィルス（AAV）ベクターを用いたCX26欠損マウス内耳への遺伝子治療実験により、CX26欠損マウスにおける高度難聴を優位に回復させることに初めて成功した。しかし、この実験において聴力回復に成功したマウスは生後0日齢であり、ヒトの内耳では胎生期に相当する。当時の方法による遺伝子治療法では成熟マウスの聴力回復には至らなかった。本研究ではベクター投与法を改良することによりヒト臨床応用への対象として現実的である成熟マウスでの聴力回復を実現させる新たな遺伝子導入法の開発を目指す。
本年度はAAVの蝸牛ギャップ結合形成細胞への最適血清型を同定するため各種AAV血清型にGJB2遺伝子を搭載したベクターを作成した。これらにより３種類の血清型が標的細胞に効率的遺伝導入を示すことが明らかとなった。これらの血清型の配列からカプシド領域の改変を進め、改良型のAAVベクターを開発した。蝸牛器官培養において、従来型血清型に比べて導入効率および感染指向性に大きな相違が見られ、カプシド領域の改変によりギャップ結合形成細胞への感染効率が向上した。
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| 現在までの達成度 (区分) |
現在までの達成度 (区分)
3: やや遅れている
理由
動物施設の聴力検査施設が研究棟取り壊しのため閉鎖された。新動物施設への移転が認められず聴力解析実験が停止した。現状復帰のための工事計画も中止となったため実験動物の聴力解析実験が遅れている。
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| 今後の研究の推進方策 |
動物施設における遺伝子治療用施設、聴力検査施設の工事により施設が完成次第、聴力検査の際セッティング、微調整を行う。これによりできるだけ早期に聴力解析実験の現状回復が可能となるよう努める。
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| 次年度使用額が生じた理由 |
施設移転のため、予定していた遺伝子治療実験の対象となるマウスの繁殖が進まず、それに伴い消耗品の消費が少なくなった。今後は新施設でのモデルマウスの作出状況に応じて遺伝子治療実験を再開し、関連する消耗品の購入に使用する予定である。
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