| 研究課題/領域番号 |
18K09626
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| 研究機関 | 日本歯科大学 |
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研究代表者 |
鳥居 大祐 日本歯科大学, 生命歯学部, 講師 (10548259)
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| 研究分担者 |
筒井 健夫 日本歯科大学, 生命歯学部, 教授 (70366764)
堀江 哲郎 日本歯科大学, 生命歯学部, 講師 (10508675)
小林 朋子 日本歯科大学, 生命歯学部, 助教 (10548283)
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| 研究期間 (年度) |
2018-04-01 – 2022-03-31
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| キーワード | Crouzon症候群 / 頭蓋縫合早期癒合症 / FGFR2 / MAPキナーゼ / ゲノム編集 / 一塩基置換 |
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| 研究実績の概要 |
当該年度は、Crouzon症候群の原因となるFibroblast growth factor 2（FGFR2）に関して、歯髄幹細胞におけるスプライシングバリアント解析を行った。その結果に基づき、FGFR2のエクソン10について、CRISPR-Cas9システムを用いて一塩基置換を行うためのガイドRNAとノックインベクターを受託合成により作製した。
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| 現在までの達成度 (区分) |
現在までの達成度 (区分)
3: やや遅れている
理由
当該年度においては、上記のガイドRNAを用いて歯髄幹細胞についてFGFR2の一塩基置換を行った後、DNAアレイ測定や網羅的リン酸化情報に基づきパスウェイ解析を行う予定であったが、COVID-19の影響による必要資材や試薬の流通遅滞などにより、細胞株作製および遺伝子発現解析などは未実施である。
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| 今後の研究の推進方策 |
前年度までに特性解析を行った歯髄幹細胞について、細胞の不死化を行った後、FGFR2の一塩基置換を行う。
FGFR2における変異の有無に関して、得られた細胞試料の分子動態をクラウド型ナレッジベースで解析することで、Crouzon症候群における症状の発症抑制にはたらく新規薬剤選出につながる可能性があると予測している。
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| 次年度使用額が生じた理由 |
進捗状況に関して、FGFR2の一塩基置換についてやや遅れており、次年度使用額が生じている。
次年度は、上記の組換え実験により得られた細胞試料における分子動態の解析に当該助成金を使用させていただく計画である。
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