| 研究課題/領域番号 |
18K09841
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| 研究機関 | 奈良県立医科大学 |
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研究代表者 |
川上 正良 奈良県立医科大学, 医学部, 学内講師 (20244717)
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| 研究分担者 |
和中 明生 奈良県立医科大学, 医学部, 教授 (90210989)
下村 忠弘 奈良県立医科大学, 医学部附属病院, 研究員 (90645607)
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| 研究期間 (年度) |
2018-04-01 – 2022-03-31
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| キーワード | 発生・分化 / 細胞・組織 / 遺伝子 / シグナル伝達 / 上顎 / 歯学 |
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| 研究実績の概要 |
われわれは、これまで顎顔面の形成過程においてWnt シグナルが顔面突起の癒合時期に活性化するが、それを阻害すると、上顎突起組織におけるLhx8、Msx1, Msx2, Bmp4、Sox9、Tbx22、Barx1 の遺伝子発現が低下し上顎組織の細胞増殖活性が減少し、上顎の骨欠損や唇顎裂を発症することを明らかにした。
Wntシグナルが、唇顎口蓋裂の発症の一因であることが示唆されたため、本研究では、Wntシグナルをup-regulateさせると顎顔面にどのような変化が起きるか組織学的、分子生物学的解析を行った。
Wntシグナルをup-regulateさせるためGSK-3b阻害剤であるAlsterpaullone（Sigma-Aldrich）あるいはWnt-3a protein（R&D）を用い、Affi-gel blue beadsに浸潤させ、embryoの上顎突起に埋入した。埋入6時間後 embryoから上顎突起を摘出し、real-Time PCRをおこなった。
その結果、Wnt3aを投与すると組織発生に重要な働きをする遺伝子Msx1、Bmp4、Tbx22、Sox9、Barx1の発現がup-regulateされていることが明らかになった。このことは、Wntシグナルをup-regulateさせると顔面組織の成長発育が促進されることが示唆された。
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| 現在までの達成度 (区分) |
現在までの達成度 (区分)
2: おおむね順調に進展している
理由
当初の計画①real-Time RT-PCRによるmRNAの定量は、上記のとおり良好な結果を得ることができた。②形態形成の組織学的検討は、embryoの発育継続が困難なため十分な結果が得られていない。発育継続させる方法やWnt3aの投与方法を変更し試行している。
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| 今後の研究の推進方策 |
平成30年度からの継続課題②形態形成への影響は、上記のとおり継続して行う。当初の計画の③細胞増殖活性と④免疫組織学的染色は、予定どおり行う。
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| 次年度使用額が生じた理由 |
次年度は国際学会発表のため海外出張を予定している。また研究用ＰＣが古いversionのため新規更新を予定している。これらのため使用額を留保した。
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