| 研究課題/領域番号 |
18K09863
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| 研究機関 | 北海道医療大学 |
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研究代表者 |
倉重 圭史 北海道医療大学, 歯学部, 講師 (30453278)
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| 研究分担者 |
吉田 光希 北海道医療大学, 歯学部, 助教 (30453260)
齊藤 正人 北海道医療大学, 歯学部, 教授 (50337036)
村田 佳織 北海道医療大学, 歯学部, 助教 (70781053)
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| 研究期間 (年度) |
2018-04-01 – 2021-03-31
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| キーワード | CTIP2 / アメロジェニン |
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| 研究実績の概要 |
遺伝性エナメル質石灰化不全症は、アメロジェニン、アメロブラスチン、エナメリンなどのエナメルマトリックスプロテイン（EMPs）遺伝子や、エナメライシン、カリクレイン4などのEMPs分解酵素遺伝子が責任遺伝子とされているが、最近では種々のイオンチャンネルや転写因子および機能不明の遺伝子もその原因として報告されている。エナメル芽細胞が産生するEMPsの分泌には、転写因子MSX2が関与しているとの報告がある。ホメオボックス遺伝子であるMSX2は、組織の分化誘導や石灰化に関与し、数種の転写制御因子と共に複合体を形成する。骨芽細胞やT細胞において、MSX2複合体内には転写制御因子PITX2やBcl11b（CTIP2）が存在するが、エナメル芽細胞のMSX2複合体では、その詳細は不明である。
当該年度は、Flag-CTIP2、Flag-CTIP2（S2D）、sh-CTIP2、MSX2-LUC遺伝子の作成を行った。遺伝子導入に使用するプラスミドをコンピテントに導入し、Large-prepにより精製を行った。また、遺伝子がルイパスツール大学のものと変異の有無を確認した。
HAT7細胞、およびSF細胞におけるエナメルマトリックス遺伝子の測定（Realtime-PCR）
Flag-CTIP2、Flag-CTIP2(S2D)、sh-CTIP2およびPcDNAを遺伝子導入し、エナメルマトリックス（アメロジェニン、アメロブラスチン、エナメリン、エナメライシンなどEMPs）の発現変化をRealtime PCR法にて定量化した。
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| 現在までの達成度 (区分) |
現在までの達成度 (区分)
2: おおむね順調に進展している
理由
特に、問題なく進行している。
現在は、CTIP2ノックアウトマウスの業者を検索している。
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| 今後の研究の推進方策 |
今後の進行予定として、MSX2は複合体であることが他の細胞において報告されている。そのため、複合体関連因子のwestern blotを行い、立証する予定でる。また、今回作製した、CTIP2のFlag、SHの遺伝子導入を行い、MSX2との関連性についても研究する予定である。
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| 次年度使用額が生じた理由 |
消耗品の納入が遅れたため、翌年度に繰り越しとなった。
現時点では納入され問題はない。
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