| 研究課題/領域番号 |
18K09867
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| 研究機関 | 東京歯科大学 |
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研究代表者 |
櫻井 敦朗 東京歯科大学, 歯学部, 講師 (90431759)
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| 研究分担者 |
新谷 誠康 東京歯科大学, 歯学部, 教授 (90273698)
本間 宏実 東京歯科大学, 歯学部, 講師 (80637760)
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| 研究期間 (年度) |
2018-04-01 – 2023-03-31
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| キーワード | 齲蝕 / 小児 / 食育 / 細菌叢 |
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| 研究実績の概要 |
ヒトの出生後、口腔内細菌叢がどのように形成されるのかについては、未だ詳細が明らかとなってはいない。しかし、口腔内に形成される細菌叢はその地点、または近い将来の口腔・全身疾患の罹患リスクを反映していると考えられる。我々はこれまでに、継続的に乳幼児から口腔内サンプルを採取して、出産当日の口腔内にも属レベルで10程度からなる細菌叢が存在し、２歳頃までの早期のうちに成人（両親）の細菌叢に近づき、その後は変化が小さくなっていくことを明らかにした。乳幼児期は口腔の細菌叢の形成時期に当たり、生涯にわたって口腔疾患の発生リスクの低い状態を維持するためには、小児期に適切な食習慣や生活習慣を通じ、正しい口腔内細菌叢を構築するための環境作りが、健全な顎口腔機能の育成に重要であると考えられる。しかし、その考えに従うと３歳未満の低年齢で齲蝕が生じるような小児では、その後生涯にわたって口腔疾患のリスクが高い状態が続くことになる。
本研究では、口腔内細菌叢の形成過程にある乳歯列完成前期・乳歯列期で齲蝕に罹患している小児を対象とし、疾患発症リスクの高い口腔内細菌叢はどの程度改善できるのかを明らかにする。対象者には齲蝕治療だけでなく、必要な齲蝕予防指導を行い、改善の度合いを解析するほか、もともと齲蝕のない小児の細菌叢とも比較した。その結果、齲蝕治療と適切な治療によってある程度齲蝕のない小児の細菌叢に近づくことが示された。
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| 現在までの達成度 (区分) |
現在までの達成度 (区分)
2: おおむね順調に進展している
理由
本研究では、口腔内細菌叢の形成過程にある乳幼児を対象に、口腔内試料を継続的に採取して口腔内細菌叢に関するデータを取得している。また、食習慣や生活習慣が口腔内細菌叢の形成にどのように影響をするのか、齲蝕が多発するなど疾患発症リスクの高い細菌叢は歯科治療や指導によってどの程度改善するのかについて検討を加えた。2021度中に予定していた主な内容は、①2020年度までに協力が得られた被験者について継続的な試料の採取、②次世代シーケンサーを用いた口腔内細菌叢解析、③齲蝕治療前後の細菌叢比較・齲蝕予防指導による改善度の評価、である。
①については、代表者の所属する小児歯科診療室で、乳幼児40名程度に対して同意を得て、少なくとも１回以上の試料採取を行った。細菌叢改善の評価のため、これまでの被験者から２回目（以降）の試料採取を行っている。また、被験者の現在歯、口腔内清掃状態や齲蝕・歯肉の状態を記録し、被験者の生活習慣や食習慣についての記述調査を行なっている。②および③については、前項で得られたゲノムDNAをテンプレートとし、細菌の16S rRNA遺伝子の一部配列の増幅を行い、次世代シークエンサーMiSeqによって遺伝子シークエンスを行っている。得られた配列はウェブ上のデータベースSilva, Human oral microbiome databaseと照合して細菌種を推定している。これまで30名程度について、治療前後の口腔内細菌叢に関するデータを取得した。複数回試料を採取した被験者については、細菌叢の比較・改善度の検討を加えている。
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| 今後の研究の推進方策 |
本研究課題では、食習慣や生活習慣が口腔内細菌叢の形成にどのように影響をするのか、齲蝕が多発するなど疾患発症リスクの高い細菌叢は歯科治療や指導によってどの程度改善するのかについて解析を進めている。現在すでに採取されている試料について、さらに検討を加える予定である。なお、現在次世代シーケンサーを用いて行なっているのは主に細菌叢解析のみであるが、長期的な展望としては今後新規導入予定の機械でRNA発現解析も行なっていきたいと考えている。
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| 次年度使用額が生じた理由 |
本研究で行う予定の細菌叢の改善の評価、改善に向けた最適なアプローチ方法の検討については概ね良好な結果が得られている。しかし、コロナウイルス感染症の流行に伴う緊急事態宣言等もあり、試料採取の進行に時間を要したため、解析にあと少々の時間が必要な状況である。本研究課題は2021年度が最終年度となる予定であったが、解析および学会発表・論文投稿準備のため、2022年度の研究延長申請を提出し、研究を継続することとした。
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