薬剤耐性インフルエンザウイルスの検出系の確立に関する研究

2018 年度 実施状況報告書

• 研究課題/領域番号: 18K10036
• 研究機関: 国立感染症研究所
• 研究代表者: 高下 恵美 国立感染症研究所, インフルエンザウイルス研究センター, 主任研究官 (30361249)
• 研究期間 (年度): 2018-04-01 – 2021-03-31
• キーワード: 抗インフルエンザ薬 / 薬剤耐性ウイルス

研究実績の概要

キャップ依存性エンドヌクレアーゼ阻害剤バロキサビル マルボキシル（S-033188）は、日本国内で開発された新規抗インフルエンザ薬で、2018年2月に世界に先駆けて日本で承認された。一方、バロキサビル マルボキシルの臨床試験において、薬剤感受性が低下した変異ウイルスが検出されたため、耐性ウイルスの発生状況を迅速に把握し、自治体および医療機関に速やかに情報提供することは公衆衛生上極めて重要である。そこで、バロキサビル マルボキシルに対する耐性ウイルスの検出系を構築し、耐性ウイルスの監視体制を確立するのが本研究の目的である。

本年度は、バロキサビル マルボキシルに対するインフルエンザウイルスの感受性を測定するために、培養細胞を用いて薬剤存在下あるいは非存在下でウイルスを増殖させて増殖能を比較するCell based assayを開発し、Plaque reduction assay、CPE reduction assayならびにFocus reduction assayの３系統を構築した。また、開発したCell based assayについて、A(H1N1)pdm09ウイルス、A(H3N2)ウイルスおよびB型ウイルスの代表株を用いて検証を行い、検出系としての妥当性を確認した。次に、日本国内で分離された各型・亜型の流行株について、バロキサビル マルボキシルに対する感受性を測定し、統計学的に感受性低下の判断基準となる基準値を算出した。さらに、次世代シーケンス解析を併用することで、国内流行株の中から、バロキサビル マルボキシル耐性変異を持ち、バロキサビル マルボキシルに対する感受性が約50-120倍低下したA(H1N1)pdm09ウイルスおよびA(H3N2)ウイルスを検出した。

現在までの達成度 (区分)

2: おおむね順調に進展している

理由

当初の研究計画通りに進捗している。

今後の研究の推進方策

バロキサビル マルボキシルは、日本に続き、米国および香港でも承認されたため、耐性ウイルスの監視体制について、世界規模で考える必要が出てきた。そこで、世界保健機関(WHO)の専門家グループと協力し、国内外の耐性ウイルス検出状況について情報共有し、監視体制の強化につなげる。

次年度使用額が生じた理由

年度末納品等にかかる支払いが平成31年4月1日以降となったため。
当該支出分については次年度の実支出額に計上予定であるが、平成30年度分についてはほぼ使用済みである。

研究成果

• [雑誌論文] Detection of influenza A(H3N2) viruses exhibiting reduced susceptibility to the novel cap-dependent endonuclease inhibitor baloxavir in Japan, December 2018. (2019)
  • 著者名/発表者名: Takashita E, Kawakami C, Morita H, Ogawa R, Fujisaki S, Shirakura M, Miura H, Nakamura K, Kishida N, Kuwahara T, Mitamura K, Abe T, Ichikawa M, Yamazaki M, Watanabe S, Odagiri T, On Behalf Of The Influenza Virus Surveillance Group Of Japan.
  • 雑誌名: Euro Surveill. 巻: 24 ページ: 1800698
  • DOI: 10.2807/1560-7917.ES.2019.24.3.1800698.
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] Influenza A(H3N2) virus exhibiting reduced susceptibility to baloxavir due to a polymerase acidic subunit I38T substitution detected from a hospitalised child without prior baloxavir treatment, Japan, January 2019. (2019)
  • 著者名/発表者名: Takashita E, Kawakami C, Ogawa R, Morita H, Fujisaki S, Shirakura M, Miura H, Nakamura K, Kishida N, Kuwahara T, Ota A, Togashi H, Saito A, Mitamura K, Abe T, Ichikawa M, Yamazaki M, Watanabe S, Odagiri T.
  • 雑誌名: Euro Surveill. 巻: 24 ページ: 1900170
  • DOI: 10.2807/1560-7917.ES.2019.24.12.1900170.
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] Global update on the susceptibility of human influenza viruses to neuraminidase inhibitors and status of novel antivirals, 2016-2017. (2018)
  • 著者名/発表者名: Lackenby A, Besselaar TG, Daniels RS, Fry A, Gregory V, Gubareva LV, Huang W, Hurt AC, Leang SK, Lee RTC, Lo J, Lollis L, Maurer-Stroh S, Odagiri T, Pereyaslov D, Takashita E, Wang D, Zhang W, Meijer A.
  • 雑誌名: Antiviral Res. 巻: 157 ページ: 38-46
  • DOI: 10.1016/j.antiviral.2018.07.001.
  • 査読あり / オープンアクセス / 国際共著
• [雑誌論文] Susceptibility of Influenza Viruses to the Novel Cap-Dependent Endonuclease Inhibitor Baloxavir Marboxil. (2018)
  • 著者名/発表者名: Takashita E, Morita H, Ogawa R, Nakamura K, Fujisaki S, Shirakura M, Kuwahara T, Kishida N, Watanabe S, Odagiri T.
  • 雑誌名: Front Microbiol. 巻: 9 ページ: 3026
  • DOI: 10.3389/fmicb.2018.03026.
  • 査読あり / オープンアクセス
• [学会発表] 新規抗インフルエンザ薬バロキサビルマルボキシルに対する耐性株サーベイランス. (2019)
  • 著者名/発表者名: 高下恵美, 森田博子, 小川理恵, 中村一哉, 藤崎誠一郎, 白倉雅之, 桑原朋子, 岸田典子, 三浦秀佳, 秋元未来, 佐藤彩, 菅原裕美, 渡邉真治, 小田切孝人.
  • 学会等名: 8th Negative Strand Virus-Japan.
• [学会発表] Susceptibility of influenza viruses to the novel cap-dependent endonuclease inhibitor baloxavir marboxil. (2018)
  • 著者名/発表者名: Takashita E, Morita H, Ogawa R, Nakamura K, Fujisaki S, Shirakura M, Kuwahara T, Kishida N, Mitamura K, Abe T, Ichikawa M, Yamazaki M, Watanabe S, Odagiri T.
  • 学会等名: 6th isirv Antiviral Group Conference
  • 国際学会
• [備考] 抗インフルエンザ薬耐性株サーベイランス
  • URL: http://www.nih.go.jp/niid/ja/influ-resist.html
• [備考] Antiviral resistance surveillance in Japan
  • URL: http://www.nih.go.jp/niid/en/influ-resist-e.html