| 研究課題/領域番号 |
18K10762
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| 研究機関 | 日本体育大学 |
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研究代表者 |
小林 正利 日本体育大学, 体育学部, 教授 (30320154)
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| 研究期間 (年度) |
2018-04-01 – 2021-03-31
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| キーワード | 筋損傷 / 筋修復 / マクロファージ / 線維芽細胞 / FIB SEM |
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| 研究実績の概要 |
骨格筋の損傷・修復過程において筋組織間質に集積する細胞と、これらの細胞同士の相互関係について、微細3次元構造と組織構築を明らかにすることを目的として、実験動物の腓腹筋を挫滅した資料を用い経時的変化をFIB/SEM（Quanta 3D FEG, FEI）をもちいたデータ取得および3D画像解析おこなって来た。
この結果筋損傷1日後から7日後まで損傷筋の筋間質に、長い突起を有する線維芽細胞様の細胞、分葉核および細胞内に顆粒を有する白血球様の細胞、指状突起を有するマクロファージ様の3種の細胞が存在する事を確認した。これらの3種の細胞は損傷1日後から5日後まで存在することを確認しこれらの細胞が重要な役割を演じている可能性を明らかにしてきた。今年度新たに損傷4日後の資料について解析ソフトを用いて3次元解析・再構築を行った結果、筋管の形成が確認でき、筋管間質にもマクロファージ様細胞の浸潤している所見が得られた。浸潤中のマクロファージ様細胞は血球系の細胞が筋線維外に存在する細胞と接触・連絡し細胞性のネットワークを形成していることも確認出来、線維芽細胞様細胞とも接触している所見が得られた。
ここまでの3次元微細形態観察・解析の結果かから、これらの細胞性ネットワークは筋修復過程で偶然接触したものではない可能性が考えられ、サイトカイン等の液性制御だけでなく間質細胞相互のダイレクトコンタクトによる制御をうける可能性が予想された。
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| 現在までの達成度 (区分) |
現在までの達成度 (区分)
4: 遅れている
理由
他の学内での仕事に追われ、実験を行う時間がなかなかとれないこと。、現在までにFIB/SEMで撮りためたデータを見直しを行った為遅れが生じている。
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| 今後の研究の推進方策 |
今後も現在まで撮りためたデータを再評価する事を行って行きながら、筋損傷後の組織を免疫染色し、光学顕微鏡観察によって細胞相互間の関係を確かめること。筋間質に出現する細胞種を同定すること。を進めて生きたい。
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| 次年度使用額が生じた理由 |
当初購入を予定していたた3次元解析ソフトがヴァージョンアップしたために価格が高くなったこと。現在の解析には現在研究室で購入している解析ソフトでも充分行えたことが理由である。
次年度使用額については当初から予定している請求額と併せて、免疫組織化学研究に用いる抗体や試薬他実験に用いる消耗品および研究打ち合わせおよび学会発表等の旅費等の使用を考えている。
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