| 研究課題/領域番号 |
18K11653
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| 研究機関 | 国立研究開発法人量子科学技術研究開発機構 |
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研究代表者 |
小池 学 国立研究開発法人量子科学技術研究開発機構, 放射線医学総合研究所 重粒子線治療研究部, 主幹研究員(定常) (70280740)
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| 研究期間 (年度) |
2018-04-01 – 2021-03-31
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| キーワード | Ku70 / DSB / XLF / NHEJ / Live cell imaging |
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| 研究実績の概要 |
放射線により誘発されたDNA二本鎖切断(DSB)は生体にとって最も重篤なDNA損傷である。培養細胞の解析から、 DSBは主に、非相同末端結合(NHEJ)と相同組換え(HR)の2つの機構かによって修復するとされている。一方、生体内では複雑な調節を受けていると予測されるが、損傷直後から始まる修復過程を生体内で検出する方法は未開発である。最近、私達はNHEJ機構を生体皮膚で検出し、トレースするためのDSBセンサーマウスの開発に成功した。本研究では新たな次世代DSB修復センサーマウスを開発し、生体内で損傷直後から始まるDNA修復の分子機構を非侵襲的にリアルタイムに解析することを通じて、DNA修復に関わる未解明な生理的意義を提示したいと考えている。本年度は、マウス小腸におけるDSB修復蛋白質の発現解析を行うために、培養細胞等を用いて検出条件の検索と抗体の特異性の検討を開始した。また、GFP標識したDNA修復蛋白質をリポフェクション法で遺伝子導入した培養細胞を材料に、DSB誘導とDSBへの検出条件の検索を開始した。
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| 現在までの達成度 (区分) |
現在までの達成度 (区分)
3: やや遅れている
理由
実験に使用する予定のマウスの繁殖能力が落ちたこと（原因は不明）で必要とするマウスを得られなかったこと、さらに、所属する研究所の実験動物施設において使用する予定の購入マウスから規制対象とされる細菌が検出されたためにマウスを淘汰した。そのために必要とする組換えマウスを年度内に得られなくなったことに加えて、年度後半に研究代表者が受傷しマウスの飼育管理ができなくなったことから、やや遅れている。
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| 今後の研究の推進方策 |
まず、マウスを飼育管理する体制を整えてから、昨年度行う予定であった遅れている実験を推進する。
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| 次年度使用額が生じた理由 |
（理由）所属する研究所の実験動物施設において使用する予定の購入マウスから規制対象とされる細菌が検出されたためにマウスを淘汰した。そのために必要とする組換えマウスを年度内に得られなくなったことに加えて、年度後半に研究代表者が受傷しマウスの飼育管理ができなくなったことから、次年度使用が生じた。
（使用計画）
繰り越した研究費は、遅れているマウスを用いた研究を実施するために使用する予定である。
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