| 研究課題/領域番号 |
18K14474
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| 研究機関 | 京都大学 |
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研究代表者 |
浜島 りな 京都大学, ウイルス・再生医科学研究所, 特別研究員(PD) (20784408)
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| 研究期間 (年度) |
2018-04-01 – 2021-03-31
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| キーワード | リボソーム / hidden break / 昆虫 |
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| 研究実績の概要 |
すべての細胞におけるタンパク質合成は、リボソームRNA (rRNA) とタンパク質からなる巨大複合体、リボソームによって行われる。近年、リボソームの結晶構造解析が飛躍的に進み、リボソームの構造は生物種を超えて高く保存されていることが明らかにされた。その一方で、昆虫リボソームは、一般に“hidden break”という特徴的な構造を有することが知られている。すなわち、昆虫リボソームでは、28S rRNAのES19L領域の一部の塩基が消失しており、28S rRNAが2つに切断された状態で存在している。ほとんどの昆虫がリボソームにhidden breakを持つことからその重要性が示唆されるが、詳細は未解明である。本研究では、hidden breakを分子レベルで解析することにより、昆虫リボソームにおけるhidden breakの存在意義を見出すことを目指す。
本年度は、昆虫のES19L領域を持つrRNAのみを発現する出芽酵母株を作出するため、まず、ES19L領域欠損rRNAのみを発現する出芽酵母株の作出を行った。その結果、ES19L領域全てを欠損したrRNAのみを発現する出芽酵母は生育できなかった。一方、ES19L領域を部分的に欠損した場合は、欠損させる領域によって、生育できるものとできないものが認められた。これらの結果から、今回の実験条件では、先行研究とは異なり、rRNAのES19L領域全ての欠損は、出芽酵母の生育に影響を与えることが明らかになった。
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| 現在までの達成度 (区分) |
現在までの達成度 (区分)
2: おおむね順調に進展している
理由
出芽酵母のrRNAのES19L領域全てをキイロショウジョウバエのrRNAのES19L領域に置換する予定であったが、今年度の結果により、置換する領域の場所や長さが重要になる可能性が示された。このことから、当初の研究計画よりも予備実験が必要であるものの、研究目的の達成に向けて、おおむね順調に進展していると評価した。
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| 今後の研究の推進方策 |
出芽酵母rRNAのES19L領域について、欠損可能な領域を決定する。また、キイロショウジョウバエのES19L領域への置換について、RNAの二次構造予測を用いて、置換に用いるrRNA配列の長さと、置換する場所を決定し、昆虫のES19L領域を持つrRNAのみを発現する出芽酵母株の作出を行う。また、並行して、合成RNAを用いたhidden breakのin vitro系の確立を試みる。
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| 次年度使用額が生じた理由 |
次年度に、当初の計画には含まれていなかったin vitro系の構築を行うにあたり、必要な試薬類を購入するため。
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