研究課題
近年、ウイルス感染症の治療薬候補としてRNAを標的とするアンチセンス人工核酸（ASO）が注目されている。天然核酸と修飾核酸から構成されるASOは、ウイルス複製の中心であるmRNAまたはゲノムRNAに特異的に結合し、RNA分解酵素を誘導することで標的RNAを分解できる。本研究では、一本鎖プラスRNAをゲノムに持つ日本脳炎ウイルス(JEV)をモデルとして、RNA分解型ASOのウイルス増殖抑制効果を明らかにし、次世代のウイルス治療薬となる可能性を示す。令和三年度では、JEVの増殖抑制効果が最も高かったRNA分解型ASO (ASO gapmer)の配列と修飾核酸の特異性を明らかにした。すなわち、オリジナルのASO gapmer配列の一塩基または二塩基を標的RNA配列に結合できない塩基に置換し、オリジナルASOと比較したところ、塩基置換を施したASO gapmerにおけるJEV増殖抑制効果の有意な低下が示された。また、修飾核酸を全てDNAに置換したASO gapmerではJEVの増殖抑制効果が消失し、本研究で使用された修飾核酸が抗JEV作用を発揮するために重要であることが示された。また本年度は、ASO gapmerがウイルスRNA配列を直接的に分解していることを証明できる生化学的スクリーニング法を構築した。本スクリーニング法によって、ASO gapmerのウイルスRNA配列に対する経時的分解作用および、配列または修飾核酸の特異性を生化学的かつ定量的に実証することに成功した。さらに本研究で開発されたASO gapmerが、JEV感染ヒト神経細胞に対しても濃度依存的なJEV増殖抑制作用を発揮することが示された。現在は抗JEV ASO gapmerの遺伝子型または病原性が異なる野外JEV株に対する有効性を解析中である。今後はこれら一連の結果を論文化する予定である。
すべて 2022 2021 その他
すべて 雑誌論文 (2件) (うち国際共著 2件、 査読あり 2件、 オープンアクセス 1件) 学会発表 (2件) 備考 (1件)
Proc Natl Acad Sci U S A.
巻: 119(9) ページ: e2112546119.
10.1073/pnas.2112546119
Int J Mol Sci.
巻: 22(23) ページ: 13065.
10.3390/ijms222313065
https://hp.brs.nihon-u.ac.jp/~nuvercwp/
