乳腺アポクリン癌の細胞形態とPI3K遺伝子変異との関連性の解明

2023 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 18K15096
• 研究機関: 日本大学
• 研究代表者: 野嵜 史 日本大学, 医学部, 助教 (10409021)
• 研究期間 (年度): 2018-04-01 – 2024-03-31
• キーワード: 乳癌 / アポクリン癌 / PI3K遺伝子 / PIK3CA

研究実績の概要

最終年度にはヒト乳癌手術検体におけるPIK3CA遺伝子変異解析を行い、アポクリン癌において3/20例(15.0%)にexon20(H1047R[c.3140A>G])の変異を認めた。
研究期間全体を通じては、PIK3CA遺伝子変異ホットスポットの変異を有さない非アポクリン癌培養細胞HCC1428において、PIK3CA遺伝子exon20のkinase domainである(H1047R[c.3140A>G])部位の変異導入による、細胞形態変化の状態を確認する目的でCRISPR-Cas9法を用い変異導入には成功したが、シングルセルクローニングが困難であり、研究期間内では変異細胞株の樹立ができず、PIK3CA遺伝子変異の有無による細胞形態の変化の観察には至らなかった。PIK3CA遺伝子発現抑制による細胞増殖抑制効果の有無について検討するために、PIK3CA遺伝子変異を有するアポクリン癌培養細胞MDA-MB-453とMFM223、コントロールの細胞としてHCC1428を用い、siRNAによるPIK3CA遺伝子のノックダウン実験を行った。アポクリン癌培養細胞では細胞増殖が有意に抑制されたが、非アポクリン癌培養細胞では有意な抑制はみられなかった(MDA-MB-453:p<0.05、MFM223:p<0.05、HCC1428:p=0.67)。培養細胞においては、PI3K阻害薬のIC50(50％阻害濃度)はPIK3CA遺伝子変異を有する乳癌培養細胞株で低いことより、PIK3CA遺伝子変異は PI3K阻害薬の効果を予測するバイオマーカーとして知られている。ヒト乳癌手術検体アポクリン癌においてPIK3CA遺伝子変異が認められたこと、PIK3CA遺伝子のノックダウンによりアポクリン癌培養細胞増殖が抑制されたことより、アポクリン癌はPIK3分子生物薬などの治療標的となる可能性があることが示された。

研究成果

• [雑誌論文] Different effects of crizotinib treatment in two non-small cell lung cancer patients with SDC4::ROS1 fusion variants (2023)
  • 著者名/発表者名: Yuta Ohishi, Yoko Nakanishi, Yukari Hirotani, Atsuko Suzuki, Tomoyuki Tanino, Haruna Nishimaki-Watanabe, Hiroko Kobayashi, Fumi Nozaki, Sumie Ohni, Xiaoyan Tang, Kentaro Hayashi, Yoshiko Nakagawa, Tetsuo Shimizu, Ichiro Tsujino, Noriaki Takahashi, Yasuhiro Gon, Shinobu Masuda
  • 雑誌名: Thoracic cancer 巻: 15 ページ: 89-93
  • DOI: 10.1111/1759-7714.15168
  • 査読あり
• [雑誌論文] Correlations between class I glucose transporter expression patterns and clinical outcomes in non-small cell lung cancer. (2023)
  • 著者名/発表者名: Yoko Nakanishi, Momoko Iwai, Yukari Hirotani, Ren Kato, Tomoyuki Tanino, Haruna Nishimaki-watanabe, Fumi Nozaki, Sumie Ohni, Xiaoyan Tang, Shinobu Masuda, Kayoko Sasaki-fukatsu
  • 雑誌名: Thoracic cancer 巻: 14 ページ: 2761-2769
  • DOI: 10.1111/1759-7714.15060
  • 査読あり
• [学会発表] コラーゲン・ゲル包埋法の手法および増殖乳癌培養細胞の形状についての報告 (2023)
  • 著者名/発表者名: 野嵜史 , 廣谷ゆかり , 山平 真也 , 増田しのぶ
  • 学会等名: 第64回日本組織細胞化学会総会・学術集会